micro 2º, Ejercicios de Microbiología. Universidad Autónoma de Madrid (UAM)
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micro 2º, Ejercicios de Microbiología. Universidad Autónoma de Madrid (UAM)

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Asignatura: Microbiología Ambiental, Profesor: Concha Abrusci, Carrera: Ciencias Ambientales, Universidad: UAM
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GUIAS​ ​DOCENTES www.cbm.uam.es/jlsanz​.

-​ ​​ ​Pagina​ ​de​ ​pestañas​ ​docencia -​ ​El​ ​segundo​ ​parcial​ ​será​ ​hasta​ ​el​ ​tema​ ​13. -​ ​Bibliografía:​ ​Brock​ ​microbiología​ ​de​ ​los​ ​microorganismos. -​ ​Microbiología​ ​de​ ​Prescott. NO​ ​HAY​ ​CLASE​ ​EL​ ​JUEVES. -​ ​Exámenes​ ​parciales​ ​(3)​ ​con​ ​valoración​ ​del​ ​25​ ​por​ ​ciento.​ ​Hay​ ​que​ ​presentarse​ ​obligatoriamente​ ​a​ ​1. -​ ​Examen​ ​final:​ ​25​ ​o​ ​30​ ​preguntas​ ​que​ ​van​ ​a​ ​cubrir​ ​todo​ ​el​ ​temario​ ​y​ ​preguntas​ ​cortas​ ​valoración​ ​del​ ​50​ ​por​ ​ciento.​ ​No​ ​hace​ ​falta​ ​aprobarlo​ ​para​ ​aprobar​ ​la​ ​asignatura. -​ ​Laboratorio:​ ​15​ ​por​ ​ciento​ ​hay​ ​que​ ​aprobarlo, -​ ​Actividades​ ​complementarias​ ​del​ ​10​ ​por​ ​ciento,​ ​individuales. SOY​ ​DEL​ ​GRUPO​ ​PARA​ ​PRÁCTICAS:​ ​3263​ ​PRÁCTICAS​ ​DEL​ ​1​ ​AL​ ​5​ ​DE​ ​OCTUBRE DIA​ ​30​ ​A​ ​LAS​ ​11​ ​30​ ​DE​ ​LA​ ​MAÑANA​ ​AULAS​ ​3​ ​Y​ ​4

TEMA1:METODOSDEMICROBIOLOGIAYCULTIVODEMICROORGANISMOSRELACIONADOCONELLABORATORIOYELEXAMENDETIPOTEST.

MICROBIOLOGIAAMBIENTAL: -​ ​Las​ ​bacterias​ ​están​ ​consideradas​ ​como​ ​los​ ​primeros​ ​microorganismos.​ ​Toda​ ​la​ ​biosfera​ ​depende​ ​de​ ​sus​ ​actividades​ ​(ciclo​ ​del​ ​nitrógeno​ ​y​ ​del​ ​carbono) La​ ​microbiología​ ​es​ ​la​ ​ciencia​ ​que​ ​estudia​ ​a​ ​los​ ​seres​ ​vivos​ ​que​ ​no​ ​se​ ​pueden​ ​ver​ ​a​ ​simple​ ​vista. Abarca​ ​entidades​ ​sin​ ​estructuras​ ​celulares​ ​procariotas,​ ​protozoos,​ ​parte​ ​de​ ​los​ ​hongos​ ​(los​ ​filamentosos)​ ​y​ ​parte​ ​de​ ​las​ ​algas. 1)NUTRICIONBACTERIANA: Trata​ ​de​ ​los​ ​monómeros​ ​necesarios​ ​para​ ​la​ ​célula,​ ​es​ ​decir,​ ​de​ ​los​ ​​ ​compuestos​ ​químicos​ ​necesarios.​ ​Organismos​ ​diferentes​ ​necesitan​ ​diferentes​ ​nutrientes,​ ​cada​ ​grupo metaboliza​ ​un​ ​tipo​ ​de​ ​nutriente. Los​ ​microorganismos​ ​como​ ​todo​ ​organismo​ ​necesitan​ ​de​ ​macro​ ​nutrientes:​ ​carbono​ ​(que​ ​supone​ ​el​ ​50​ ​por​ ​ciento​ ​de​ ​la​ ​célula)​ ​y​ ​nitrógeno,​ ​principalmente​ ​entre​ ​otros. CONCEPTOS: - Prototrofia:​​ ​capacidad​ ​para​ ​sintetizar​ ​todos​ ​los​ ​compuestos​ ​orgánicos​ ​que​ ​se​ ​necesitan​ ​a​ ​partir​ ​de​ ​la​ ​principal​ ​fuente​ ​de​ ​carbono.​ ​(que​ ​a​ ​partir​ ​del​ ​carbono​ ​se

sinteticen​ ​todos​ ​los​ ​compuestos​ ​orgánicos). - Auxotrofia​:​ ​incapacidad​ ​de​ ​sintetizar​ ​algún​ ​compuesto.

-​ ​Metionina:​​ ​aminoácido​ ​por​ ​el​ ​que​ ​empieza​ ​la​ ​síntesis​ ​de​ ​proteínas. -​ ​Coenzima​ ​A​:​ ​presente​ ​en​ ​el​ ​ciclo​ ​de​ ​krebs​ ​(matriz​ ​mitocondrial)​ ​proceso​ ​que​ ​en​ ​las​ ​bacterias​ ​se​ ​lleva​ ​a​ ​cabo​ ​en​ ​el​ ​citoplasma. -​ ​Quelacion​:​ ​se​ ​introduce​ ​la​ ​sustancia​ ​​ ​dentro​ ​de​ ​la​ ​molécula​ ​(se​ ​solubiliza​ ​antes) -​ ​Endosporas:​​ ​fabricadas​ ​por​ ​un​ ​grupo​ ​reducido​ ​de​ ​microorganismos​ ​entre​ ​ellos​ ​los​ ​bacilos.​ ​​(Tinción​ ​en​ ​laboratorio).​ ​​Clostridium​ ​y​ ​bacilos​ ​tienen​ ​Endosporas​ ​en​ ​la​ ​bacteria problema​ ​​(laboratorio). 2FACTORESDECRECIMIENTO Aminoácidos​ ​​ ​(purinas,​ ​pirimidinias)​ ​y​ ​​ ​vitaminas​ ​(estas​ ​últimas​ ​son​ ​las​ ​que​ ​se​ ​necesitan​ ​para​ ​crecer​ ​más​ ​frecuentemente). 3)FACTORESAMBIENTALES:

Influyen​ ​sobre​ ​el​ ​crecimiento,​ ​supervivencia​ ​y​ ​actividades​ ​metabólicas​ ​de​ ​los​ ​microorganismos. -PH: Debe​ ​ser​ ​adecuado​ ​y​ ​mantenerse​ ​durante​ ​todo​ ​el​ ​periodo​ ​de​ ​crecimiento La​ ​fermentación​ ​de​ ​carbohidratos​ ​libera​ ​ácidos​ ​orgánicos​ ​al​ ​medio​ ​con​ ​la​ ​consiguiente​ ​acidificación​ ​y​ ​detención​ ​del​ ​crecimiento.​ ​Clasificación: -Acidófilos:​​ ​hongos​ ​bacterias​ ​y​ ​archeas​ ​(PH​ ​menor​ ​de​ ​6) -Alcalófilos:​​ ​la​ ​mayoría​ ​de​ ​las​ ​bacterias:​ ​archeas,​ ​bacilus​ ​firmus.​ ​Son​ ​suelos​ ​sódicos​ ​o​ ​suelos​ ​ricos​ ​en​ ​carbonato.​ ​PH​ ​alto. -TEMPERATURA​​​​(FACTOR​ ​IMPORTANTE) Determina​ ​la​ ​velocidad​ ​de​ ​crecimiento​ ​en​ ​función​ ​de​ ​la​ ​ley​ ​de​ ​arrenihus.​ ​Los​ ​microorganismos​ ​tienen​ ​3​ ​tipos​ ​de​ ​temperatura:​ ​mínima​ ​máxima​ ​y​ ​óptima.​ ​En​ ​la​ ​mínima tendríamos​ ​gelificacion​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​y​ ​por​ ​tanto​ ​un​ ​crecimiento​ ​lento.​ ​Si​ ​aumenta​ ​hasta​ ​la​ ​Temperatura​ ​ideal​ ​u​ ​óptima​ ​tendríamos​ ​un​ ​crecimiento​ ​óptimo.​ ​Si​ ​llegamos​ ​a la​ ​máxima​ ​se​ ​produce​ ​la​ ​desnaturalización​ ​proteica,​ ​colapso​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​y​ ​lisis​ ​térmica. -Psicrofilo​:​ ​temperatura​ ​óptima​ ​de​ ​4​ ​grados​ ​y​ ​la​ ​mínima​ ​dependiendo,​ ​por​ ​debajo​ ​de​ ​cero​ ​menos​ ​7​ ​o​ ​menos​ ​8.​ ​La​ ​temperatura​ ​máxima​ ​de​ ​estos​ ​coincide​ ​con​ ​la​ ​mínima​ ​de un​ ​mesófilo. -Mesofilo:​​ ​la​ ​mayoría​ ​(39​ ​de​ ​optima) -Termófilo:​​ ​temperatura​ ​óptima​ ​de​ ​60. -Hipertermófilo​:​ ​temperatura​ ​óptima​ ​de​ ​hasta​ ​80​ ​o​ ​100.

-OXIGENO(ambienteóxicoyanoxico): Aceptor​ ​final​ ​en​ ​organismos​ ​aerobios.​ ​Las​ ​anaerobias​ ​facultativas​ ​utilizan​ ​el​ ​oxigeno​ ​si​ ​lo​ ​hay,​ ​o​ ​utilizan​ ​otro​ ​mecanismo​ ​si​ ​no​ ​hay​ ​presencia​ ​de​ ​oxigeno​ ​en​ ​su​ ​metabolismo. ​ ​De​ ​acuerdo​ ​a​ ​su​ ​respuesta​ ​frente​ ​al​ ​O2​ ​las​ ​bacterias​ ​se​ ​clasifican​ ​como: -Aerobias:​​ ​dependen​ ​del​ ​O2.​ ​​Microaerófilas​:​ ​prefieren​ ​concentraciones​ ​bajas​ ​(2%). -​ ​Anaerobias​ ​facultativas:​​ ​utilizan​ ​O2​ ​si​ ​está​ ​presente,​ ​pero​ ​pueden​ ​crecer​ ​en​ ​su​ ​ausencia. -​ ​Anaerobias​:​ ​no​ ​pueden​ ​utilizar​ ​O2.​ ​Pueden​ ​ser: ● Estrictas​:​ ​el​ ​O2​ ​es​ ​tóxico​ ​(Clostridium)

● Aerodúricas​ ​o​ ​aerotolerantes​:​ ​toleran​ ​el​ ​O2.​ ​(Enterococcus​ ​faecalis) Las​ ​aerotolerantes​ ​y​ ​los​ ​anaerobios​ ​estrictos​ ​no​ ​pueden​ ​generar​ ​energía​ ​mediante​ ​la​ ​respiración​ ​aerobia​ ​y​ ​utilizan​ ​la​ ​fermentación​ ​y​ ​la​ ​respiración​ ​anaerobia. Toxicidad​ ​del​ ​oxígeno​ ​y​ ​de​ ​los​ ​subproducto​ ​del​ ​metabolismo​ ​oxidativo​ ​(radical​ ​superóxido,​ ​radicales​ ​y​ ​agua​ ​oxigenada). 4)LIMITACIONDELCRECIMIENTOPORFACTORESAMBIENTALES: El​ ​desarrollo​ ​de​ ​los​ ​microorganismos​ ​(cómo​ ​de​ ​cualquier​ ​ser​ ​vivo)​ ​se​ ​rige​ ​por​ ​dos​ ​principios: -LeydelMínimodeLiebig(1840).​​ ​​(El​ ​nutriente​ ​menos​ ​disponible​ ​es​ ​el​ ​que​ ​va​ ​a​ ​limitar​ ​el​ ​crecimiento) -LeydelaToleranciadeShelford:​​ ​de​ ​electrones​ ​en​ ​los​ ​organismos​ ​aerobios.​ ​(Independientemente​ ​de​ ​los​ ​nutrientes​ ​del​ ​medio​ ​los​ ​limites​ ​los​ ​van​ ​a​ ​plantear​ ​también​ ​los factores​ ​ambientales​ ​por​ ​los​ ​cuales​ ​el​ ​mecanismo​ ​va​ ​a​ ​poder​ ​sobrevivir​ ​dependiendo​ ​del​ ​oxigeno​ ​temperatura​ ​y​ ​pH). 4)CONTROLDEMICROORGANISMOSMEDIANTEAGENTESFISICOSYQUIMICOS (CUADRO​ ​PREGUNTA​ ​DE​ ​EXAMEN)

- Esterilización​​ ​muerte​ ​o​ ​eliminación​ ​de​ ​células​ ​vivas​ ​o​ ​de​ ​esporas​ ​muy resistentes​ ​o​ ​entidades​ ​acelulares,​ ​que​ ​contiene​ ​un​ ​objeto​ ​o​ ​un​ ​hábitat.​ ​El​ ​objeto estéril​ ​está​ ​totalmente​ ​libre​ ​de​ ​microorganismos​ ​y​ ​otros​ ​agentes​ ​infecciosos. - Desinfectante:​​ ​agente​ ​normalmente​ ​químico​ ​que​ ​elimina​ ​la​ ​carga

microbiana​ ​en​ ​superficies​ ​inanimadas.​ ​No​ ​esteriliza​ ​por​ ​lo​ ​que​ ​no​ ​elimina​ ​las​ ​esporas y​ ​tampoco​ ​ciertos​ ​microorganismos. - Antiséptico​:​ ​agente​ ​químico​ ​que​ ​se​ ​aplica​ ​sobre​ ​tejidos​ ​(el​ ​alcohol​ ​sirve

como​ ​desinfectante​ ​o​ ​antiséptico)​ ​Reduce​ ​también​ ​la​ ​población​ ​microbiana.​ ​Ni​ ​la lejía​ ​ni​ ​el​ ​alcohol​ ​son​ ​esterilizantes.

