Mitose - Apostilas - Bioquímica, Notas de estudo de Bioquímica. Universidade Estadual de Maringá (UEM)
Lula_85
Lula_8514 de Março de 2013

Mitose - Apostilas - Bioquímica, Notas de estudo de Bioquímica. Universidade Estadual de Maringá (UEM)

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Apostilas de Bioquímica sobre a Análise em células mitóticas do ápice radicular da cebola, metodos e resultados.
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Relatório da Análise em células mitóticas do ápice  radicular da cebola 

I) Introdução Teórica 

As células passam por diversas etapas cíclicas durante seu desenvolvimento. O ciclo celular é divido  em duas  fases:  Intérfase e divisão celular: mitose  (divisão das células somáticas onde as células‐filhas  recebem o conjunto de  informações genéticas  idênticas ao da célula parental) ou meiose  (divisão das  células  gaméticas  onde  tem  início  com  uma  célula  diplóide  e  término  com  quatro  células  haplóides  geneticamente diferentes entre si). No caso para a análise do ápice radicular da cebola só será estudada  a mitose que, por sua vez, também é dividida em etapas. 

A intérfase é a fase mais demorada, embora não seja o momento em que a célula está em divisão,  muitos eventos importantes estão acontecendo em seu interior. As sub‐etapas da intérfase são: G1, fase  do crescimento. É quando ocorre a síntese de proteínas (enzimas). S, o principal evento é a duplicação  do material  genético. G2,  conhecida  como  fase de preparação, pois ocorre  a  síntese de moléculas e  organelas relacionadas ao processo de divisão celular. 

O núcleo interfásico (Figura 1) recebe esse nome pois só pode ser observado durante a intérfase e  seus  componentes  são:  Membrana  nuclear  ou  Carioteca  possui  uma  membrana  dupla,  porosa  e  apresenta  ribossomos  aderidos;  Carioplasma,  gel  protetor  encontrado  dentro  do  núcleo  com  componentes  nucleares  imersos;  Nucléolo  é  um  enovelado  de  RNAr  que  é  o  principal  componente  químico dos  ribossomos; Cromatina  é o  conjunto de moléculas de DNA que  encontram‐se na  forma  desespiralizada. 

 Figura 1 

Após a última etapa da intérfase ocorre a primeira etapa da mitose, conhecida por prófase, que é a  etapa mais longa da mitose, pois ocorre a condensação do DNA, os centríolos migram para os pólos da  célula e há o desaparecimento da carioteca e do nucléolo.  A etapa seguinte à prófase é a metáfase, nela  o  fuso  acromático  liga‐se  aos  centrômeros  dos  cromossomos,  que  já  estão  em  seu  encurtamento  máximo e, por isso, forma‐se a placa equatorial, onde os cromossomos ficarão dispostos voltados para o  centro do plano com os braços voltados para fora. Na anáfase, fase seguinte, ocorre a fragmentação dos  centrômeros,  com  isso,  há  a  separação  das  cromátides,  cada  uma  delas  passando  a  formar  um  cromossomo, neste momento ocorre o encurtamento das fibras do fuso acromático, havendo, então, a  ascensão  polar  (os  cromossomos  vão  para  os  pólos).  Em  seguida,  com  a  telófase,  a  cromatina  vai  descondensar  e  alongar  os  cromossomos,  o  fuso  acromático  irá  se  dissolver  e  a membrana  nuclear  reaparecerá dispondo‐se em volta dos cromossomos. 

 

Para ter‐se a separação total da célula‐mãe com a célula‐filha é necessário que ocorra a citocinese  (divisão do citoplasma). Para que  isso aconteça são necessárias duas proteínas: a actina e a miosina II,  elas acumulam‐se na  linha equatorial da célula que está em divisão,  formando um anel contrátil que  com o decorrer do tempo tem seu diâmetro reduzido, circundando a célula. 

 

II) Objetivos 

Os objetivos da atividade foram: 

 

 Aprender a manusear o Microscópio Óptico; 

 Preparar o ápice radicular da cebola em álcool (70%); 

 Aprender os procedimentos a serem seguidos para a análise das fases mitóticas; 

 Analisar as fases mitóticas das células da coifa da cebola. 

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III) Materiais e Métodos

III. 1- Materiais químicos e equipamentos: 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                                                                               s 

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Equipamentos: 

 Lâmina; 

 Lamínula; 

 Microscópio óptico; 

 Tubo de ensaio; 

 Pinça; 

 Placa de Petri; 

 Banho Maria; 

 Papel absorvente. 

