Download Simulador de practica de temperatura en una velocidad de reaccion and more Lecture notes Biochemistry in PDF only on Docsity! Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Práctica 11: Determinación de colesterol en la yema de huevo Integrantes: Téllez Mayol Renata y Vera López Valeria Grupo: 3FM2 Objetivos Comprender el fundamento de la técnica de Liebermann-Burchard, y a partir de ello identificar la cantidad de colesterol presente en la yema de huevo mediante su aplicación. Resultados Tubo A (640 nm) Estándar de colesterol (ml) 80 𝝁𝒈/𝒎𝒍 Cantidad de colesterol (𝝁𝒈) 1 0.026 0.25 20 2 0.102 0.50 40 3 0.235 0.75 60 4 0.304 1.00 80 5 0.386 1.25 100 Cálculos para obtener la cantidad de colesterol (μg) Tubo 1 80 µg = 1 ml X = 0.25 ml 20 µg Tubo 2 80 µg = 1 ml X = 0.50 ml 40 µg Tubo 3 80 µg = 1 ml X = 0.75 ml 60 µg Tubo 4 80 µg = 1 ml X = 1.00 ml 80 µg Tubo 5 80 µg = 1 ml X = 1.25 ml 100 µg Gráfica 1. Cantidad de colesterol (μg) vs absorbancia a 640nm Calcular la cantidad de colesterol para un problema 1 cuya A 640 = 0.184 y para un problema 2 cuya A 640 = 0.257 tome en cuenta que se obtuvo un volumen de extracto de 9 ml a partir de una yema completa. Ecuación dela recta: y= 0.0046x -0.066 Problema 1 𝑥 = 𝑦+0.066 0.0046 = 0.184+0.066 0.0046 = 54.34782609 µ𝑔 54.34 µg = 5 µl X = 9000 μl 𝑥 = 54.34 𝜇𝑔 (9000 𝜇𝑙) 5 𝜇𝑙 = 97830 𝜇𝑔 97830 μg = X 1000 μg = 1 mg 97.83 mg Problema 2 𝑥 = 𝑦+0.066 0.0046 = 0.257+0.066 0.0046 = 70.2173913 µ𝑔 70.21 µg = 5 µl X = 9000 μl 𝑥 = 70.21 𝜇𝑔 (9000 𝜇𝑙) 5 𝜇𝑙 = 12637 𝜇𝑔 12637 μg = X 1000 μg = 1 mg 126.37 mg Discusión de Resultados De acuerdo con el resultado obtenido en mg de colesterol del huevo, se comparó con el valor registrado en la página web del Instituto de Estudios del Huevo el cual dice que “un huevo de tamaño medio contiene unos 200 mg de colesterol, pero tiene más grasas insaturadas que saturadas y sólo 70 calorías”. De la cita anterior, nos interesa el valor de colesterol contenido en un huevo, por lo que se podría afirmar que los 97.83 mg obtenidos en el problema 1 no corresponden al colesterol en el huevo estudiado; esto puede deberse a que tal vez hubo errores al medir los volúmenes de los reactivos o a que los mismos reactivos estaban contaminados. y = 0.0046x - 0.066 R² = 0.989 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 20 40 60 80 100 120A b so rb an ci a (λ =6 4 0 n m ) Cantidad de colesterol (µg) Curva de calibración