-​​AGENTESANTIMICROBIANOSFISICOS: CALOR:

Va​ ​a​ ​depender​ ​de​ ​la​ ​resistencia​ ​del​ ​microorganismo.​ ​Va​ ​a​ ​variar​ ​dependiendo​ ​del microorganismo.​ ​La​ ​eficacia​ ​del​ ​calor​ ​como​ ​esterilizante​ ​se​ ​llama​ ​reducción​ ​decimal o​ ​D​ ​es​ ​decir​ ​que​ ​necesito​ ​un​ ​tiempo​ ​determinado​ ​para​ ​que​ ​me​ ​quede​ ​solo​ ​el​ ​10​ ​por ciento​ ​de​ ​la​ ​población​ ​original​ ​del​ ​microorganismo.

-​ ​PMT​:​ ​punto​ ​de​ ​muerte​ ​térmica.​ ​La​ ​temperatura​ ​más​ ​baja​ ​necesaria​ ​para​ ​causar​ ​la​ ​muerte​ ​de​ ​todas​ ​las​ ​bacterias​ ​en​ ​suspensión​ ​liquida​ ​particular​ ​en​ ​10​ ​minutos. -​ ​TMT:​​ ​temperatura​ ​de​ ​muerte​ ​térmica.​ ​El​ ​menor​ ​tiempo​ ​necesario​ ​para​ ​que​ ​todas​ ​las​ ​bacterias​ ​de​ ​un​ ​cultivo​ ​líquido​ ​mueran​ ​a​ ​una​ ​T​ ​determinada. -​ ​El​ ​calor​ ​húmedo​ ​puede​ ​ser​ ​por:

● Ebullición​:​ ​llevamos​ ​a​ ​cabo​ ​la​ ​desinfección​ ​mediante​ ​desnaturalización​ ​de​ ​proteínas​ ​(no​ ​elimina​ ​esporas). ● Autoclave​:​ ​desnaturalización​ ​de​ ​los​ ​proteínas​ ​método​ ​de​ ​esterilización​ ​muy​ ​eficaz​ ​que​ ​elimina​ ​todas​ ​las​ ​células​ ​vegetativas​ ​y​ ​sus​ ​Endosporas​ ​en​ ​15​ ​minutos​ ​a​ ​121

grados ● Pasteurización​:​ ​desnaturalización​ ​de​ ​proteínas;​ ​tratamiento​ ​de​ ​calor​ ​para​ ​la​ ​leche.​ ​Reduce​ ​la​ ​carga​ ​microbiana​ ​en​ ​la​ ​leche​ ​y​ ​otros​ ​alimentos​ ​termos​ ​sensibles.​ ​No​ ​se

destruyen​ ​todos​ ​los​ ​organismos​ ​(no​ ​esteriliza)​ ​Permite​ ​controlar​ ​patógenos​ ​como​ ​listeria​ ​monocytogenes,​ ​algunas​ ​especies​ ​de​ ​campylobacter,​ ​salmonella, Scherichia​ ​coli​ ​.Se​ ​encuentran​ ​en​ ​la​ ​leche​ ​y​ ​en​ ​los​ ​zumos.​ ​Retrasa​ ​el​ ​crecimiento​ ​de​ ​organismos​ ​alterantes.

-Tipos​ ​de​ ​calor​ ​seco: ● Flameado​ ​directo​:​​ ​combustión​ ​de​ ​contaminantes​ ​y​ ​producción​ ​de​ ​cenizas.​ ​Método​ ​de​ ​esterilización​ ​muy​ ​eficaz​ ​Asas​ ​de​ ​inoculación ● Incineración​:​ ​combustión​ ​de​ ​productos​ ​y​ ​cenizas.​ ​Método​ ​de​ ​esterilización​ ​muy​ ​eficaz​ ​Vasos​ ​de​ ​papel​ ​apósitos​ ​contaminados​ ​cadáveres​ ​de​ ​animales. ● Esterilización​ ​por​ ​aire​ ​caliente​ ​(horno​ ​seco):​​ ​Produce​ ​oxidación.​ ​Método​ ​de​ ​esterilización​ ​muy​ ​eficaz​ ​pero​ ​con​ ​una​ ​temperatura​ ​​ ​170​ ​grados/​ ​2​ ​horas.​ ​Recipientes

de​ ​vidrios​ ​vacios​ ​agujas​ ​y​ ​jeringas​ ​de​ ​vidrio. -Conceptos -​ ​Bacilos​ ​de​ ​placa​ ​petry​ ​son​ ​masas​ ​blancas. -​ ​La​ ​temperatura​ ​es​ ​lo​ ​que​ ​mata​ ​a​ ​los​ ​organismos​ ​y​ ​no​ ​la​ ​presión​ ​(aunque​ ​esta​ ​ayuda​ ​a​ ​que​ ​se​ ​favorezca​ ​la​ ​temperatura).

● Levaduras​:​ ​5​ ​minutos​ ​a​ ​50​ ​o​ ​60​ ​grados​ ​(esporas:​ ​70​ ​u​ ​80) ● Mohos​​ ​(30​ ​minutos​ ​a​ ​62​ ​grados)​ ​(esporas​ ​a​ ​30​ ​mins​ ​a​ ​80​ ​grados) ● Bacterias:​​ ​10​ ​minutos​ ​a​ ​60​ ​o​ ​70​ ​grados​ ​(esporas​ ​800​ ​minutos​ ​o​ ​mas​ ​a​ ​100​ ​grados). ● Mycobacterium​ ​tuberculosis

RADICACION: Las​ ​microondas,​ ​la​ ​radiación​ ​ultravioleta​ ​etc.​ ​Va​ ​a​ ​depender​ ​de​ ​la​ ​dosis​ ​y​ ​del​ ​tiempo. -Radiaciones​ ​ionizantes.​​ ​Radiaciones​ ​electromagnéticas​ ​por​ ​la​ ​que​ ​se​ ​producen​ ​electrones​ ​radicales​ ​hidroxilos​ ​o​ ​radicales​ ​híbridos.​ ​Estas​ ​radiaciones​ ​degradan macromoléculas​ ​(entre​ ​ellas​ ​el​ ​DNA).​ ​Las​ ​radiaciones​ ​ionizantes​ ​esterilizan. Estas​ ​radiaciones​ ​tienen​ ​una​ ​longitud​ ​menor​ ​de​ ​1​ ​nm:

● Rayos​ ​gamma​:​ ​que​ ​penetran​ ​profundamente​ ​(bactericida​ ​fungicida​ ​alguicida​ ​o​ ​viricida.)​ ​por​ ​tanto​ ​requieren​ ​horas​ ​de​ ​esterilización​ ​para​ ​grandes​ ​volúmenes. ● Rayos​ ​x​:​ ​penetran​ ​muy​ ​poco​ ​pero​ ​bastan​ ​unos​ ​segundos​ ​para​ ​destruir​ ​la​ ​molécula.

-Radiaciones​ ​no​ ​ionizantes​:​ ​la​ ​longitud​ ​de​ ​onda​ ​es​ ​superior​ ​a​ ​1​ ​nm. ● Luz​ ​ultravioleta​​ ​(lesiona​ ​el​ ​DNA​ ​formando​ ​dímeros​ ​de​ ​timina).

La​ ​más​ ​eficaz​ ​para​ ​eliminar​ ​microorganismos​ ​es​ ​de​ ​260​ ​nm.​ ​Se​ ​utiliza​ ​para​ ​eliminar​ ​microorganismos​ ​en​ ​el​ ​aire:​ ​se​ ​trata​ ​de​ ​desinfección​ ​y​ ​no​ ​de​ ​esterilización:​ ​no​ ​es​ ​muy penetrante​ ​los​ ​microorganismos​ ​deben​ ​estar​ ​expuestos​ ​directamente​ ​a​ ​los​ ​rayos. (SIEMPRE​ ​CAE​ ​PREGUNTA​ ​DE​ ​EXAMEN​ ​DE​ ​AQUÍ) FILTRACION. -​ ​Filtro​ ​de​ ​profundidad​:​ ​(no​ ​entra​ ​en​ ​el​ ​examen)​ ​desinfección.​ ​Formado​ ​por​ ​fibras​ ​de​ ​papel:​ ​Se​ ​utiliza​ ​mucho​ ​para​ ​procesos​ ​industriales​ ​y​ ​en​ ​el​ ​ámbito​ ​domestico.​ ​EPA:​ ​filtro de​ ​aire​ ​particulado​ ​de​ ​alta​ ​eficacia. -Filtro​ ​de​ ​membrana​:​ ​esterilización.​ ​Puede​ ​ser​ ​de​ ​acetato​ ​de​ ​celulosa​ ​o​ ​de​ ​nitrato​ ​de​ ​celulosa.​ ​Tamaño​ ​de​ ​poro​ ​pequeño​ ​no​ ​retinen​ ​ni​ ​virus​ ​ni​ ​nucleoplasmas​ ​pero​ ​se considera​ ​que​ ​pueden​ ​esterilizar.​ ​(Soluciones​ ​termolábiles​ ​y​ ​emulsiones​ ​oleosas). Se​ ​realiza​ ​mediante​ ​una​ ​jeringa​ ​con​ ​un​ ​filtro. (IMPORTANTE​ ​PARA​ ​EXAMEN​ ​ESTE​ ​ULTIMO). -AGENTESANTIMICROBIANOSQUIMICOS: Compuesto​ ​químico​ ​que​ ​puede​ ​ser​ ​tanto​ ​natural​ ​como​ ​sintético​ ​que​ ​mata​ ​o​ ​inhibe​ ​el​ ​crecimiento​ ​de​ ​microorganismos. Las​ ​sustancias​ ​que​ ​destruyen​ ​microorganismos​ ​suelen​ ​terminar​ ​con​ ​el​ ​sufijo​ ​cida​ ​(matar). -​ ​Germicida:​​ ​destruye​ ​microorganismos​ ​patógenos​ ​pero​ ​no​ ​necesariamente​ ​Endosporas.​ ​​ ​Bactericida​ ​funguicida​ ​alguicida -​ ​No​ ​destruyen​ ​los​ ​microbios​ ​pero​ ​impiden​ ​su​ ​crecimiento. -AGENTESANTIMIBROBIANOSQUIMICOSDEUSO​​EXTERNO: --Ámbito​ ​industrial. --Ámbito​ ​comercial. --Diseñados​ ​para​ ​que​ ​no​ ​crezcan​ ​dentro​ ​de​ ​los​ ​seres​ ​humanos​ ​tanto​ ​en​ ​ambientes​ ​inanimados​ ​como​ ​en​ ​superficies​ ​corporales​ ​externas -​ ​AGENTES​ ​ESTERILIZANTES: ● Esporicidas:​​ ​destruyen​ ​todos​ ​los​ ​tipos​ ​de​ ​vida​ ​microbiana​ ​incluidas​ ​las​ ​endosporas.​ ​Se​ ​utilizan​ ​en​ ​situaciones​ ​en​ ​los​ ​que​ ​no​ ​puede​ ​utilizarse​ ​el​ ​calor​ ​y​ ​la​ ​radiación.

La​ ​endospora​ ​germinara​ ​en​ ​condiciones​ ​favorables​ ​de​ ​T​ ​PH​ ​y​ ​oxigeno: ● Agentes​ ​químicos​ ​gaseosos:

- Oxido​ ​de​ ​etileno:​​ ​esterilizante​ ​y​ ​esporicida,​ ​Quirúrgico. - Formaldehido:​​ ​esterilizante​ ​esporicida.

● Agentes​ ​químicos​ ​líquidos: - Peróxido​ ​de​ ​hidrogeno​ ​vaporizado​:​ ​utilizado​ ​para​ ​quirófanos​.​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​Cuando​ ​no​ ​es​ ​vaporizado​ ​no​ ​es​ ​esterilizante. - Hipoclorito​ ​de​ ​sodio​​ ​lejía.​ ​desinfectante.

● Agentes​ ​químicos​ ​líquidos​ ​antisépticos​:

Matan​ ​o​ ​inhiben​ ​el​ ​crecimiento​ ​de​ ​microorganismos. - Etanol:​ ​65​ ​o​ ​80​ ​por​ ​ciento.

- Compuestos​ ​con​ ​fenol. - Detergentes​ ​cationicos - Compuestos​ ​yodo​ ​foros

La​ ​acción​ ​de​ ​todos​ ​los​ ​anteriores​ ​compuestos​ ​depende​ ​de​ ​la​ ​concentración,​ ​tiempo​ ​de​ ​exposición​ ​y​ ​el​ ​modo​ ​de​ ​administración. Sin​ ​embargo​ ​los​ ​microorganismos​ ​tienen​ ​la​ ​capacidad​ ​de​ ​responder​ ​contra​ ​lo​ ​que​ ​se​ ​le​ ​está​ ​administrando​ ​en​ ​contra.​ ​Estos​ ​agentes​ ​antimicrobianos​ ​pueden​ ​ser​ ​por​ ​tanto neutralizados.​ ​Son​ ​capaces​ ​de​ ​o​ ​bien​ ​fabricar​ ​materiales​ ​orgánicos​ ​que​ ​impidan​ ​la​ ​entrada,​ ​o​ ​bien​ ​fabricar​ ​una​ ​capsula​ ​alrededor​ ​de​ ​ellos​ ​o​ ​bien​ ​formando​ ​una​ ​biopelícula. 5)TÉCNICASDEENRIQUECIMIENTO: -​ ​Medio​ ​de​ ​cultivo:​​ ​puede​ ​ser​ ​una​ ​mezcla​ ​de​ ​nutrientes​ ​para​ ​poder​ ​aislar​ ​a​ ​los​ ​microorganismos​ ​a​ ​una​ ​concentración​ ​adecuada​ ​y​ ​a​ ​unas​ ​condiciones​ ​óptimas​ ​de​ ​PH​ ​y temperatura​ ​y​ ​oxigeno.​ ​El​ ​medio​ ​de​ ​cultivo​ ​nos​ ​va​ ​a​ ​permitir​ ​el​ ​crecimiento​ ​por​ ​tanto​ ​de​ ​los​ ​microorganismos. Los​ ​microorganismos​ ​necesitan​ ​una​ ​fuente​ ​de​ ​carbono​ ​nitrógeno​ ​y​ ​azufre,​ ​una​ ​base​ ​mineral​ ​(oligoelementos:​ ​calcio)​ ​y​ ​unos​ ​factores​ ​de​ ​crecimiento​ ​(algunos​ ​esenciales​ ​y otros​ ​no,​ ​unos​ ​necesitan​ ​vitaminas​ ​otros​ ​no). -Cultivo​ ​axénico.​​ ​Cultivo​ ​de​ ​una​ ​sola​ ​especie​ ​bacteriana​ ​proveniente​ ​de​ ​una​ ​sola​ ​célula (IMPORTANTE​ ​LA​ ​DEFINICION). ● Tipos​ ​de​ ​medio​ ​de​ ​cultivo:

- Estado​ ​físico​​ ​​ ​como​ ​se​ ​encuentran,​ ​si​ ​son​ ​líquidos​ ​o​ ​sólidos​ ​o​ ​semisólidos​.​ ​El​ ​de​ ​clase​ ​es​ ​sólido​ ​y​ ​le​ ​añadimos​ ​Agar. - Composición​ ​química:

➢ Medio​ ​definido​ ​o​ ​sintético​:​ ​aquel​ ​que​ ​se​ ​conoce​ ​su​ ​composición​ ​química​ ​exacta​ ​del​ ​preparado,​ ​porque​ ​ha​ ​sido​ ​preparado​ ​a​ ​partir​ ​de​ ​compuestos químicos​ ​puros.