Materiais químicos:

 Água (H2O); 

 Álcool (70%); 

 Coifa da cebola; 

 Ácido clorídrico (HCl); 

 Fucsina (corante). 

III. 2- Métodos: 

Corta‐se a parte radicular da cebola para a indução da mitose, durante aproximadamente quatro  dias, deixar a parte onde crescerá a nova raiz mergulhada em água, somente esta parte da cebola  deve ficar mergulhada, portanto fincam‐se quatro palitos no corpo da cebola para que haja  sustentação. 

Após o crescimento da raiz, cortar aproximadamente dois centímetros (da parta onde se encontra  a coifa) no horário entre 8h e 10h, pois é o horário mais propício à mitose e mergulhá‐la em álcool  70% (30minutos – 3horas). 

Retirar do álcool 70%, colocá‐la em um  tubo de ensaio  juntamente ao ácido clorídrico,  levar ao  banho maria durante 20 minutos à 60ºC, para que a parede celular amoleça.  

Após os 20 minutos, pegar o material que está dentro do tubo de ensaio com a pinça, pôr na placa  de Petri e retirar o excesso de ácido clorídrico com o papel absorvente. 

Colocar o material,  já  sem o excesso de HCl na  lâmina e, em  seguida aplicar o  corante Fucsina  sobre o material, após três minutos pôr a lamínula sobre a lâmina e em seguida fazer o Squash

Squash: Dobrar em quatro uma  folha de papel absorvente,  colocar a  lâmina preparada  sobre o  papel, dobrar o papel sobre a lâmina e pressionar o polegar na parte da lamínula. 

Pôr  a  lâmina  preparada  sobre  a  Platina  do  microscópio,  achar  o  foco  através  dos  parafusos  micrométrico e macrométrico, escolher o zoom através das lentes objetivas. 

Observação: Para a utilização da lente objetiva de 100x é necessário o uso de óleo mineral que é  posto sobre a lâmina. 

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IV) Resultados 

Todas as fases mitóticas puderam ser observadas com os procedimentos que foram feitos.  

 

Células da coifa da cebola coradas com Fucsina (algumas em Intérfase) 

 

 

 

 

                 Célula em Prófase                                                                  Célula em Metáfase 

                                    

 

                  Célula em Anáfase                                                            Célula em Telófase 

                                 

 

V) Conclusão 

Através desse experimento aprendemos a manusear o microscópio óptico de maneira adequada,  assim como se tornou de nosso conhecimento a preparação da raiz da cebola para a análise da  mitose,  e  nos  tornou mais  fácil  a  visualização  das  suas  fases  e  como  a  preparação  foi  bem  sucedida, foi possível observar claramente as diferentes fases da mitose. 

Foram feitas as seguintes observações: 

 Quando  a  célula  se  encontrava  em  prófase  somente  foi  possível  observar  os  cromossomos enrolados entre si. 

 Já  em metáfase  conseguimos  analisar  a  placa  equatorial  formada  pelos  cromossomos  ligados ao fuso acromático. 

 Em anáfase é possível ver os cromossomos  ligados ao  fuso acromático na sua ascensão  aos pólos da célula. 

 Na telófase é possível observar a formação de dois núcleos, com a cromatina dispersa e  os cromossomos não podem ser vistos. Nesta fase a célula já está sofrendo a citocinese,  podemos observar o estrangulamento. 

Após análise é sabido que sem a mitose não seria possível que houvesse novos seres vegetais,  afinal, é a partir dela que temos o crescimento e o desenvolvimento de qualquer planta. 

 

VI) Referências bibliográficas 

   SOARES, Rosa, ALMEIDA, Carla, SERRA, Lídia, Técnicas Laboratoriais de Biologia – Bloco II, 

Porto Editora, Porto, 2003 

 Barbieri, Fernanda Machado; Ciclo celular e divisão celular; 2005 

 Caderno diário, onde foram tomadas as anotações da atividade experimental 

 http://www.colegioweb.com.br/biologia/interfase‐e‐cromossomos 

 http://www.ufmt.br/bionet/conteudos/15.10.04/citocinese.htm 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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Centro Universitário Estadual da Zona Oeste   

Componentes: 

Christina Albuquerque  Kamila Oliveira  Paula Moura 

Raquel Wainfas   

Professora  Claudia Aiub 

  Ciências Biológicas – 2ºp. 

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