Esquema de siembra por estrias, Monografías, Ensayos de Microbiología
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Esquema de siembra por estrias, Monografías, Ensayos de Microbiología

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Cultivos: siembra por estrias en placa petri y tubo de ensayo
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA I

Ensayo de investigación

Tema: Esquema de siembra por estrías

Realizado por: Salgado Manrique Laura Paola cod: 21

Tercer semestre - Paralelo: A

Docente: MgS. Felix Falconi

Período Académico: Abril – Agosto 2019

Fecha de entrega: 13 de junio de 2019

Riobamba – Ecuador

2019

RESUMEN

El objetivo de esta investigación es identificar el esquema de siembra de microorganismos

por técnica de estrías. Se procede tomando la muestra realizando fisuras con el asa en un

medio de cultivo sólido, ya sea en caja Petri o en tubo de ensayo. El resultado de dicha

técnica es hacer posible la separación de una masa de bacterias individuales en unidades que

forman colonias. Cada una de estas unidades se desarrolla en colonias discretas que muestran

características que ayudan a identificar el organismo. Se concluye que el método de siembra

por estría es el más fácil y el más usado para obtener cultivos axénicos y también hace más

factible la identificación del microorganismo.

1. INTRODUCCIÓN Un medio de cultivo es una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir el

crecimiento de microorganismos, en condiciones favorables de pH y temperatura. Existen 3 tipos de medios de cultivo según sus cualidades físicas: líquidos, semisólidos y sólidos. Un

medio liquido carece de un agente solidificante y se denomina caldo de cultivo; si a un caldo

se le adiciona un agente solidificante como agar, se forma un medio semisólido o sólido (1).

Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un

medio adecuado, con el fin de promover intencionalmente el desarrollo de éste, en medios de

cultivo y condiciones favorables de laboratorio controladas. La población de

microorganismos desarrollada en un medio de cultivo se denomina cultivo, cuando el cultivo contiene una sola especie de microorganismo se denomina cultivo puro o axénico; cuando

contiene más de una especie se denomina cultivo mixto: en un cultivo mixto viven muchas y

diferentes especies de microorganismos en forma conjunta. Un cultivo axénico se obtiene

artificialmente en el laboratorio, y para su obtención se deben tomar precauciones especiales

como asegurarse de trabajar en un ambiente de asepsia ya sea en una campana de flujo

laminar o cerca de la flama de un mechero (los microorganismos se encuentran en todas

partes y pueden contaminar nuestra muestra si no se trabaja con precisión) (2). La

identificación de microorganismos es un problema frecuente en el ámbito laboral, por lo que

se hace necesario el empleo de diversas técnicas microbiológicas, entre ellas, los cultivos.

Los estudios que implican cultivos microbianos a menudo requieren la identificación de los

organismos presentes en un cultivo. Cuando una pequeña porción de ese cultivo se inserta en

un medio nutriente que contiene agar, es posible separar una masa de bacterias individuales

en unidades que forman colonias. Cada una de estas unidades se desarrolla en colonias

discretas que muestran características que ayudan a identificar el organismo, por lo cual, la

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técnica de siembra por estrías es de vital importancia ya que permite la identificación del

microorganismo y con ello la instauración del tratamiento más rápido y oportuno. Por lo

tanto, el propósito de esta investigación reside en conocer y aplicar adecuadamente la técnica

de siembra por estrías para el reconocimiento de microorganismos.

2. DESARROLLO 2.1. Requerimientos

Estriar una placa de agar requiere placas de agar nutrientes, un asa para la inoculación, un

cultivo de bacterias, una disolución desinfectante como lysol al 10% y un mechero de

bunsen. También tendrás que vestir ropa de seguridad como una bata de laboratorio, y lentes

de seguridad contra productos químicos. El inóculo para rayar se toma a partir del cultivo

stock bacteriano utilizando el asa y estriando a través de las placas de agar nutriente (3).

