Uso y manejo de micropipetas, Otro de Biología Aplicada. Universidad Autónoma de Nuevo León
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gabriel-cevada6 de octubre de 2017

Uso y manejo de micropipetas, Otro de Biología Aplicada. Universidad Autónoma de Nuevo León

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practica de laboratorio acerca de los distintos usos que puede tener una micropipeta
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Práctica 1 Uso y manejo de Micropipetas

Introducción

La manipulación de ácidos nucleicos depende en gran medida del manejo de volúmenes muy pequeños. Para esto, se utilizan instrumentos de medición apropiados. Dentro de los cuales están las Micropipetas y los Microtubos, llamados

tradicionalmente tubos Eppendorf.

Las Micropipetas pueden ser de diversas marcas, las Glison y Eppendorf son las más usadas y comunes en los laboratorios de Biología Molecular, sin embargo, hay otras marcas.

Independientemente de la marca, la mayoría de ellas son de volúmenes variables (aunque las hay de volúmenes fijos). Las puntillas son de 3 diferentes colores que ayudan a identificar las pipetas en donde se pueden adaptar (tabla1).

Tipo de micropipeta Volumen Color de puntilla 2.0 μL 0.5 – 2.0 μL Blancas 10.0 μL 0.5 – 10 μL Blancas 20.0 μL 2.0 – 20 μL Amarilla 100.0 μL 10 – 100 μL Amarilla 200.0 μL 20 – 200 μL Amarilla 1000.0 μL 100 – 1000 μL Azul

Tabla 1. Tipos de Micropipetas, volumen que abarcan y sus puntillas correspondientes.

La micropipeta se compone de 4 partes principales: pistón, rueda dentada de graduación de volumen, expulsor de punta, punta o tip descartable (Figura 1).

Tomar valores que se encuentren en los extremos de la micropipeta no es recomendable debido a que incrementa el error experimental.

Las puntillas son desechables y se encuentran estériles, por lo que no deben de tocarse con la mano. Se utiliza una diferente para cada solución distinta y se desechan en un recipiente apropiado.

Es importante que al terminar de usar una micropipeta esta deberá de dejarse en el volumen máximo, para evitar un desajuste en el resorte interno de la micropipeta.

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1234Figura 1. Micropipeta y sus partes. 1) Émbolo. 2) Ruede de Graduación. 3) Expulsor. 4) Punta

Objetivo

Adquirir la habilidad de tomar el volumen deseado de manera precisa con la micropipeta más apropiada y tomar las precauciones en el uso y manejo de las mismas para su conservación.

Materiales

• Micropipetas de 20 μL • Micropipeta de 100 μL • Micropipetas de 200 μL • Micropipetas de 1000 μL • Puntillas • Recipiente de plástico • Balanza analítica

Procedimiento

1. Encender la balanza analítica 2. Ajustar (tarar) a cero. 3. Colocar el recipiente en el plato de la balanza y tarar a cero. 4. Seleccionar la micropipeta del volumen indicado. 5. Colocar la puntilla apropiada tomándola directamente de la caja sin tocarla con la

mano. 6. Ajustar la micropipeta al volumen deseado moviendo lentamente el tornillo en la

dirección apropiada. 7. Pesar cinco veces el mismo volumen con la misma puntilla colocando la gota sobre

el recipiente y tarando a cero entre cada pesada. 8. Anotar cada pesada en el cuadro indicado. 9. Sacar el valor medio de todas las pesadas.

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Resultados. Micropipeta/Volumen Repetición Peso

1 2

Volumen seleccionado 3 4 5

Valor promedio Desviación estándar

Rango Coeficiente de variación

Micropipeta/Volumen Repetición Peso 1 2

Volumen seleccionado 3 4 5

Valor promedio Desviación estándar

Rango Coeficiente de variación

Micropipeta/Volumen Repetición Peso 1 2

Volumen seleccionado 3 4 5

Valor promedio Desviación estándar

Rango Coeficiente de variación

Micropipeta/Volumen Repetición Peso 1 2

Volumen seleccionado 3

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4 5

Valor promedio Desviación estándar

Rango Coeficiente de variación

Cuestionario

1. Defina y explique exactitud.

2. Defina y explique precisión.

3. Defina y explique reproducibilidad.

4. Defina y explique repetibilidad.

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5. Investiga cual es el rango de error de las Micropipetas (Gilson o Eppendorf) de 2.0 μL, 10.0 μL, 20.0 μL, 100 μL, 200 μL y 1000 μL.

6. ¿Qué es el rango de error?

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Discusión

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Conclusión

Referencias

1._______________________________________________________________

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3._______________________________________________________________

4._______________________________________________________________

5._______________________________________________________________

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