Bioquimica laboratorio 2, Guías, Proyectos, Investigaciones de Química

¡Descarga Bioquimica laboratorio 2 y más Guías, Proyectos, Investigaciones en PDF de Química solo en Docsity! UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL BIOQUÍMICA PRÁCTICA DE LABORATORIO 2 IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS Integrantes: CHIDA KELY PORRAS LUIS QUIS HPE LUIS SANDOVAL SUMAC TIPÁN PAOLA YÁNEZ EDISON TERCERO AMBIENTAL “E” 2016 PRÁCTICA N° 2 1. TEMA: IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS OBJETIVOS UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL ✓ Aplicar técnicas para la separación y obtención de proteínas y su identificación mediante reacciones químicas. ✓ Adquirir información acerca de las propiedades físicas y químicas de las proteínas. ✓ Comprobar la solubilidad de las proteínas en diferentes solventes. ✓ Identificar y relacionarnos con los instrumentos de laboratorio. 2. TEORÍA 2.1.Las proteínas Las proteínas son compuestos orgánicos constituidos básicamente por: C, H, O y N además de S, P, I. Por sus propiedades físico-químicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples o también llamadas holoproteínas, formadas solo por aminoácidos o sus derivados; y proteínas conjugadas o heteroproteínas, formadas por aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores. Las proteínas simples a su vez se dividen en proteínas fibrosas las cuales son solubles en agua y actúan como elementos estructurales de los tejidos animales y en algunos casos desempeña funciones de protección, ejemplo de ello es la queratina que se encuentra en la piel, cabello, uñas, cuernos, plumas, pezuñas. Las proteínas globulares son solubles en sistemas acuosos, como por ejemplo: la albumina, hemoglobina, la insulina y la tiro globulina. Las proteínas también se clasifican de acuerdo a su función biológica en: enzimas, proteínas de reserva, de transporte, contráctiles, de defensa de la sangre, toxinas, hormonas y estructurales. Cuando una proteína se calienta o trata con cualquiera de una variedad de productos químicos, se pierde la estructura terciaria. Las proteínas se identifican mediante algunos procedimientos básicos como: 2.2.La solubilidad es la medida de la capacidad de disolverse una cierta sustancia en un determinado medio, a una temperatura y presión determinadas. Las proteínas en disolución muestran grandes cambios en su solubilidad, en función de: a. Concentraciones salinas b. Disolventes orgánicos UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL gradilla Una gradilla es un utensilio utilizado para dar soporte a los tubos de ensayos o tubos de muestras. Este se encuentra hecho de madera, plástico o metal. Pipetas de 5 ml Las pipetas permiten la transferencia de un volumen generalmente no mayor a 20 ml de un recipiente a otro de forma exacta. Este permite medir alícuotas de líquido con bastante precisión. Probeta graduada de 100 ml La probeta es un instrumento volumétrico, que permite medir volúmenes superiores y más rápidamente que las pipetas, aunque con menor precisión. Embudo de filtración Un embudo es una pieza cónica de vidrio o plástico que se utiliza para el trasvasijado de productos químicos desde un recipiente a otro. También es utilizado para realizar filtraciones. REACTIVO IMAGEN DESCRIPCIÓN Hidróxido de sodio al 10 % Se usa para fabricar jabones, crayón, papel, explosivos, pinturas y productos del petróleo. También se usa en el procesamiento de textiles de algodón, lavandería y blanqueado, revestimiento de óxidos, y extracción electrolítica Sulfato cúprico al 0.1 % Es un compuesto químico derivado del cobre que forma cristales azules, solubles en agua y metanol y ligeramente solubles en alcohol y glicerina. Ácido nítrico concentrado Es utilizado comúnmente como un reactivo de laboratorio. Se utiliza para fabricar explosivos como la nitroglicerina y trinitrotolueno (TNT), así como fertilizantes como el nitrato de amonio. Utilizado para medir la concentración de Iones Hidrógenos contenido en una UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL Papel indicador de pH sustancia o disolución. El papel tornasol se sumerge en soluciones y luego se retira para su comparación con la escala de pH Muestras Imagen Descripción 2 huevos Se presentan protegidos por una cáscara y son ricos en proteínas (principalmente albúmina que es la clara o parte blanca del huevo) y lípidos. 