2.2. Técnicas

2.2.1. Estriado básico: Se calienta el asa de inoculación hasta que quede color rojo intenso

para eliminar cualquier microorganismo, dejar que el asa se enfrié durante 3-5 segundos.

Recoger una muestra del cultivo bacteriano a partir de un caldo o una placa Petri. Levantar la

tapa de la placa Petri que se va a sembrar en un ángulo de 45°, colocar el asa en la parte de

atrás de la caja, tocar con el asa el medio y pasarlo a través de la superficie de la placa con un

movimiento en forma de S desde atrás hacia adelante (4).

2.2.2. Estriado para aislar: Implica una sola inoculación de una sección de la placa Petri y

a continuación disminuir la colonia arrastrando microorganismos de la sección inicial de dos

a tres secciones adicionales, reduciendo de manera eficaz la población de microorganismos.

Generalmente utilizado para separar un cultivo mixto de las bacterias, aunque, en

microbiología también se utiliza este método para aislar una línea de bacterias que nacen de

un solo progenitor (4).

2.2.3. Estriado por cuadrantes: Es también un método de estriado para aislamiento, que

utiliza cuatro seccione. Se divide la parte inferior de la caja Petri en cuatro partes iguales con

un marcador. Se esteriliza el asa y se estría el primer cuadrante con el procedimiento básico

de S. Se trabaja en el sentido de las agujas del reloj, estriando cuadrante por cuadrante,

esterilizando el asa antes de seguir a otro (4).

2.2.4. Estriado en “T”: Para Llevar a cabo con precisión un estriado en T, se debe dibujar

una T en la parte posterior de la placa petri. Voltear la tapa de la placa hacia abajo, con un

marcador permanente, dividir por la mitad. Dibujar una línea divisora en una de las mitades

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hasta formar una T. Girar la placa de manera que la sección más grande quede a su derecha.

Inocular el asa de acuerdo con el procedimiento anterior. Levantar la tapa e inocular el medio

con el estriado en forma de S pero sin cruzar la línea media. Calentar el asa nuevamente para

matar cualquier microorganismo. Girar el asa a la izquierda hasta que la primera de las

secciones más pequeñas quede en la esquina inferior derecha. Comenzar barriendo en forma

de S en la esquina derecha de la primera sección que estrió, en la nueva sección. Poner el asa

al calor de la llama hasta que quede de color rojo intenso para eliminar cualquier

microorganismo. Girar la placa una vez más y repetir el barrido en S de la segunda sección a

través de la tercera (4).

Fig. 1: Diversas técnicas para el aislamiento por estrías. Fuente: Pineda, H.

2.2.5. En tubo: Esterilizar el asa como ya se mencionó anteriormente. Tomar la porción de

muestra con el asa. Con la mano opuesta a la que sujeta el asa tomar el tubo por la parte

inferior. Con el dedo meñique de la mano con la que sostiene el asa, retirar el tapón de

algodón o la tapa de rosca del tubo, y reténgala, no la coloque en la mesa de trabajo. Flamee

de inmediato la boca del tubo de ensayo, pasándola una o dos veces por la llama del mechero,

con el objetivo de eliminar por incineración los microorganismos contaminantes que se

encuentren en esa zona. Introducir el asa con la muestra en el tubo. A partir de aquí la

siembra se puede realizar de distintas maneras:

a) Estría simple: Se realiza en un tubo con medio sólido inclinado (en bisel o pico de flauta),

y deslizando el asa sobre la superficie expuesta del agar de manera que se marquen surcos o

estrías (5).

b) Siembra mixta: Se realiza sobre medios inclinados o en bisel, haciendo una picadura hasta

el fondo del tubo con asa recta y luego haciendo una siembra en estría sobre la superficie

expuesta del agar, deslizando el asa por la superficie en bisel marcando las estrías; de tal

manera que, con el asa cargada se realizan los dos tipos de siembra y sin retirarla del tubo (5).