➢ Medios​ ​complejos​ ​o​ ​indefinidos:​​ ​aquel​ ​del​ ​cual​ ​se​ ​desconoce​ ​su​ ​composición​ ​química​ ​exacta​ ​porque​ ​ha​ ​sido​ ​preparado​ ​a​ ​partir​ ​de​ ​estractos naturales.​ ​Cuando​ ​no​ ​se​ ​conoce​ ​las​ ​necesidades​ ​nutricionales​ ​de​ ​los​ ​microorganismos​.​ ​(EL​ ​DE​ ​CLASE​ ​ERA​ ​ASÍ).​​ ​En​ ​cuanto​ ​aparece​ ​la​ ​palabra ESTRACTO​ ​es​ ​indefinido​ ​seguro,​ ​cuando​ ​aparece​ ​PECTONA​ ​LO​ ​MISMO​ ​ya​ ​que​ ​es​ ​una​ ​proteína​ ​pero​ ​desconocemos​ ​cual.

​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​​ ​MUY​ ​IMPORTANTES​ ​AMBOS​ ​TÉRMINOS.​ ​CAEN​ ​SIEMPRE.

- Tipos​ ​funcionales​ ​de​ ​medios​ ​de​ ​cultivo:

➢ Medios​ ​generales​ ​o​ ​de​ ​mantenimiento:​​ ​se​ ​utilizan​ ​para

cultivar​ ​muchos​ ​microorganismos​ ​diferentes.​ ​Caldo​ ​tríptico​ ​de​ ​soja​ ​y​ ​el​ ​Agar​ ​tríptico de​ ​soja.​ ​Cuando​ ​le​ ​quitas​ ​el​ ​Agar​ ​se​ ​forma​ ​el​ ​caldo:​ ​TSA​ ​​ ​a​ ​TSB​ ​(​ ​B​ ​DE​ ​CALDO​ ​EN INGLES​ ​QUE​ ​ES​ ​DE​ ​BROTH)

➢ Medios​ ​de​ ​enriquecimiento​​ ​favorece​ ​el​ ​crecimiento​ ​de microorganismos​ ​exigentes

➢ Medios​ ​selectivos​:​ ​que​ ​favorecen​ ​a​ ​determinados​ ​grupos de​ ​determinados​ ​microorganismos​ ​mientras​ ​suprime​ ​el​ ​crecimiento​ ​de​ ​otros.​ ​La selección​ ​se​ ​realiza​ ​mediante​ ​la​ ​adición​ ​de​ ​un​ ​inhibidor.​ ​(antibióticos,​ ​algunos colorantes​ ​una​ ​única​ ​fuente​ ​de​ ​carbono.)​ ​​EL​ ​AGAR​ ​ENDO,​ ​EL​ ​AGAR​ ​EOSINA​ ​AZUL​ ​DE METILENO,​ ​Y​ ​EL​ ​AGAR​ ​MACcONKEY​ ​SON​ ​USADOS​ ​PARA​ ​LA​ ​​ ​DETECCIÓN​ ​DE​ ​E.​ ​COLI​ ​Y

BACTERIAS​ ​RELACIONADAS​ ​CON​ ​MUESTRAS​ ​DE​ ​AGUA​ ​(SI​ ​SE​ ​TIÑE​ ​DE​ ​VERDE​ ​ES​ ​E.COLI) ➢ Medios​ ​diferenciales:​​ ​aquellos​ ​que​ ​permiten​ ​diferenciar​ ​grupos,​ ​basándose​ ​en​ ​características​ ​biológicas.​ ​​Streptococcus​ ​pyogenes.​ ​Para​ ​ver​ ​si

existe​ ​o​ ​no​ ​le​ ​ponemos​ ​Agar​ ​sangre​ ​el​ ​cual​ ​hidroliza​ ​distinguiéndose​ ​zonas​ ​claras​ ​que​ ​se​ ​producen​ ​por​ ​la​ ​destrucción​ ​de​ ​eritrocitos​ ​al​ ​ser hemolítico.​ ​Sería​ ​un​ ​medio​ ​diferencial​.​ ​​Tipo​ ​funcional​ ​(IMPORTANTE​ ​PARA​ ​AMBOS​ ​EXAMENES).

CONCEPTOS: -Concentración​ ​mínima​ ​inhibitoria: ​ ​Es​ ​la​ ​cantidad​ ​más​ ​pequeña​ ​que​ ​se​ ​necesita​ ​de​ ​un​ ​agente​ ​microbiano​ ​para​ ​inhibir​ ​el​ ​crecimiento​ ​de​ ​un​ ​microorganismo.​ ​(CMI)

Para​ ​determinar​ ​la​ ​CMI​ ​de​ ​un​ ​determinado​ ​agente​ ​frente​ ​a​ ​un​ ​microorganismo,​ ​se​ ​preparan​ ​una​ ​serie​ ​de​ ​tubos​ ​de​ ​cultivo y​ ​se​ ​inoculan.​ ​Es​ ​la​ ​menor​ ​cantidad​ ​de​ ​un​ ​agente​ ​para​ ​cargarme​ ​al​ ​microorganismo.​ ​Se​ ​tiene​ ​que​ ​dar​ ​en​ ​cultivos​ ​puros. -​ ​Método​ ​de​ ​difusión​ ​en​ ​Agar:​​ ​se​ ​forman​ ​aros​ ​alrededor,​ ​si​ ​hace​ ​efecto​ ​el​ ​agente​ ​microbiano​ ​antibiótico. 6)AISLAMIENTO: Para​ ​trabajar​ ​con​ ​un​ ​microorganismo​ ​en​ ​condiciones​ ​definidas​ ​en​ ​el​ ​laboratorio​ ​es​ ​necesario​ ​primero​ ​proceder​ ​a​ ​su aislamiento. -​ ​Cultivo:​​ ​poblaciones​ ​bacterianas​ ​con​ ​millones​ ​de​ ​individuos. -​ ​Cultivo​ ​puro​:​ ​el​ ​que​ ​contiene​ ​una​ ​sola​ ​clase​ ​de​ ​microorganismo. -​ ​Cultivo​ ​mixto​:​ ​el​ ​que​ ​contiene​ ​más​ ​de​ ​un​ ​tipo​ ​de​ ​microorganismo.

En​ ​el​ ​laboratorio​ ​vamos​ ​a​ ​llevar​ ​a​ ​cabo​ ​un​ ​tipo​ ​de​ ​esterilización​ ​de​ ​calor​ ​seco​ ​tipo​ ​flameado​ ​directo. -​ ​Método​ ​de​ ​aislamiento​ ​por​ ​siembra​ ​por​ ​estría​ ​en​ ​placa:​ ​ ​importante​ ​porque​ ​también​ ​vamos​ ​a​ ​aislar​ ​la​ ​bacteria​ ​problema​ ​en​ ​el​ ​laboratorio.​ ​Hay​ ​que​ ​flamear​ ​el​ ​asa constantemente.​ ​Cogemos​ ​el​ ​asa​ ​de​ ​siembra​ ​y​ ​la​ ​introducimos​ ​en​ ​el​ ​medio​ ​liquido​ ​(nos​ ​quedamos​ ​con​ ​la​ ​gota),​ ​pasamos​ ​en​ ​zigzag​ ​tres​ ​rayas,​ ​flameamos​ ​y​ ​quemamos​ ​y​ ​al estar​ ​seco​ ​arrastramos​ ​las​ ​bacterias​ ​a​ ​otro​ ​lado,​ ​volvemos​ ​a​ ​quemar​ ​el​ ​asa​ ​de​ ​siembra​ ​y​ ​a​ ​partir​ ​de​ ​ahí​ ​obtenemos​ ​u​ ​cultivo​ ​puro​ ​sin​ ​otros​ ​microorganismos.​ ​(DIBUJO​ ​DE​ ​LA PLACA​ ​PETRY)

-Cuantificación​ ​de​ ​los​ ​organismos: --​ ​Células​ ​viables​ ​es​ ​aquella​ ​que​ ​es​ ​capaz​ ​de​ ​dividirse​ ​y​ ​originar​ ​una​ ​descendencia. --​ ​Cada​ ​célula​ ​viable​ ​puede​ ​crecer​ ​y​ ​dividirse​ ​hasta​ ​formar​ ​una​ ​colonia. -Diluciones​ ​seriadas​ ​y​ ​siembra​ ​en​ ​placa:​ ​cuantificación​ ​del​ ​número​ ​de​ ​organismos.​ ​Miden el​ ​número​ ​de​ ​células​ ​viables.​ ​Dependiendo​ ​del​ ​microorganismo​ ​de​ ​24​ ​horas​ ​o​ ​más.​ ​Inoculo original​ ​se​ ​diluye​ ​varias​ ​veces​ ​en​ ​el​ ​proceso​ ​de​ ​dilución​ ​seriada.​ ​Cogemos​ ​la​ ​bacteria problema​ ​y​ ​preparamos​ ​una​ ​serie​ ​de​ ​tubos​ ​con​ ​9​ ​ml​ ​de​ ​un​ ​medio​ ​de​ ​cultivo​ ​líquido.​ ​(TPB)

cogemos​ ​un​ ​ml​ ​del​ ​matraz,​ ​lo​ ​añadimos​ ​agitamos,​ ​cogemos​ ​un​ ​ml​ ​y​ ​lo​ ​vamos​ ​echando​ ​en​ ​cada​ ​uno​ ​de​ ​los​ ​tubos,​ ​bajando​ ​la​ ​carga​ ​microbiana.​ ​Los​ ​tubos​ ​están​ ​estériles.​ ​AL haberlo​ ​diluidos​ ​varias​ ​veces​ ​cojo​ ​un​ ​medio​ ​solido​ ​y​ ​paso​ ​un​ ​ml​ ​de​ ​cada​ ​tubo​ ​a​ ​la​ ​una​ ​placa​ ​petry.​ ​El​ ​rango​ ​en​ ​el​ ​que​ ​puedo​ ​contar​ ​es​ ​de​ ​30​ ​a​ ​300.​ ​​(LABORATORIO). Fuentes​ ​De​ ​error​ ​del​ ​recuento​ ​en​ ​placa​ ​dependen​ ​de:​ ​el​ ​medio​ ​de​ ​cultivo,​ ​las​ ​condiciones​ ​de​ ​incubación​ ​si​ ​el​ ​cultivo​ ​es​ ​mixto​ ​velocidad​ ​del​ ​crecimiento,​ ​irregularidades​ ​en el​ ​pipeteo. -Recuento​ ​de​ ​células​ ​totales:​ ​hay​ ​dos​ ​tipos -​ ​-​ ​Directo:​ ​mediante​ ​microscopio​ ​con​ ​la​ ​cámara​ ​de​ ​recuento​ ​que​ ​está​ ​tasada​ ​y​ ​nos​ ​permite​ ​determinar​ ​por​ ​ml​ ​el​ ​número​ ​de​ ​células​ ​que​ ​hay. -​ ​-​ ​Contador​ ​​ ​electrónico:​ ​que​ ​nos​ ​la​ ​recuenta​ ​directamente. Ambos​ ​métodos​ ​conllevan​ ​también​ ​sus​ ​limitaciones:​ ​no​ ​distingue​ ​entre​ ​células​ ​vivas​ ​y​ ​muertas,​ ​que​ ​las​ ​muy​ ​pequeñas​ ​son​ ​imposibles​ ​de​ ​detectar​ ​(afecta​ ​a​ ​la​ ​precisión): otro​ ​problema​ ​es​ ​la​ ​densidad​ ​óptica​ ​(por​ ​debajo​ ​de​ ​10​ ​elevado​ ​a​ ​6​ ​no​ ​vale),​ ​muchas​ ​de​ ​estas​ ​células​ ​tienen​ ​flagelos​ ​y​ ​se​ ​mueven,​ ​los​ ​restos​ ​se​ ​pueden​ ​contar​ ​como​ ​células. -​ ​Método​ ​de​ ​la​ ​masa​ ​celular:​ ​mediante​ ​espectrofotómetro.​ ​Se​ ​utiliza​ ​generalmente​ ​una​ ​longitud​ ​​ ​de​ ​onda​ ​de​ ​550​ ​nm​ ​(​ ​color​ ​verde):​ ​El​ ​descenso​ ​de​ ​luz​ ​no​ ​dispersada causada​ ​por​ ​la​ ​turbidez.​ ​La​ ​lectura​ ​se​ ​expresa​ ​en​ ​unidades​ ​de​ ​densidad​ ​óptica. -Citometro​ ​de​ ​flujo:​ ​es​ ​un​ ​láser​ ​que​ ​te​ ​permite​ ​contar​ ​las​ ​células​ ​y​ ​encima​ ​es​ ​capaz​ ​de​ ​distinguir​ ​entre​ ​células​ ​vivas​ ​y​ ​muertas.​ ​Permite​ ​contar​ ​muestras​ ​líquidas.

