PREPARAZIONE CAMPIONI PER LA MICROSCOPIA: FASI
è un procedimento a tappe:
1. dissezione, prelievo del tessuto dell’organo d’interesse.
2. fissazione, per mezzo di agenti fisici ma soprattutto chimici
3. inclusione del frammento in un mezzo che dia sostegno e consistenza tale
(abbastanza dura) per consentire di passare alla fase successiva
4. taglio, ottenimento di sezioni sottili (tra i 5 e i 10 micron per la microscopia ottica,
meno per l’elettronica) che consentano alla luce/elettroni di passare attraverso la
sezione
5. colorazione, per ovviare il problema della scarsità di contrasto che hanno
normalmente i tessuti essendo costituiti per la maggior parte di acqua. Applichiamo
quindi delle colorazioni per mettere in evidenza o le strutture (morfologia) oppure
per evidenziare specifici componenti chimici del tessuto, per vedere dove si
localizzano, se ci sono e la loro abbondanza.
COLORAZIONI PRINCIPALI
le colorazioni possono essere di tipo istomorfologico (come la classica ematossilina eosina
che permette di evidenziare un po’ tutti i tipi di tessuto: l’ematossilina colora i nuclei,
l’eosina si occupa di evidenziare i citoplasmi e in molti casi anche la componente
extracellulare) e istochimiche che non servono per evidenziare strutture particolari ma la
presenza di specifiche sostanze e molecole verso le quali i coloranti utilizzati si legano in
modo selettivo.
-COLORAZIONE DI PAS (periodic acid schi): si incontra, per esempio,
nelle sezioni di tiroide in quanto il contenuto del follicolo tiroideo è
estremamente PAS-positivo, contenendo proteine glicosidiche. il
trattamento delle sezioni con acido periodico ossida i gruppi alcolici
degli zuccheri in gruppi aldeidici e il reattivo di Schi (un tipo di
fucsina) reagisce con questi gruppi aldeidici dando una colorazione