c) Siembra por picadura: Se designa con este nombre a la siembra que se realiza con asa recta

en tubos con medios sólidos y semisólidos generalmente sin inclinar. Se realiza introduciendo

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el asa cargada con el microorganismo al medio de cultivo por el centro de la superficie y

llegando con el extremo del asa al fondo del tubo (5).

d) Siembra en medio líquido: Para transferir material a partir de un medio líquido o sólido a

otro líquido, puede usarse el asa bacteriológica (de argolla), o en algunos casos, pipetas estériles o hisopos. Si usted utiliza asas bacteriológicas, inocule el microorganismo en el

medio líquido haciéndola rotar del mango (5).

Fig 2. Técnicas de siembra aplicadas a medios en tubo. (a) Estría simple, (b) Siembra mixta. (c y d) Por picadura en agar inclinado y recto,

y (e) Siembra en medio líquido. Fuente: Gómez, L.

Al concluir la siembra se flamea y se tapona nuevamente el tubo procediendo a esterilizar el

asa en el mechero.

3. CONCLUSIÓN Con esta investigación se identificaron las diferentes técnicas de siembra por estrías para el

desarrollo de cultivos y subcultivos de microorganismos en medios de cultivo dispensados en

tubos y cajas Petri, así como, en medios de diferente composición y estado.

4. RECOMENDACIONES

• En cualquier siembra que se realice, se debe marcar previamente las cajas Petri o los

tubos de manera clara, completa, legible, con la identificación respectiva y la fecha.

Para análisis clínico, marcar siempre las cajas en la base de la caja Petri y para

análisis de control de calidad de alimentos u otras materias primas, marcar las cajas

en la tapa de la caja Petri.

• Luego de realizada la siembra, se debe proporcionar la temperatura y el tiempo

adecuado para la proliferación o crecimiento de los microorganismos, para ello se

dispone de la incubadora o en dado caso, un lugar adecuado a temperatura ambiente.

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• Las cajas Petri se incuban invertidas; si el inóculo no se ha adsorbido, se debe esperar

10 minutos, si este tiempo no es suficiente, se incuban las cajas con la tapa hacia

arriba por 30 minutos antes de invertirlas. Lo anterior, tiene como objetivo impedir

que el agua de condensación que pueda formarse en la tapa de la caja, caiga sobre el

medio dispersando el crecimiento microbiano y evitando la formación clara de las

colonias.

5. BIBLIOGRAFÍA

1. MicrolabS22 (2008). Métodos de Siembra - ESTRIADO. Laboratorio de Microbiologia y

Biotecnología Microbiana. [Internet] [Citado 2019 junio 12] Disponible en: https://

www.microbioblog.com/user/microlabS22/about

2. Tovar, F. (2012). Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estudio

de bacterias. Análisis de procesos microbiológicos. [Internet] [Citado 2019 junio 12]

Disponible en: https://conalepfelixtovar.wordpress.com/2012/09/26/tecnicas-y-metodos-

de-aislamiento-y-seleccion-de-microorganismos/

3. Pineda, H. (sf.). Técnicas de siembra. Instituto Tecnológico de Sonora. México. [Internet]

[Citado 2019 junio 12] Disponible en:

https://www.academia.edu/11620994/T%C3%A9cnicas_de_siembra

4. Quistián, H; Ramírez, J; Ramos, M… Otros. (2014). Técnicas y Métodos de estriado en

caja y tubo (medios de cultivo). Centro Bachillerato Tecnológico Industrial y de

Servicios. México. [Internet] [Citado 2019 junio 12] Disponible en:

http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/

5. Gómez, L. (sf.). Técnicas de siembra para hongos y bacterias. Universidad Popular del

Cesar. Colombia. [Internet] [Citado 2019 junio 12] Disponible en:

https://semilleroluzverde.jimdo.com/app/download/9797072868/Laboratorio%2B3%2B-

%2BSiembra.pdf%3Ft%3D1535558096+&cd=1&hl=es&ct=clnk&gl=ec

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