500 ml de leche Producto del ordeño de un mamífero sano y que no representa un peligro para el consumo humano. 4. PROCEDIMIENTO DEL EXPERIMENTO A. Solubilidad 1. Se realiza un orificio pequeño a un huevo y depositamos la clara en un vaso de precipitación. 2. Tomamos 3 tubos de ensayo y los enumeramos, en cada uno agregamos 1 ml de clara de huevo. UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL 3. En cada tubo añadimos: 5 ml de agua fría al primero, agua caliente al segundo y solución de hidróxido de sodio al 10 % al tercero. 4. Se colocan los tapones en cada tubo de ensayo y agitamos, anotamos lo observado sobre solubilidad de la albumina de huevo. 5. En un vaso de precipitado colocamos 20 ml de clara de huevo y añadimos 60 ml de agua destilada, agitamos y filtramos, colocando en el embudo un pedazo de gasa doblada. Al filtrado se le denomina solución A. el cual se usara para los experimentos siguientes. B. Pruebas coloridas 1. reacción de biuret: en un tubo de ensayo colocamos 1 ml de solución “A” y 1 ml de solución de NaOH al 10 %. 2. UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL 6. CÁLCULOS Y RESULTADOS REACCIÓN DE BIURET COMPUESTO CARACTERÍSTICAS RESULTADO 1 ml de Solución A + 1 ml de NaOH al 10 % + Sulfato cúprico al 0,1% Se produjo un cambio de coloración, la muestra tomo un color violeta Positivo PRUEBA XANTOPROTEICA COMPUESTO CARACTERÍSTICAS RESULTADO 2 ml de Solución A + 5 gotas de NaOH + Se calentó la solución a punto de ebullición y se dejó enfriar. Cambio de coloración a amarillo. Textura más densa PRUEBA DE ANILLO DE HELLER COMPUESTO CARACTERÍSTICAS RESULTADO 3ml de HNO3 + gotas de Solución A Las gotas deben resbalar por la pared del tubo. Forma un anillo de un color amarillo intenso. MEDICIÓN DEL PH COMPUESTO CARACTERÍSTICAS RESULTADO Solución Xantoproteica + Gotas NaOH al 10 % Se utilizó papel tornasol para medir el PH Según la escala el PH de la solución es 0 UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL 7. ANÁLISIS DE RESULTADOS ENSAYO REACCIÓN DE BIURET La muestra tomó una coloración violeta debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos. PRUEVA XANTOPROTEIC A Método que se utilizó para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, por lo tanto su positividad se reconoció por la aparición de un color amarillo (nitración del anillo bencénico) debido a la formación de nitrocompuestos MEDICIÓN DEL PH DE LA SOLUCIÓN De acuerdo al resultado según la escala de colores indica que la solución es ácida. PRUEBA DEL ANILLO DE HÉLLER La prueba resultó positiva debido a que la aparición de un anillo de precipitado proteico en la interfase de los dos líquidos es un signo positivo. 8. CONCLUSIONES ✓ Al realizar las diferentes pruebas se pudo comprobar experimentalmente que se trata de una proteína debido al cambio de coloración que presentaron. ✓ De acuerdo a los resultados obtenidos en la práctica de laboratorio, ninguna sustancia muestra la misma composición que la solución original. UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL ✓ Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el organismo ya que cumplen muchas funciones. ✓ Una vez más nos hemos relacionado con los materiales del laboratorio siempre tomando en cuenta las respectivas precauciones para optimizar el uso de los mismos. (16Ab1) 9. BIBLIOGRAFIA (s.f.). Recuperado el 12 de Abril de 2016, de https://es.scribd.com/doc/15958125/1- PROPIEDADES-QUIMICAS-Y-FISICOQUIMICAS-DE-LAS-PROTEINAS Proteínas. (s.f.). Recuperado el 11 de Abril de 2016, de https:// quimicoclinico.wordpress.com/2008/04/04/proteinas-en-orina-prueba-cualitativa-del- anillo-de-heller/ UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA EDUCACIÓN ACADÉMICA DE PRIMER NIVEL, PARA FORMAR PROFESIONALES Y LÍDERES DE LA MÁS ALTA CALIDAD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL