Scarica Biologia molecolare di base e più Dispense in PDF di Biologia Molecolare solo su Docsity! Appendice al Capitolo 7 – La soppressione di mutazioni nonsense Mutazioni a soppressore: una mutazione nel gene di una molecola di tRNA che cambia la sua ansa dell’anticodon può sopprimere mutazioni nonsense che avvengono altrove in geni per proteine. 1. Generazione di una mutazione nonsense. La sequenza wild-type di DNA 5'–CTA CAG ATT–3' 3'–GAT GTC TAA–5' produce l’mRNA 5'–CUA CAG AUU–3' che codifica il polipeptide – Leu – Gln – Ile – [etc] La mutazione in prima posizione (CT) nella 2a tripletta dà una sequenza di DNA mutante: Filamento senso 5'–CTA TAG ATT–3' 3'–GAT ATC TAA–5' produce l’mRNA 5'–CUA UAG AUU–3' che codifica il polipeptide – Leu – *** poiché UAG è un codon stop (amber stop). La sintesi del polipeptide termina prematuramente. 2. Generazione di una mutazione 'soppressore di amber' nel gene per un tRNA La porzione del gene per un tRNA (tDNA) che codifica l’ansa dell’anticodon del tRNATyr, che riconosce il codon UAC e inserisce Tyr, è: gene tDNA 3'–ATG–5' 5'–TAC–3' che produce il tRNA 3'–AUG–5' ansa dell’anticodon che legge sull’mRNA 5'–UAC–3' come – Tyr – Una mutazione in terza posizione (CG sul filamento 5'3') in questa regione produce un gene tDNA mutante: gene tDNA 3'–ATC–5' 5'–TAG–3' che produce il tRNA 3'–AUC–5' ansa dell’anticodon che legge sull’mRNA 5'–UAG–3' come – Tyr – Quindi, il gene tDNA mutato produce una molecola di tRNA che leggerà il codon mutato UAG di cui al punto 1 come un codon per Tyr, anziché come codon 'stop'. 3. La mutazione nel gene del tRNA sopprime la mutazione nonsense nel gene della proteina. Il polipeptide avrà una sostituzione amminoacidica (GlnTyr); la traduzione della parte restante dell’mRNA procederà normalmente, col quadro di lettura giusto. Si dice che la mutazione nel gene tDNA sopprime l’effetto fenotipico della prima mutazione in un gene che codifica una proteina, e il tRNA soppressore permetterà la traduzione dell’mRNA in quantità sufficiente da consentire un fenotipo 'standard'. Notiamo che altri codon 'stop' saranno letti in modo errato come 'Tyr': tuttavia, la maggior parte saranno riconosciuti dai fattori di terminazione e i prodotti proteici saranno terminati normalmente.