TEMA2:METODOSDEMICROBIOLOGIA2.TÉCNICASMICROSCOPICAS. Preguntas​ ​de​ ​microscopía​ ​caen​ ​SI​ ​O​ ​SI. Las​ ​tinciones​ ​van​ ​a​ ​ser​ ​preguntadas​ ​en​ ​práctica​ ​y​ ​teoría. 1)MICROSCOPIO: -​ ​-​ ​Óptico -​ ​-​ ​Electrónico Depende​ ​del​ ​aumento​ ​el​ ​contraste​ ​y​ ​la​ ​resolución. Objetivos​ ​con​ ​lentes​ ​convexas​ ​que​ ​desvían​ ​los​ ​rayos​ ​​ ​de​ ​luz​ ​por​ ​refracción​ ​encontrándose​ ​en​ ​un​ ​solo​ ​punto:​ ​punto​ ​focal. -​ ​Contraste​:​ ​diferencias​ ​en​ ​la​ ​intensidad​ ​de​ ​la​ ​luz​ ​lo​ ​que​ ​nos​ ​permite​ ​apreciar​ ​que​ ​una​ ​zona​ ​de​ ​la​ ​imagen​ ​es​ ​diferente​ ​de​ ​otra​ ​zona​ ​próxima​ ​o​ ​del​ ​fondo​ ​del​ ​campo. La​ ​mayoría​ ​de​ ​los​ ​microorganismos​ ​carecen​ ​de​ ​color. -​ ​-​ ​Aumentar​ ​el​ ​contraste​ ​de​ ​forma​ ​artificial:​ ​utilizar​ ​colorantes. -​ ​Resolución​:​ ​la​ ​menor​ ​distancia​ ​entre​ ​dos​ ​puntos​ ​que​ ​se​ ​pueden​ ​ver​ ​por​ ​separado. Para​ ​ver​ ​el​ ​movimiento​ ​de​ ​microorganismos​ ​hacemos​ ​la​ ​​ ​prueba​ ​de​ ​la​ ​gota​ ​pendiente Las​ ​tinciones​ ​se​ ​llevan​ ​a​ ​cabo​ ​ya​ ​que​ ​todos​ ​los​ ​colorantes​ ​tienen​ ​grupos​ ​cromóferos​ ​coloreantes​ ​los​ ​cuales​ ​se​ ​unen​ ​a​ ​la​ ​pared​ ​bacteriana​ ​de​ ​las​ ​bacterias​ ​por​ ​enlaces iónicos,​ ​covalentes​ ​o​ ​hidrofóbicos.​ ​Hay​ ​3​ ​tipos​ ​de​ ​tinciones. -Tinción​ ​simple -Tinción​ ​diferencial. -Tinción​ ​especifica 2)TINCIONSIMPLE: Finalidad:​ ​estudiar​ ​la​ ​morfología​ ​de​ ​los​ ​microorganismos​ ​mediante​ ​un​ ​colorante​ ​para​ ​aumentar​ ​el​ ​contraste. 3)TINCIONESDIFRENECIALES: Sirve​ ​para​ ​identificar​ ​dos​ ​clases​ ​de​ ​bacterias​ ​diferentes​ ​en​ ​base​ ​a​ ​la​ ​tinción.

-​ ​tención​ ​primaria:​ ​igual​ ​método​ ​que​ ​una​ ​simple. -​ ​tinción​ ​de​ ​contraste:​ ​se​ ​utiliza​ ​otro​ ​colorante​ ​que​ ​tiñe​ ​las​ ​células​ ​no​ ​teñidas​ ​por​ ​el​ ​primer​ ​colorante Tinción​ ​de​ ​gram Tinción​ ​de​ ​alcoholes​ ​resistentes. 4)TINCIONDEGRAM:​​ ​(CAE​ ​SIEMPRE) Objetivo:​ ​estudiar​ ​la​ ​morfología​ ​de​ ​las​ ​bacterias​ ​(gram​ ​positivas​ ​o​ ​gram​ ​negativas​ ​en​ ​función​ ​de​ ​la​ ​composición​ ​de​ ​la​ ​pared). -​ ​Tinción​ ​primaria. -​ ​Decoloración. -​ ​Tinción​ ​de​ ​contraste. Se​ ​lleva​ ​a​ ​cabo​ ​siguiendo​ ​los​ ​siguientes​ ​pasos:

ÁCIDO​ ​ALCOHOL​ ​RESISTENTE​ ​ZIEHL​ ​NEELSEN Si​ ​veo​ ​endosporas​ ​en​ ​mi​ ​muestra​ ​problema​ ​será​ ​gram​ ​positiva.​ ​Solo​ ​los​ ​bacilos​ ​(los​ ​que​ ​tienen​ ​forma​ ​de​ ​bacilo)​ ​tienen​ ​endosporas.​ ​Los​ ​cocos​ ​en​ ​cambio​ ​no​ ​producen endosporas​ ​por​ ​lo​ ​tanto​ ​son​ ​gram​ ​negativos.

5)OTRASTINCIONES:

-​ ​TINCION​ ​DE​ ​FLAGELOS: (No​ ​se​ ​va​ ​a​ ​ver​ ​en​ ​el​ ​laboratorio) -​ ​TINCION​ ​NEGATIVA: Mediante​ ​tinta​ ​china​ ​que​ ​permite​ ​distinguir​ ​la​ ​cápsula​ ​​ ​blanca​ ​de​ ​las​ ​bacterias. -​ ​MICROSCOPIO​ ​OPTICO​:​ ​​nunca​ ​entra​ ​en​ ​teoría​ ​solo​ ​vamos​ ​a​ ​verlo​ ​en​ ​prácticas. (10,​ ​40,​ ​y​ ​objetivo​ ​de​ ​inmersión​ ​con​ ​aceite). 6)OTRASMICROSCOPIASOPTICAS: -​ ​Campo​ ​oscuro. -​ ​Contraste​ ​de​ ​fase. -​ ​Contraste​ ​diferencia​ ​de​ ​interferencia. -​ ​Fluorescencia. CAMPOOSCURO: Sirve​ ​para​ ​células​ ​vivas Permite​ ​visualizar​ ​células​ ​y​ ​organismos​ ​​ ​vivos​ ​que​ ​no​ ​pueden​ ​teñirse Condensador​ ​que​ ​incluye​ ​un​ ​disco​ ​opaco. Disco​ ​opaco​ ​bloquea​ ​la​ ​luz​ ​que​ ​llega​ ​directamente​ ​al​ ​objetivo El​ ​objetivo​ ​solo​ ​captura​ ​la​ ​luz​ ​reflejada​ ​por​ ​la​ ​muestra. La​ ​muestra​ ​aparece​ ​iluminada​ ​sobre​ ​un​ ​fondo​ ​negro​ ​(sífilis) CONTRASTEDEFASE Tiene​ ​un​ ​diafragma​ ​anular​ ​que​ ​nos​ ​permite​ ​ver​ ​la​ ​forma​ ​de​ ​las​ ​células​ ​y​ ​las​ ​estructuras​ ​internas​ ​de​ ​organismos​ ​vivos. Muestran​ ​con​ ​claridad​ ​las​ ​cubiertas​ ​externas,​ ​y​ ​contorno​ ​microbiano.​ ​Por​ ​tanto​ ​nos​ ​permite​ ​ver​ ​motilidad​ ​(movimiento)​ ​debido​ ​a​ ​que​ ​tiene​ ​un​ ​diafragma​ ​anular​ ​que permite​ ​que​ ​la​ ​luz​ ​pase​ ​controlada. MICROSCOPÍADEFLUORESCENCIA: -​ ​​ ​Sustancias​ ​que​ ​absorben​ ​luz​ ​de​ ​longitud​ ​de​ ​onda​ ​corta​ ​(ultravioleta)​ ​y​ ​emiten​ ​una​ ​longitud​ ​de​ ​onda​ ​mayor​ ​(visible). -​ ​Algunos​ ​organismos​ ​fluorecen​ ​naturalmente​ ​bajo​ ​la​ ​luz​ ​ultravioleta -​ ​Metanobacterias​ ​P420. -​ ​Tinciones​ ​especiales:​ ​se​ ​tiñen​ ​con​ ​algunos​ ​colorantes​ ​denominados​ ​fluorocromos. -​ ​FISH​ ​inmunofluorescencia​ ​(Mycobacterium​ ​tuberculosis). -​ ​Esta​ ​tinción​ ​se​ ​utiliza​ ​para​ ​la​ ​microscopía​ ​ecológica. 7)MICROSCOPÍAELECTRÓNICA: Se​ ​aplicaron​ ​unas​ ​técnicas​ ​(TEM)​ ​trasmission​ ​electron​ ​microscopy​ ​y​ ​​ ​SEM​ ​(scanning​ ​elect.​ ​Micros.) -MICROSCOPIAELECTRONICADETRANSMISION(TEM)

-​ ​-Permite​ ​ver​ ​estructuras​ ​a​ ​nivel​ ​molecular​ ​(porque​ ​funciona​ ​con​ ​una​ ​longitud​ ​de​ ​onda​ ​de​ ​electrones​ ​corta,​ ​gracias​ ​a​ ​la​ ​cual​ ​tenemos​ ​muy​ ​buena​ ​resolución) -​ ​-Óptico:​ ​0,2​ ​micrómetros​ ​y​ ​el​ ​electrónico​ ​de​ ​0.2​ ​nanómetros.​ ​El​ ​tamaño​ ​de​ ​una​ ​bacteria​ ​es​ ​de​ ​las​ ​10​-6. -InconvenientesdeTEM: -​ ​Los​ ​haces​ ​de​ ​electrones​ ​tienen​ ​escaso​ ​poder​ ​de​ ​penetración. -​ ​Las​ ​células​ ​son​ ​demasiado​ ​gruesas. -​ ​Debe​ ​cortarse,​ ​cortes​ ​ultrafinos,​ ​crio​ ​factura Para​ ​obtener​ ​suficiente​ ​contraste​ ​se​ ​utilizan​ ​metales​ ​pesados​ ​como​ ​plomo,​ ​uranio. Permiten​ ​desviar​ ​los​ ​electrones​ ​y​ ​aumentar​ ​el​ ​contraste.​ ​Para​ ​Observar​ ​las​ ​estructuras​ ​tendríamos​ ​que​ ​cortar​ ​la​ ​célula,​ ​previo​ ​congelación,​ ​y​ ​con​ ​el​ ​TEM​ ​no​ ​se​ ​pueden​ ​ver estructuras​ ​superficiales. MICROSCOPIOELECTRONICODEBARRIDO(SEM) Sirve​ ​para​ ​ver​ ​estructuras​ ​externas​ ​cosas​ ​que​ ​no​ ​puedo​ ​ver​ ​con​ ​el​ ​TEM​ ​(flagelos) También​ ​se​ ​tiene​ ​que​ ​cubrir​ ​con​ ​un​ ​metal​ ​(oro)​ ​El​ ​haz​ ​de​ ​electrones​ ​barre​ ​la​ ​superficie​ ​de la​ ​muestra​ ​y​ ​los​ ​electrones​ ​desviados​ ​por​ ​la​ ​capa​ ​de​ ​metal​ ​se​ ​recogen​ ​y​ ​proyectan​ ​sobre una​ ​pantalla​ ​para​ ​producir​ ​una​ ​imagen. MICROSCOPIOELECTRONICODEBARRIDOMEDIOAMBIENTAL: Es​ ​la​ ​misma​ ​microscopia​ ​que​ ​el​ ​SEM​ ​pero​ ​permite​ ​ver​ ​la​ ​muestra​ ​sin​ ​preparación​ ​(sin metales​ ​ni​ ​nada). 7)MICROSCOPÍADEBARRIDOLASERCONFOCAL(CLSM) Es​ ​un​ ​microscopio​ ​con​ ​un​ ​ordenador​ ​que​ ​acopla​ ​una​ ​fuente​ ​de​ ​luz​ ​laser​ ​a​ ​un​ ​microscopio óptico.​ ​Permite​ ​producir​ ​imágenes​ ​tridimensionales​ ​tanto​ ​en​ ​microorganismos​ ​como​ ​en otras​ ​muestras​ ​biológicas.​ ​La​ ​luz​ ​laser​ ​permite​ ​enfocar​ ​de​ ​manera​ ​muy​ ​precisa​ ​la​ ​muestra en​ ​una​ ​zona​ ​y​ ​ver​ ​diversas​ ​capas​ ​(cosa​ ​que​ ​no​ ​podíamos​ ​con​ ​los​ ​anteriores). Se​ ​le​ ​denomina​ ​también​ ​microscopio​ ​de​ ​epifluorescencia.​ ​Contribuye​ ​mucho​ ​a​ ​los biofilmes​ ​(por​ ​ejemplo​ ​microorganismos​ ​en​ ​la​ ​dentadura​ ​o​ ​en​ ​un​ ​rio).​ ​En​ ​la​ ​mayoría​ ​de ellos​ ​se​ ​utilizan​ ​tintes​ ​(fluoroforos). LOS​ ​COCOS​ ​SON​ ​GRAM​ ​POSITIVOS,​ ​SON​ ​MORADOS.​ ​LOS​ ​BACILOS​ ​​ ​SON​ ​GRAM​ ​NEGATIVOS SON​ ​ROSAS​ ​ROJIZOS.​ ​NO​ ​SE​ ​VAN​ ​A​ ​VER​ ​ESPORAS​ ​NUNCA​ ​EN​ ​GRAM​ ​NEGATIVO,​ ​EN​ ​GRAM POSITIVO​ ​TIENEN​ ​ESPORAS​ ​O​ ​NO​ ​(LA​ ​MAYORIA​ ​SI).​ ​LABORATORIO.

BACILOS: No​ ​tienen​ ​agrupaciones. ACTINOMICETOS: Presentan​ ​desarrollo​ ​micelar.

TEMA3MICROBIOLOGÍA:ORGANIZACIÓNYESTRUCTURADELACÉLULA

PROCARIOTA1:ENVOLTURASCELULARES. Los​ ​organismos​ ​se​ ​dividen​ ​en​ ​eucariotas​ ​y​ ​procariotas.​ ​​ ​A​ ​partir​ ​de​ ​esta​ ​división​ ​se establecen​ ​3​ ​linajes​ ​evolutivamente​ ​diferentes​ ​(DOMINIOS). -​ ​Bacteria:​ ​dominio​ ​de​ ​microorganismos​ ​procariotas -​ ​Archaea:​ ​dominio​ ​de​ ​microorganismos​ ​procariotas -​ ​Eukarya:​ ​dominio​ ​de​ ​microorganismos​ ​eucariotas. 1)​ ​CELULAS​ ​EUCARIOTAS -​ ​ADN​ ​localizado​ ​​ ​en​ ​un​ ​núcleo​ ​rodeado​ ​por​ ​una​ ​membrana​ ​nuclear. -​ ​Núcleo​ ​con​ ​múltiples​ ​cromosomas. -​ ​El​ ​ADN​ ​está​ ​asociado​ ​a​ ​proteínas.​ ​(Histonas). -Nuestras​ ​células​ ​tienen​ ​orgánulos​ ​rodeados​ ​de​ ​membrana​ ​(retículo​ ​endoplasmático, mitocondrias). -​ ​La​ ​pared​ ​celular​ ​si​ ​existe,​ ​tiene​ ​una​ ​estructura​ ​química​ ​sencilla. -​ ​La​ ​división​ ​celular​ ​se​ ​lleva​ ​a​ ​cabo​ ​por​ ​mitosis​ ​(se​ ​replican​ ​los​ ​cromosomas distribuyéndose​ ​en​ ​los​ ​núcleos​ ​de​ ​células​ ​hijas).

2)​ ​CÉLULA​ ​PROCARIOTA: -​ ​El​ ​ADN​ ​no​ ​está​ ​rodeado​ ​por​ ​una​ ​membrana. -​ ​El​ ​cromosoma​ ​se​ ​organiza​ ​en​ ​un​ ​único​ ​ADN​ ​circular. -​ ​El​ ​ADN​ ​no​ ​se​ ​asocia​ ​a​ ​histonas​ ​si​ ​no​ ​a​ ​proteínas​ ​no​ ​histónicas. -​ ​Un​ ​rasgo​ ​distintivo​ ​es​ ​que​ ​no​ ​tienen​ ​orgánulos​ ​rodeados​ ​de​ ​membrana. -​ ​Fosforilación​ ​oxidativa​ ​llevada​ ​a​ ​cabo​ ​en​ ​la​ ​pared​ ​bacteriana​ ​(en​ ​caso​ ​de​ ​eucariotas ocurre​ ​en​ ​las​ ​crestas​ ​mitocondriales)

-​ ​La​ ​pared​ ​celular​ ​casi​ ​siempre​ ​posee​ ​un​ ​polisacárido​ ​complejo​ ​conocido​ ​como​ ​peptidoglicano. -​ ​La​ ​membrana​ ​de​ ​procariotas​ ​tiene​ ​una​ ​composición​ ​química​ ​específica​ ​que​ ​nos​ ​permite​ ​identificarlas​ ​(ya​ ​que​ ​difieren​ ​en​ ​los​ ​lípidos​ ​que​ ​contienen) (SIEMPRE​ ​CAE​ ​LA​ ​PARED​ ​BACTERIANA) 3)​ ​DIFERENCIAS​ ​QUÍMICAS​ ​ENTRE​ ​DOMINIOS. -​ ​Archaea:​​ ​lípidos​ ​de​ ​membrana​ ​diferentes​ ​a​ ​las​ ​de​ ​otros​ ​dominios.​ ​Las​ ​archeas​ ​se​ ​encuentran​ ​en​ ​ambientes​ ​termófilos​ ​e​ ​hipertermófilos​ ​(ambientes​ ​extremos​ ​de temperatura),​ ​por​ ​lo​ ​que​ ​han​ ​desarrollado​ ​membranas​ ​muy​ ​resistentes​ ​ya​ ​que​ ​los​ ​enlaces​ ​éter​ ​confieren​ ​estabilidad.​ ​Los​ ​principales​ ​lípidos​ ​de​ ​las​ ​archaeas​ ​son: ● Diéteres​ ​de​ ​glicerol​ ​(20​ ​átomos​ ​de​ ​carbono,​ ​conocido​ ​como​ ​fitanol). ● Es​ ​importantes​ ​saber​ ​que​ ​las​ ​archaeas​ ​NO​ ​tienen​ ​ácidos​ ​grasos. ● Difitanol​ ​(40​ ​átomos​ ​de​ ​carbono) ● Tetraéteres​ ​de​ ​glicerol​ ​(con​ ​los​ ​cuales​ ​pueden​ ​formar​ ​monocapas​ ​que​ ​las​ ​hacen​ ​resistentes​ ​a​ ​la​ ​disgregación​ ​en​ ​el​ ​caso​ ​de​ ​las​ ​archeas​ ​las​ ​hacen​ ​resistentes​ ​a​ ​la

temperatura). -​ ​Eukarya:​​ ​glicerol​ ​+​ ​ácidos​ ​grasos​ ​(16​ ​ó​ ​18​ ​carbonos),​ ​los​ ​cuales​ ​no​ ​se​ ​ramifican​ ​y​ ​se​ ​unen al​ ​glicerol​ ​por​ ​enlace éster.​ ​Los​ ​ácidos​ ​grasos​ ​son​ ​poliinsaturados. -​ ​Bacterias​:​ ​poseen​ ​ácidos​ ​grasos​ ​monoinsaturados​ ​o​ ​saturados.​ ​Glicerol​ ​+​ ​cadenas laterales​ ​(isoprenos,​ ​que no​ ​ácidos​ ​grasos)​ ​que​ ​se​ ​unen​ ​al​ ​glicerol​ ​mediante​ ​enlaces​ ​éter.​ ​Son​ ​siempre​ ​ramificados,​ ​y aparte​ ​de​ ​ello​ ​los isoprenoides​ ​son​ ​siempre​ ​saturados. (FOTOCOPIA​ ​DE​ ​DIFERENCIAS). 4)​ ​ESTEROLES​ ​Y​ ​HOPANOIDES: -Esteroles: ● Los​ ​eucariotas​ ​poseen​ ​esteroles. ● Los​ ​procariotas​ ​no​ ​poseen​ ​esteroles​ ​salvo​ ​las​ ​bacterias​ ​metanótrofas​ ​y micoplasma. ● Los​ ​esteroles​ ​son​ ​moléculas​ ​rígidas​ ​y​ ​planas​ ​que​ ​favorecen​ ​la​ ​estabilidad​ ​de​ ​la membrana.

-​ ​Hopanoides: ● Similares​ ​a​ ​los​ ​esteroles,​ ​presentes​ ​en​ ​el​ ​dominio​ ​bacterias. ● Tienen​ ​una​ ​función​ ​parecida​ ​a​ ​la​ ​de​ ​los​ ​esteroles​ ​(estabilización​ ​de​ ​la​ ​membrana) ● No​ ​se​ ​han​ ​encontrado​ ​nunca​ ​presentes​ ​en​ ​las​ ​archaeas.

5)​ ​FUNCIONES​ ​DE​ ​LA​ ​MEMBRANA​ ​PLASMÁTICA: -​ ​Permeabilidad​ ​selectiva. -​ ​Proteínas​ ​(periféricas,​ ​integrales) -​ ​Tienen​ ​agua,​ ​CO​2,​​ ​moléculas​ ​cargadas​ ​y​ ​sin​ ​carga. 6)​ ​PROCESOS​ ​METABÓLICOS​ ​DE​ ​MEMBRANA: -​ ​Transporte:​ ​permeasa​ ​(enzima-proteína) -​ ​Síntesis​ ​de​ ​lípidos​ ​y​ ​componentes​ ​de​ ​la​ ​pared​ ​celular. -​ ​Respiración,​ ​fotosíntesis​ ​(fotofosforilación​ ​en​ ​tilacoides,​ ​en​ ​las​ ​bacterias​ ​se​ ​produce​ ​en​ ​la membrana) -​ ​Receptores​ ​especiales​ ​que​ ​permiten​ ​detectar​ ​y​ ​responder​ ​a​ ​compuestos​ ​químicos. -​ ​Proteínas​ ​de​ ​anclaje​ ​para​ ​el​ ​gnéforo​ ​(ADN​ ​BACTERIANO)​ ​durante​ ​la​ ​división.

-​ ​Mesosomas:​ ​invaginaciones​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​plasmática​ ​(síntesis​ ​de​ ​ATP​ ​y​ ​división​ ​bacteriana). 7)​ ​ESTRUCTURA​ ​Y​ ​FUNCION​ ​DE​ ​LAS​ ​PROTEINAS​ ​TRANSPORTADORAS: -PROCARIOTAS​ ​(3​ ​TIPOS) -​ ​Transporte​ ​simple -​ ​Translocación​ ​en​ ​grupo -​ ​Sistema​ ​ABC Ambos​ ​3​ ​son​ ​para​ ​el​ ​transporte​ ​de​ ​moléculas​ ​pequeñas. -TRANSPORTE​ ​SIMPLE: Una​ ​sola​ ​proteína​ ​transmembrana:​ ​la​ ​fuerza​ ​motora​ ​para​ ​que​ ​se​ ​lleve​ ​a​ ​cabo​ ​el​ ​transporte​ ​la​ ​dan​ ​los​ ​protones​ ​(fuerza​ ​motriz). -TRANSLOCACIÓN​ ​DE​ ​GRUPO: Un​ ​conjunto​ ​de​ ​proteínas​ ​coopera​ ​para​ ​llevar​ ​a​ ​cabo​ ​el​ ​transporte.​ ​Modificación​ ​química​ ​de​ ​la​ ​sustancia​ ​transportadora​ ​a​ ​expensas​ ​del​ ​fosfoenolpiruvico. -​ ​SISTEMA​ ​ABC:​ ​tiene ● Una​ ​proteína​ ​de​ ​unida​ ​al​ ​sustrato. ● Un​ ​transportador​ ​integrado​ ​en​ ​la​ ​membrana. ● Una​ ​proteína​ ​que​ ​hidroliza​ ​ATP.

7)​ ​PROCESOS​ ​DE​ ​TRANSPORTE: Provoca​ ​un​ ​cambio​ ​en​ ​la​ ​conformación​ ​de​ ​la​ ​proteína​ ​transportadora​ ​y​ ​existe​ ​un ● Sistema​ ​uniportadores:​​ ​(proteínas​ ​que​ ​transportan​ ​una​ ​molécula​ ​en​ ​un​ ​solo​ ​sentido​ ​a​ ​través​ ​de​ ​la​ ​membrana). ● Sistemas​ ​importadores​:​ ​proteínas​ ​que​ ​transportan​ ​una​ ​sustancia​ ​junto​ ​a​ ​otra​ ​en​ ​la​ ​misma​ ​dirección. ● Sistemas​ ​antiportadores​:​ ​son​ ​proteínas​ ​que​ ​transportan​ ​una​ ​molécula​ ​a​ ​través​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​y​ ​simultáneamente​ ​transportan​ ​otra​ ​en​ ​otro​ ​sentido​ ​opuesto.

8)​ ​PARED​ ​CELULAR​ ​​(IMPORTANTE) -​ ​Típica​ ​de​ ​procariotas​ ​aunque​ ​alguna​ ​no​ ​tenga​ ​(archeas,​ ​o​ ​micoplasma) -​ ​La​ ​pared​ ​celular​ ​da​ ​forma​ ​y​ ​rigidez​ ​​ ​y​ ​protege​ ​de​ ​la​ ​lisis​ ​osmótica. -​ ​La​ ​pared​ ​celular​ ​de​ ​muchos​ ​microorganismos​ ​patógenos​ ​tienen​ ​componentes​ ​que​ ​contribuyen​ ​a​ ​su​ ​patogenecidad. -​ ​Protege​ ​a​ ​la​ ​célula​ ​frente​ ​a​ ​sustancias​ ​toxicas. El​ ​peptidoglicano​ ​es​ ​lo​ ​que​ ​se​ ​tiñe​ ​por​ ​lo​ ​que​ ​en​ ​el​ ​caso​ ​de​ ​las​ ​gram​ ​positivas​ ​se​ ​tiñen​ ​fácilmente.​ ​En​ ​​ ​las​ ​gram​ ​negativas​ ​se​ ​distingue​ ​una​ ​membrana​ ​externa,​ ​peptidoglicano y​ ​espacio​ ​peri​ ​plasmático.​ ​Las​ ​gram​ ​positivas​ ​nunca​ ​tienen​ ​membrana​ ​externa.​ ​Tienen​ ​también​ ​un​ ​pequeño​ ​espacio​ ​peri​ ​plasmático. IMAGEN).​ ​Tiene​ ​una​ ​única​ ​capa​ ​homogénea​ ​de​ ​20​ ​a​ ​80​ ​nm.​ ​Compuesta​ ​por​ ​peptidoglicano​ ​y​ ​ácidos​ ​teóicos​ ​y​ ​muy​ ​resistente​ ​a​ ​la​ ​presión​ ​osmótica.​ ​En​ ​las​ ​gram​ ​negativas hay​ ​peptidoglicano​ ​de​ ​2​ ​a​ ​7​ ​nm​ ​y​ ​está​ ​cubierta​ ​por​ ​una​ ​membrana​ ​externa​ ​de​ ​7​ ​a​ ​8​ ​nm. PEPTIDOOGLICANO: Llamado​ ​mureina.​ ​Es​ ​la​ ​responsable​ ​de​ ​la​ ​resistencia.​ ​Está​ ​formado​ ​por​ ​la​ ​unión​ ​sucesiva​ ​de​ ​n​ ​acetilmurámico​ ​y​ ​n​ ​acetil​ ​glucosamina​ ​en​ ​enlace​ ​B​ ​(1,4).​ ​L-​ ​alanina,​ ​acido D-glutámico,​ ​acido​ ​meso-diaminopimélico​ ​y​ ​D-alanina.​ ​Se​ ​unen​ ​por​ ​enlaces​ ​peptídicos​ ​al​ ​N​ ​acetilmurámico.​ ​Todos​ ​estos​ ​se​ ​transforman​ ​en​ ​el​ ​tipo​ ​D​ ​ya​ ​que​ ​los​ ​isómeros​ ​no reconocen​ ​el​ ​tipo​ ​D​ ​dándole​ ​resistencia​ ​a​ ​la​ ​pared​ ​bacteriana.

Los​ ​puentes​ ​peptídicos​ ​dan​ ​lugar​ ​a​ ​rigidez​ ​tridimensional.

-​ ​E.​ ​coli:​ ​los​ ​grupos​ ​peptídicos​ ​unen​ ​la​ ​alanina​ ​del​ ​N​ ​acetil​ ​Murámico​ ​con​ ​el​ ​acido​ ​diaminopimélico. -​ ​En​ ​la​ ​mayoría​ ​de​ ​las​ ​gram​ ​negativas:​ ​la​ ​alanina​ ​se​ ​une​ ​mediante​ ​enlace​ ​peptídico​ ​a​ ​la​ ​lisina. PAREDCELULARGRAMPOSITIVAS: El​ ​peptidoglicano​ ​supone​ ​el​ ​90​ ​por​ ​ciento.​ ​Puede​ ​estar​ ​en​ ​una​ ​o​ ​varias​ ​capas.​ ​La​ ​pared​ ​celular​ ​se​ ​​ ​distingue​ ​por​ ​los​ ​compuestos​ ​presentes​ ​de​ ​la​ ​gram​ ​negativa.​ ​En​ ​caso​ ​de​ ​las gram​ ​positivas​ ​hay​ ​polisacáridos​ ​ácidos​ ​(ácidos​ ​teicóicos) Este​ ​polisacárido​ ​está​ ​formado​ ​por​ ​unidades​ ​de​ ​glicerolfosfato​ ​o​ ​de​ ​ribitolfosfato​ ​(polialcoholes).​ ​Los​ ​ácidos​ ​se​ ​pueden​ ​unir​ ​mediante​ ​enlace​ ​covalente​ ​​ ​a​ ​la​ ​pared​ ​​ ​del peptidoglicano​ ​o​ ​a​ ​los​ ​lípidos​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​plasmática.​ ​Se​ ​unan​ ​a​ ​uno​ ​u​ ​otro​ ​son​ ​los​ ​responsables​ ​de​ ​la​ ​carga​ ​negativa​ ​de​ ​la​ ​bacteria​.​ ​AFIRMACIONES​ ​DE​​ ​​VERDADERO​ ​Y FALSO. Estos​ ​ácidos​ ​están​ ​en​ ​la​ ​pared,​ ​en​ ​la​ ​membrana​ ​y​ ​en​ ​la​ ​cápsula.​ ​Las​ ​proteínas​ ​están​ ​implicadas​ ​en​ ​las​ ​interacciones​ ​de​ ​la​ ​bacteria​ ​con​ ​el​ ​medio.

PAREDCELULARDELASGRAMNEGATIVAS: -​ ​Membrana​ ​externa​​ ​(solo​ ​presente​ ​en​ ​las​ ​gram​ ​negativas).​ ​No​ ​tienen​ ​ácidos​ ​teóicos,​ ​sino​ ​lipoproteínas​ ​de​ ​Braun​ ​que​ ​sirven​ ​de​ ​unión​ ​entre​ ​el​ ​peptidoglicano​ ​y​ ​la​ ​membrana externa. -​ ​Lipopolisacáridos:​(por​ ​ejemplo​ ​en​ ​la​ ​salmonella):​ ​están​ ​formados​ ​por​ ​lípido​ ​A​ ​por​ ​núcleo​ ​de​ ​polisacárido​ ​y​ ​el​ ​polisacárido​ ​​ ​O.​ ​Confieren​ ​a​ ​la​ ​bacteria​ ​la​ ​carga​ ​negativa​ ​a​ ​la bacteria. ● El​ ​lípido​ ​A​ ​esta​ ​formado​ ​por​ ​ácidos​ ​grasos​ ​que​ ​se​ ​unen​ ​por​ ​enlace​ ​éster​ ​a​ ​N​ ​acetilglucosamina-fosfato. ● El​ ​núcleo​ ​del​ ​polisacárido​ ​está​ ​formado​ ​por​ ​cetodesoxioctano,​ ​heptosa​ ​(azucares​ ​de​ ​7​ ​átomos),​ ​glucosa​ ​galactosa​ ​y​ ​N-acetilglucosamina. ● El​ ​polisacárido​ ​O:​ ​específico​ ​de​ ​los​ ​microorganismos​ ​(glucosa​ ​galactosa​ ​ramnosa​ ​manosa…).

FunciónbiológicadelosLPSS:​​ ​estabiliza​ ​la​ ​estructura​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​externa,​ ​adhesión​ ​bacteriana​ ​a​ ​superficies​ ​y​ ​formación​ ​de​ ​biofilms.​ ​Es​ ​una​ ​barrera​ ​de​ ​permeabilidad. ● Las​ ​endotoxinas​ ​(compuestos​ ​químicos​ ​que​ ​segrega​ ​la​ ​bacteria​ ​para​ ​matar)​ ​están​ ​en​ ​el​ ​lípido​ ​A​ ​(salmonella,​ ​shiginella,​ ​E.coli). ● Dolores​ ​gastrointestinales,​ ​infecciones​ ​alimenticias,​ ​pirogeneicidad,​ ​hipotensión,​ ​choque​ ​letal​ ​por​ ​fallo​ ​cardiaco,​ ​actividad​ ​necrótica​ ​de​ ​tejidos. ● Porinas:​ ​proteínas​ ​transmembranales​ ​que​ ​poseen​ ​3​ ​subunidades​ ​idénticas.​ ​Tipos​ ​de​ ​porinas:​ ​inespecíficas,​ ​específicas.​ ​Tienen​ ​como​ ​función​ ​actuar​ ​como​ ​canal​ ​de

entrada​ ​y​ ​salida​ ​de​ ​sustancias​ ​hidrofílicas​ ​de​ ​bajo​ ​peso​ ​molecular.

● Periplasma:​ ​se​ ​sitúa​ ​entre​ ​la​ ​membrana​ ​plasmática​ ​​ ​y​ ​la​ ​cara​ ​interna​ ​de​ ​la​ ​membrana​ ​externa.​ ​Está​ ​formado​ ​por​ ​proteínas​ ​periplásmicas.​ ​Función:​ ​tiene​ ​enzimas hidrolíticas​ ​(degradación​ ​de​ ​nutrientes),​ ​transporte​ ​de​ ​sustancias​ ​(proteínas​ ​de​ ​unión)​ ​y​ ​quimiorreceptores​ ​(relacionada​ ​con​ ​la​ ​respuesta​ ​quimiostática).

PAREDCELULARDEARCHEAS: -​ ​Peptidoglicano:​ ​está​ ​ausente​ ​en​ ​las​ ​archeas. -​ ​Carecen​ ​de​ ​membrana​ ​externa​ ​típica. -​ ​Composición​ ​química​ ​muy​ ​variada. -​ ​Archeas​ ​metanógenas. -​ ​Tienen​ ​pseudomureína.​ ​Está​ ​formada​ ​por​ ​N​ ​acetilcalosaminuromico. OTROSPOLISACARIDOSDELASPAREDESCELULARES: Methanosarcina:​ ​paredes​ ​celulares​ ​gruesas.​ ​(esta​ ​formada​ ​por​ ​glucosa,​ ​acido​ ​glucorónico,​ ​galactosamina,​ ​acetato,​ ​halococcus​ ​(estanque​ ​de​ ​evaporación​ ​de​ ​sal​ ​y​ ​mares​ ​y lagos​ ​salinos) Composición:​ ​a​ ​mas​ ​sulfato. Las​ ​cargas​ ​negativas​ ​de​ ​los​ ​grupos​ ​sulfatos​ ​establecen​ ​enlaces​ ​con​ ​el​ ​Na+​ ​presente​ ​en​ ​su​ ​hábitat​ ​y​ ​estabilizan​ ​la​ ​pared​ ​celular​ ​en​ ​ambientes​ ​polares. CAPASDELASARCHEAS: Es​ ​tipo​ ​más​ ​común​ ​de​ ​pared​ ​entre​ ​las​ ​Archaea.​ ​Estructura​ ​paracristalina.​ ​Está​ ​formada​ ​por​ ​proteínas​ ​y​ ​glicoproteínas.​ ​Como​ ​funciones:​ ​refuerzo​ ​estructural,​ ​filtro​ ​selectivo, retención​ ​de​ ​proteínas. (Capsuladelasarcheas). FUNCIONESDELACAPADEPOLISACÁRIDOS: -​ ​Sirven​ ​para​ ​fijar​ ​los​ ​organismos​ ​a​ ​la​ ​​ ​superficie. -​ ​Impiden​ ​la​ ​fagocitosis. -​ ​Les​ ​permiten​ ​esos​ ​componentes​ ​retener​ ​el​ ​agua​ ​y​ ​evitar​ ​la​ ​desecación. -​ ​Las​ ​capsulas​ ​tiene​ ​gran​ ​importancia​ ​ecológica,​ ​son​ ​capaces​ ​de​ ​formar​ ​biopelículas​ ​y​ ​flóculos​ ​y​ ​gránulos​ ​indispensables​ ​para​ ​la​ ​depuración​ ​de​ ​aguas. BIOPELICULASO​​BIOFILMES:​​(IMPORTANTE) Son​ ​ecosistemas​ ​microbiológicos​ ​muy​ ​complejos​ ​y​ ​muy​ ​difíciles​ ​de​ ​estudiar​ ​por​ ​las​ ​técnicas​ ​convencionales.​ ​No​ ​se​ ​pueden​ ​reproducir​ ​en​ ​un​ ​laboratorio​ ​ya​ ​que​ ​es​ ​un ecosistema​ ​en​ ​continuo​ ​cambio.​ ​No​ ​todos​ ​los​ ​microorganismos​ ​forman​ ​biofilmes.​ ​Pueden​ ​estar​ ​formados​ ​por​ ​bacterias,​ ​hongos​ ​algas​ ​y​ ​protozoos.​ ​Para​ ​estudiar​ ​biolfilmes se​ ​utilizan​ ​las​ ​microscopias​ ​SEM​ ​y​ ​la​ ​microscopia​ ​confocal. -¿Cómoseforman?: En​ ​1989​ ​Hamilton​ ​y​ ​Characklis​ ​describieron​ ​la​ ​formación​ ​de​ ​biofilmes​ ​a​ ​través​ ​de​ ​las​ ​siguientes​ ​fases: ● Transporte​ ​de​ ​moléculas​ ​orgánicas​ ​y​ ​células​ ​a​ ​la​ ​superficies ● ​ ​Adsorción​ ​de​ ​moléculas​ ​orgánicas​ ​que​ ​acondicionan​ ​la​ ​superficie. ● Adsorción​ ​de​ ​células​ ​en​ ​la​ ​superficie. ● Crecimiento​ ​de​ ​células​ ​adsorbidas​ ​con​ ​síntesis​ ​asociada​ ​de​ ​exo-polimeros​ ​(EPS). ● La​ ​colonización​ ​es​ ​uno​ ​de​ ​los​ ​primeros​ ​pasos​ ​que​ ​da​ ​ligar​ ​a​ ​la​ ​formación​ ​de​ ​biofilmes​ ​en​ ​un​ ​material​ ​(produce​ ​una​ ​reducción​ ​de​ ​las​ ​propiedades​ ​de​ ​la​ ​sustancia​ ​que

colonice​ ​o​ ​su​ ​destrucción).

-Papeldelosexo-polimerosenelbiofilme: ● ​ ​Retienen​ ​agua​ ​y​ ​forman​ ​un​ ​hidrogel​ ​(matriz​ ​de​ ​polímero​ ​hinchada​ ​por​ ​agua)Unen​ ​las​ ​células​ ​y​ ​o​ ​el​ ​biofilme​ ​completo​ ​a​ ​la​ ​superficie.Cohesionan​ ​los​ ​agregados​ ​microbianos.Rellenan​ ​y​ ​forman​ ​el​ ​espacio​ ​intercelular.Dan​ ​forma​ ​tridimensional​ ​a​ ​la​ ​estructura​ ​del​ ​biofilme.Inmovilizan​ ​las​ ​células​ ​mediante​ ​largos​ ​tiempos​ ​de​ ​retención.Confiere​ ​insertado​ ​en​ ​una​ ​serie​ ​de​ ​anillos​ ​estabilidad​ ​a​ ​los​ ​consorcios​ ​microbianos​ ​que​ ​a​ ​su​ ​vez​ ​tienen​ ​sinergia.Retienen,​ ​estabilizan​ ​y​ ​protegen​ ​las​ ​exo-enzimas.Permiten​ ​la​ ​transferencia​ ​genética​ ​horizontal.Secuestra​ ​nutrientes​ ​de​ ​la​ ​fase​ ​acuosa.

Los​ ​biofilmes​ ​se​ ​pueden​ ​encontrar​ ​en​ ​superficies​ ​naturales​ ​y​ ​artificiales.​ ​Son​ ​muy​ ​beneficiosos​ ​en​ ​ríos​ ​y​ ​aguas.​ ​También​ ​son​ ​necesarios​ ​en​ ​plantas​ ​de​ ​tratamiento​ ​de​ ​aguas.

TEMA4:ORGANIZACIÓNYESTRUCUTRADELACÉLULAPROCARIOTA2. APÉNDICESEXTERNOS

-​ ​3​ ​Apéndices​ ​filamentosos. ● Las​ ​fimbrias​ ​(adhesión) ● Los​ ​Pili​ ​(transmisión​ ​genética) ● Los​ ​flagelos​ ​(movimiento)​ ​que​ ​difieren​ ​en​ ​el​ ​diámetro​ ​y​ ​en​ ​la​ ​longitud​ ​entre​ ​sí.

1)FLAGELOS: -​ ​Los​ ​polares: ● Monotricas:​ ​un​ ​solo​ ​flagelo. ● Anfitricas​ ​Un​ ​flagelo​ ​en​ ​cada​ ​polo ● Lofotrofica:​ ​dos​ ​o​ ​más​ ​flagelos​ ​en​ ​uno​ ​o​ ​ambos​ ​extremos ● Peritricos:​ ​flagelos​ ​distribuidos​ ​en​ ​toda​ ​la​ ​extensión​ ​de​ ​la​ ​célula. ● Átricas:​ ​sin​ ​flagelo.

-​ ​Elementos​ ​fundamentales​ ​del​ ​flagelo: ● Filamento:​ ​es​ ​la​ ​posición​ ​más​ ​larga​ ​del​ ​flagelo,​ ​contiene​ ​la​ ​flagelina. ● Gancho. ● Cuerpo​ ​basal:​ ​que​ ​fija​ ​el​ ​flagelo​ ​a​ ​la​ ​pared​ ​celular​ ​y​ ​a​ ​la​ ​membrana​ ​plasmática.​ ​Formado​ ​por​ ​un​ ​bastón​ ​central.

En​ ​las​ ​bacterias​ ​gram​ ​negativas,​ ​contienen​ ​dos​ ​pares​ ​de​ ​anillos.​ ​El​ ​externo​ ​está​ ​anclado​ ​a​ ​diversas​ ​porciones​ ​de​ ​la​ ​pared​ ​celular.​ ​El​ ​interno​ ​está​ ​anclado​ ​a​ ​la​ ​membrana plasmática.​ ​Bacterias​ ​gram​ ​positivas​ ​solo​ ​poseen​ ​el​ ​par​ ​de​ ​anillos​ ​interno. La​ ​energía​ ​requerida​ ​para​ ​la​ ​rotación​ ​procede​ ​de​ ​la​ ​fuerza​ ​motriz​ ​de​ ​protones.​ ​Por​ ​cada​ ​rotación​ ​se​ ​traslocan​ ​unos​ ​mil​ ​protones.​ ​El​ ​flujo​ ​de​ ​protones​ ​se​ ​lleva​ ​a​ ​cabo​ ​a​ ​través de​ ​las​ ​proteínas​ ​MOT. 2)MOVIMIENTOS:MUYIMPORTANTE: ● Flagelación​ ​perítrica:​​ ​gran​ ​cantidad​ ​de​ ​flagelos​ ​que​ ​el​ ​movimiento​ ​es​ ​lento​ ​y​ ​siempre​ ​en​ ​línea​ ​recta.​ ​Cuando​ ​tiene​ ​que​ ​voltearse​ ​se​ ​separan​ ​todos​ ​los​ ​flagelos,​ ​rota

y​ ​cambia​ ​de​ ​dirección​ ​retornando​ ​otra​ ​vez. ● Flagelación​ ​polar:​ ​se​ ​giran​ ​periódicamente:

-​ ​-​ ​Flagelos​ ​reversibles​ ​cambian​ ​de​ ​sentido​ ​invirtiendo​ ​la​ ​rotación​ ​flagelar. -​ ​-​ ​Flagelos​ ​unidireccionales:​ ​rotación​ ​en​ ​el​ ​sentido​ ​de​ ​las​ ​agujas​ ​del​ ​reloj.

3)TAXIA: Es​ ​el​ ​movimiento​ ​de​ ​acercamiento​ ​o​ ​alejamiento​ ​al​ ​estimulo -​ ​-​ ​Quimiotaxia:​ ​químico -​ ​-​ ​Fototaxia:​ ​luz.

4)CUERPOSDEINCLUSION: Son​ ​gránulos​ ​de​ ​material​ ​orgánico​ ​o​ ​inorgánico​ ​que​ ​se​ ​encuentran​ ​en​ ​la​ ​matriz citoplasmática.​ ​Tienen​ ​como​ ​función​ ​almacenar​ ​energía​ ​o​ ​servir​ ​de​ ​reservorio para​ ​construir​ ​otras​ ​cosas.

-​ ​TIPOS​ ​DE​ ​CUERPOS​ ​DE​ ​INCLUSIÓN​ ​EN​ ​BASE​ ​A​ ​SU​ ​FUNCION. ● TILACOIDES:

Estructuras​ ​de​ ​cianobacterias,​ ​y​ ​los​ ​únicos​ ​orgánulos​ ​procariotas​ ​intracelulares rodeados​ ​de​ ​membrana​ ​unitaria.​ ​Albergan​ ​el​ ​sistema​ ​fotoquímico. ● CLOROSOMAS:

Cuerpos​ ​elipsoidales.​ ​Contienen​ ​los​ ​pigmentos​ ​antena,​ ​Bacterioclorofila​ ​y​ ​carotenoides​ ​del​ ​sistema​ ​fotoquímico.​ ​Es​ ​típico​ ​de​ ​las​ ​bacterias​ ​verdes​ ​del​ ​azufre​ ​y​ ​bacterias fotótrofas. ● VACUOLAS​ ​DE​ ​GAS:

Propias​ ​de​ ​hábitats​ ​acuáticos.​ ​Son​ ​típicas​ ​de​ ​las​ ​cianobacterias,​ ​bacterias​ ​fotosintéticas​ ​y​ ​de​ ​las​ ​archeas​ ​(halobacterias).​ ​Sirven​ ​para​ ​la​ ​flotabilidad,​ ​permiten​ ​a​ ​las​ ​bacterias colocarse​ ​en​ ​una​ ​postura​ ​adecuada​ ​en​ ​el​ ​agua​ ​para​ ​realizar​ ​su​ ​metabolismo​ ​(capturar​ ​luz​ ​oxigeno​ ​y​ ​nutrientes).​ ​Si​ ​las​ ​condiciones​ ​son​ ​más​ ​adversas​ ​se​ ​hunden. ● CARBOXISOMAS:

Son​ ​inclusiones​ ​poliédricas​ ​hexagonales​ ​que​ ​contienen​ ​la​ ​enzima​ ​ribulosa​ ​1,​ ​5​ ​difosfato​ ​carboxilasa.​ ​Es​ ​necesaria​ ​para​ ​las​ ​bacterias​ ​que​ ​utilizan​ ​el​ ​CO2​ ​como​ ​fuente​ ​de carbono​ ​(fotosíntesis).​ ​Presente​ ​en​ ​quimiolitótrofas​ ​y​ ​cianobacterias.

● MAGNETOSOMAS:

Tienen​ ​dentro​ ​unas​ ​partículas​ ​intracelulares​ ​de​ ​mineral​ ​de​ ​hierro​ ​la​ ​magnetita​ ​y​ ​funcionan​ ​como​ ​un​ ​dipolo.​ ​Están​ ​influenciadas​ ​por​ ​el​ ​campo​ ​magnético.​ ​Presente​ ​en bacterias​ ​acuáticas​ ​(bacterias​ ​anaerobias​ ​microaerófilas. -​ ​TIPOS​ ​EN​ ​BASE​ ​A​ ​LA​ ​COMPOSICION​ ​QUIMICA: ● De​ ​reserva​ ​(orgánicos)​ ​glucógeno​ ​o​ ​almidón​ ​o​ ​poli​ ​B​ ​hidrohidroxibutirato ● De​ ​reserva​ ​(inorgánicos)​ ​gránulos​ ​de​ ​polifosfato​ ​o​ ​votulina​ ​y​ ​gránulos​ ​de​ ​azufre.

● PHB:​ ​(polihidroxidobutirato)

Compuesto​ ​lipídico​ ​formado​ ​​ ​por​ ​moléculas​ ​de​ ​B​ ​hidroxidobutirato​ ​unidas​ ​por​ ​enlace​ ​éster​ ​formando​ ​polímeros​ ​de​ ​PHB.​ ​La​ ​producen​ ​bacterias​ ​y​ ​archeas.​ ​Plásticos biodegradables.

● GRANULOS​ ​DE​ ​FOSFATO: Se​ ​originan​ ​cuando​ ​faltan​ ​nutrientes,​ ​momento​ ​en​ ​el​ ​que​ ​se​ ​absorben​ ​del​ ​medio.​ ​Tienen​ ​como​ ​función​ ​la​ ​síntesis​ ​de​ ​los​ ​ácidos​ ​nucléicos​ ​y​ ​de​ ​la​ ​pared​ ​de​ ​fosfolípidos.​ ​Y​ ​es importante​ ​en​ ​la​ ​eliminación​ ​de​ ​aguas​ ​residuales.​ ​Está​ ​presente​ ​en​ ​hongos​ ​protozoos​ ​y​ ​algas.

● GRANULOS​ ​DE​ ​AZUFRE

Almacenan​ ​azufre​ ​elemental,​ ​S.​ ​Cuando​ ​no​ ​hay​ ​sulfuro​ ​de​ ​hidrogeno​ ​en​ ​el​ ​medio​ ​,​ ​lo​ ​utilizan​ ​para​ ​oxidarlo​ ​a​ ​SO4. Almacenaran​ ​gran;ulos​ ​de​ ​azufre​ ​las​ ​bacterias​ ​​ ​fotosinteticas​ ​rojas​ ​y​ ​algunas​ ​quimiolototrofas​ ​(tipo​ ​de​ ​metabolismo​ ​de​ ​alguans​ ​bacterias)

● RIBOSOMAS: -​ ​Ribosoma​ ​de​ ​la​ ​celula​ ​procariota Estan​ ​constituidos​ ​por​ ​proteinas​ ​y​ ​ARN.​ ​Existen​ ​unos​ ​10​ ​a​ ​20.000​ ​ribosomas​ ​por​ ​bacteria.​ ​Realizan​ ​la​ ​traduccion​ ​de​ ​la​ ​informacion​ ​genetica​ ​y​ ​llevan​ ​a​ ​cabo​ ​la​ ​sintesis​ ​de proteinas.​ ​EL​ ​16Sr​ ​RNA​ ​se​ ​utiliza​ ​universalmente​ ​como​ ​marcador​ ​filigenetico​ ​​ ​taxonomico;.​ ​Para​ ​clasificar​ ​a​ ​los​ ​procariotas Subunidad​ ​pequeña:​ ​30S. Subunidad​ ​grande:​ ​50S. 5)INTRUDUCCIONALASENDOSPORAS Producidas​ ​por​ ​ciertas​ ​bacterias​ ​gram​ ​positivas:​ ​Bacillus​ ​y​ ​Clostridium. Cuando​ ​no​ ​existen​ ​nurtientes​ ​esenciales​ ​o​ ​estan​ ​disponibles​ ​en​ ​niveles​ ​muy​ ​bajos​ ​se​ ​produce​ ​el​ ​proceso​ ​de​ ​esporulacion​ ​en​ ​el​ ​interior​ ​de​ ​la​ ​celula​ ​vegetativa. Al​ ​final​ ​de​ ​la​ ​esporulacion,​ ​la​ ​celula​ ​madre​ ​se​ ​autolisa​ ​y​ ​la​ ​espora​ ​queda​ ​libre La​ ​endospora​ ​aguanta​ ​larquisimos​ ​periodos​ ​es​ ​ausencia​ ​de​ ​nutrientes,​ ​y​ ​resiste​ ​diversos​ ​factores​ ​de​ ​estres​ ​ambiental.​ ​Cuando​ ​las​ ​condiciones​ ​son​ ​adecuadas,​ ​la​ ​espora germina​ ​y​ ​se​ ​transforma​ ​en​ ​celula​ ​vegetativa. Solo​ ​es​ ​posible​ ​esto​ ​para​ ​microorganismos​ ​que​ ​puedan​ ​generar​ ​endosporas.​ ​Los​ ​que​ ​no,​ ​presentan​ ​otros​ ​procesos:​ ​Vacuolas​ ​de​ ​gas,​ ​reservorios.​ ​Cada​ ​celula​ ​genera​ ​una

espora. ESPORAS​ ​TEÑIDAS​ ​CON​ ​VERDE​ ​DE​ ​MALAQUITA Son​ ​cuerpos​ ​refrigentes​ ​(​ ​cuerpos​ ​que​ ​podemos​ ​teñiry​ ​diferenciar)​ ​formados​ ​dentro​ ​de​ ​la​ ​celula​ ​vegetativa​ ​al​ ​final​ ​del​ ​crecimiento​ ​exponencial. TIPOSDEESPORAS Segun​ ​el​ ​diametro​ ​relativo​ ​a​ ​la​ ​celula​ ​madre​ ​y​ ​posicion​ ​dentro​ ​de​ ​ella​ ​pueden​ ​ser: -​ ​Deformantes:​ ​en​ ​palillo​ ​de​ ​tambor​ ​o​ ​cerrilla​ ​en​ ​huso -​ ​No​ ​deformantes -​ ​Segun​ ​sulocalizacion​ ​dentro​ ​del​ ​esporangio – Terminales – Subterminales – Centrales ELPROCESODEESPORULACION La​ ​celula​ ​vegetativa​ ​se​ ​transforma​ ​mediante​ ​cambios​ ​geneticamente​ ​dirigidos​ ​en​ ​una​ ​endospora.​ ​Hay​ ​200​ ​genes​ ​implicados -​ ​Cese​ ​de​ ​la​ ​sistensis​ ​de​ ​proteinas​ ​y​ ​sintesis​ ​de​ ​otras​ ​especificas. -​ ​Se​ ​condensa​ ​el​ ​DNA. -​ ​Entramos​ ​en​ ​la​ ​primera​ ​fase​ ​con​ ​una​ ​division​ ​asimetrica​ ​en​ ​donde​ ​se​ ​invaginan​ ​los mesosomas​ ​y​ ​empieza​ ​la​ ​formacion​ ​de​ ​la​ ​endospora​ ​de​ ​forma​ ​asimetrica -​ ​Formacion​ ​del​ ​cortex:​ ​tiene​ ​como​ ​función​ ​proteger​ ​​ ​la​ ​endospora​ ​de​ ​la​ ​deshidratacion. Dentro​ ​esta​ ​el​ ​nucleo​ ​y​ ​el​ ​ADN.

ACIDO

DIPICOLINICODPA Es​ ​un​ ​compuesto​ ​quimico​ ​caracteritico​ ​de​ ​las​ ​endosporas​ ​ausentes​ ​en​ ​las​ ​celulas vegetativas.​ ​Se​ ​localiza​ ​en​ ​el​ ​nucleo​ ​de​ ​las​ ​endosporas.​ ​Necesita​ ​unirse​ ​al​ ​Calcio formando​ ​un​ ​complejo​ ​que​ ​sopone​ ​el​ ​10%​ ​del​ ​peso​ ​de​ ​la​ ​endospora Se​ ​une​ ​obligatoriamente​ ​al​ ​calcio​ ​para​ ​realizar​ ​las​ ​siguientes​ ​funciones:

-​ ​Reducir​ ​la​ ​disponibilidad​ ​de​ ​agua​ ​de​ ​la​ ​endospora,​ ​favoreciendo​ ​la​ ​deshidratación​ ​de​ ​la​ ​endospora -​ ​Intercalarse​ ​entra​ ​las​ ​Bases​ ​de​ ​DNA​ ​para​ ​que​ ​no​ ​se​ ​desnaturalicen,​ ​estabilizando​ ​el​ ​DNA​ ​frante​ ​a​ ​la​ ​desnaturalizaci'on Se​ ​encuentra​ ​en​ ​el​ ​nucleo. SASPDaresistencia Son​ ​pequeñas​ ​proteinas​ ​y​ ​acido​ ​solubles.​ ​Se​ ​unen​ ​fuertemente​ ​al​ ​DNA​ ​y​ ​los​ ​protegen​ ​de​ ​la​ ​radiaci'on​ ​ultravioleta,​ ​la​ ​desecacion​ ​y​ ​el​ ​calor​ ​seco. Estos​ ​compuestos​ ​son​ ​proteinas​ ​que​ ​las​ ​protegen​ ​originadas​ ​solo​ ​en​ ​condiciones​ ​adversas Durante​ ​la​ ​germinacion​ ​(​ ​cuando​ ​las​ ​condiciones​ ​vuelven​ ​a​ ​ser​ ​adecuadas)sirven​ ​como​ ​una​ ​fuente​ ​de​ ​carbono​ ​y​ ​energia.

TEMA5:GENÉTICABACTERIANA 1)ELNUCLEOIDE: El​ ​DNA​ ​de​ ​procariota​ ​no​ ​está​ ​rodeado​ ​de​ ​membrana.​ ​Está​ ​contenido​ ​en​ ​una​ ​region​ ​concreta​ ​del​ ​citoplasma,​ ​llamada​ ​nucleoide​ ​o​ ​genoforo.​ ​El​ ​genoma​ ​esta​ ​compuesto​ ​por un​ ​solo​ ​cromosoma​ ​(procariotas).​ ​Hay​ ​alguna​ ​excepcion.​ ​​Examen:solo​ ​un​ ​cromosoma.​ ​Opcionalmente​ ​además,​ ​esta​ ​formado​ ​por​ ​plásmidos.

ELCROMOSOMAPROCARIOTA:COMPOSICIÓNQUIMICAYESTRUCTURA -​ ​60%​ ​DNA -​ ​30%​ ​RNA -​ ​10%​ ​proteinas. Normalmente​ ​,​ ​un​ ​solo​ ​cromosoma​ ​circular​ ​y​ ​cerrado.​ ​Es​ ​siempre​ ​Haploide​ ​(n)​ ​pero​ ​como​ ​excepcion​ ​pueden​ ​existir​ ​varias​ ​copias​ ​del​ ​cromosoma​ ​cuando​ ​la​ ​bacteria​ ​crece rapido. EXCEPCIONES: -​ ​Borrelia​ ​y​ ​Streptomyces​ ​​ ​tiene​ ​un​ ​cromosoma​ ​lineal. -​ ​Bacterias​ ​con​ ​dos​ ​o​ ​mas​ ​cromosomas -​ ​Rhodobacter,​ ​Vibrio,​ ​Leptospira,​ ​Brucella:​ ​dos​ ​cromosomas​ ​lineales -​ ​Sinorhzobium​ ​meliloti:​ ​tres​ ​cromosomas​ ​circulares -​ ​Agrobacterium​ ​tumefaciens:​ ​una​ ​lineal​ ​y​ ​uno​ ​circular TAMAÑODELCROMOSOMA Bacterias​ ​t'ipicas:​ ​3000​ ​–​ ​5000​ ​kpb Escherichia​ ​coli​ ​(4700) Bacterias​ ​pequi;as​ ​70​ ​–​ ​1000​ ​kpb Mycoplasma​ ​genitalium​ ​700 Bacterias​ ​con​ ​ciclos​ ​complejos​ ​12000kpb Actinomicetos​ ​y​ ​cianobacterias 6)PLASMIDOS:DEFINICIONYCONCEPTOSGENERALES: Elementos​ ​geneticos​ ​extracromosomicos​ ​con​ ​la​ ​capacidad​ ​de​ ​autoreplicarse. DNA​ ​bicatenario.​ ​Menos​ ​que​ ​5%​ ​del​ ​tamaño​ ​del​ ​cromosoma.​ ​La​ ​gran​ ​mayoria​ ​circulares,​ ​la​ ​minoria​ ​lineales.​ ​No​ ​tienen​ ​capacidad​ ​replicativa.​ ​Las​ ​enzimas​ ​que​ ​replican​ ​los plasmidos​ ​son​ ​encimas​ ​celulares​ ​normales​ ​1​ ​–​ ​1000​ ​kbp ​FUNCIONPRINCIPALDELOSPLASMIDOS: -​ ​Controlan​ ​la​ ​iniciación​ ​de​ ​la​ ​replicación​ ​(sobre​ ​todo​ ​en​ ​la​ ​conjugación). -​ ​Confieren​ ​a​ ​las​ ​bacterias​ ​resistencia​ ​a​ ​antibióticos. -​ ​Confieren​ ​tolerancia​ ​a​ ​metales​ ​pesados. -​ ​Confieren​ ​la​ ​capacidad​ ​de​ ​degradar​ ​sustancias​ ​poco​ ​habituales​ ​en​ ​el​ ​medio​ ​ambiente​ ​(plásmidos​ ​catabólicos​ ​importantes​ ​en​ ​biorremedacion) -Según​ ​su​ ​capacidad​ ​de​ ​transferencia​ ​horizontal​ ​se​ ​clasifican​ ​en:

● Plásmidos​ ​conjugativos:​​ ​son​ ​aquellos​ ​que​ ​se​ ​transfieren​ ​en​ ​cepas​ ​por​ ​medio​ ​de​ ​fenómenos​ ​de​ ​conjugación. ● Plásmidos​ ​promiscuos​:​ ​son​ ​aquellos​ ​plásmidos​ ​que​ ​no​ ​solo​ ​se​ ​transfieren​ ​entre​ ​cepas​ ​de​ ​la​ ​misma​ ​especie,​ ​sino​ ​que​ ​son​ ​capaces​ ​de​ ​hacerlo​ ​entre​ ​especies​ ​​ ​y

géneros​ ​muy​ ​diversos​ ​o​ ​de​ ​amplio​ ​espectro​ ​de​ ​hospedadores​ ​permitiendo​ ​transferencia​ ​horizontal​ ​de​ ​información​ ​genética​ ​entre​ ​grupos​ ​bacterianos filogenéticamente​ ​alejados.

● Plásmidos​ ​no​ ​conjugativos​:​ ​son​ ​aquellos​ ​carentes​ ​de​ ​la​ ​propiedad​ ​de​ ​conjugación​ ​(no​ ​se​ ​pueden​ ​auto​ ​transmitir​ ​pero​ ​puede​ ​ser​ ​ayudados​ ​por​ ​un​ ​plásmido conjugativo​ ​presente​ ​en​ ​la​ ​misma​ ​bacteria.

● Episomas​:​ ​plásmidos​ ​que​ ​pueden​ ​integrarse​ ​en​ ​el​ ​cromosoma​ ​bacteriano. Transposones​:​ ​segmentos​ ​pequeños​ ​del​ ​ADN​ ​de​ ​la​ ​bacteria​ ​que​ ​pueden​ ​desplazarse​ ​a​ ​otra​ ​zona​ ​cambiando​ ​la​ ​codificación​ ​de​ ​la​ ​proteína.​ ​Tienen​ ​entre​ ​700​ ​y​ ​40000 pares​ ​de​ ​bases.​ ​Contiene​ ​la​ ​enzima​ ​necesaria​ ​para​ ​la​ ​transposición​ ​(la​ ​transpopasa).​ ​No​ ​tiene​ ​que​ ​ver​ ​ya​ ​con​ ​los​ ​plásmidos.

7)MECANISMOSDETRANSFERENCIAGENETICAENTREMICROORGANISMOS: -​ ​Haploides. -​ ​Se​ ​reproducen​ ​asexualmente -​ ​Intercambio​ ​de​ ​material​ ​genético​ ​por​ ​la​ ​transferencia​ ​horizontal​ ​de​ ​información​ ​genética. -​ ​Proceso​ ​fragmentario​ ​y​ ​unidireccional. -CONJUGACION: Mecanismos​ ​por​ ​el​ ​cual​ ​se​ ​transfiere​ ​material​ ​genético​ ​de​ ​una​ ​bacteria​ ​a​ ​otra.​ ​Es​ ​un​ ​proceso​ ​rápido​ ​y​ ​eficiente.

Es​ ​mediado​ ​por​ ​un​ ​plásmido​ ​(fragmento​ ​circular​ ​de​ ​DNA)​ ​que​ ​se​ ​replica independientemente​ ​del​ ​cromosoma. -​ ​El​ ​plásmido​ ​conjugativo​ ​más​ ​habitual​ ​es​ ​el​ ​PLASMIDO​ ​F. -​ ​La​ ​conjugación​ ​requiere​ ​contacto​ ​directo​ ​entre​ ​las​ ​células,​ ​necesita​ ​célula​ ​donadora​ ​y receptora. -​ ​Tenemos​ ​una​ ​celula​ ​donadora​ ​(​ ​contiene​ ​el​ ​plásmido​ ​conjugativo)​ ​Célula​ ​F+. Tenemos​ ​ademas​ ​una​ ​celula​ ​receptora​ ​​ ​(​ ​no​ ​contiene​ ​el​ ​plasmido)​ ​Celula​ ​F- -​ ​Las​ ​células​ ​que​ ​se​ ​conjugan​ ​tienen​ ​que​ ​ser​ ​de​ ​tipo​ ​sexual​ ​opuesto. -​ ​En​ ​las​ ​gramnegativas​ ​el​ ​plásmido​ ​contiene​ ​genes​ ​que​ ​codifican​ ​la​ ​síntesis​ ​de​ ​los​ ​pili sexuales​ ​para​ ​mantener​ ​en​ ​contacto​ ​directo​ ​las​ ​células. A​ ​través​ ​del​ ​pili​ ​pasan​ ​el​ ​plásmido -​ ​Las​ ​grampositivas​ ​producen​ ​moléculas​ ​de​ ​superficie​ ​cohesivas​ ​que​ ​mantienen​ ​el contacto​ ​directo​ ​.El​ ​plásmido​ ​se​ ​replicara​ ​durante​ ​la​ ​transferencia​ ​de​ ​una​ ​copia monocatenaria​ ​del​ ​DNA​ ​del​ ​plásmido​ ​a​ ​la​ ​cepa​ ​receptora.​ ​El​ ​plásmido​ ​se​ ​duplica primero​ ​y​ ​luego​ ​se​ ​transfiere. Cuando​ ​el​ ​plásmido,​ ​Factor​ ​F,​ ​se​ ​encuentran​ ​dentro​ ​de​ ​la​ ​célula​ ​F,​ ​se​ ​produce​ ​la recombinación​ ​entre​ ​el​ ​plásmido​ ​el​ ​factor​ ​F​ ​y​ ​el​ ​cromosoma​ ​de​ ​la​ ​célula.​ ​El​ ​plásmido queda​ ​integrado​ ​y​ ​se​ ​convierte​ ​en​ ​una​ ​célula​ ​de​ ​esta​ ​recombinación:​ ​HFR.

-TRANFORMACION:

-​ ​Proceso​ ​aleatorio. -​ ​Puede​ ​transferirse​ ​cualquier​ ​porción​ ​de​ ​genoma.​ ​En​ ​la​ ​naturaleza​ ​se​ ​produce​ ​poco​ ​o​ ​nada -​ ​En​ ​el​ ​laboratorio​ ​la​ ​clonación​ ​utiliza​ ​células​ ​altamente​ ​competentes. -​ ​La​ ​célula​ ​competente​ ​es​ ​aquella​ ​capaz​ ​de​ ​aceptar​ ​DNA​ ​desnudo​ ​y​ ​ser​ ​transformada.

8)MODIFICACIONESDELAINFORMACIONGENETICA: -​ ​Tanto​ ​la​ ​conjugación​ ​como​ ​la​ ​transformación​ ​modifican​ ​la​ ​información genética. -​ ​-​ ​Mutación:​ ​DNA​ ​cambio​ ​heredable. -​ ​-​ ​Sustitución​ ​de​ ​bases​ ​puntuales. -​ ​-​ ​Mutación​ ​de​ ​cambio​ ​del​ ​marco​ ​de​ ​lectura. -​ ​Las​ ​mutaciones​ ​pueden​ ​ser: -​ ​-​ ​Espontaneas​ ​o​ ​causadas.​ ​La​ ​tasa​ ​de​ ​mutación​ ​espontanea​ ​es​ ​de​ ​​10​-9​. -​ ​-​ ​Provocadas​ ​por​ ​agentes​ ​mutágenos:​ ​Los​ ​agentes​ ​mutágenos​ ​incrementan la​ ​tasa​ ​de​ ​mutación​ ​de​ ​10​ ​a​ ​1000​ ​veces. PLÁSMIDOS: -​ ​Están​ ​implicados​ ​en​ ​la​ ​conjugación​ ​sexual. -​ ​Llevan​ ​a​ ​cabo​ ​la​ ​degradación​ ​de​ ​compuestos​ ​xenobióticos​ ​(plásmidos catabólicos​ ​por​ ​tanto​ ​importantes​ ​en​ ​la​ ​biorremediación) -​ ​Resistencia​ ​a​ ​antibióticos

-​ ​Factores​ ​de​ ​virulencia. MODELODEOPERONDELALACTOSA​​ ​(NO​ ​EXAMEN) Modelo​ ​de​ ​operon​ ​de​ ​una​ ​expresión​ ​genica.​ ​Esta​ ​formado​ ​por​ ​genes​ ​estructurales​ ​y​ ​una​ ​región​ ​control.​ ​La​ ​region​ ​control​ ​siempre​ ​está​ ​contigua​ ​a​ ​los​ ​genes estructurales​ ​Operon​ ​de​ ​la​ ​lactosa b​ ​galactoidae.

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