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Microbiologia - Biosegurança e controlo, Notas de aula de Microbiologia

Níveis de biosegurança, controlo microbiano, processos fisicos, material p autoclave

Tipologia: Notas de aula

2023

À venda por 24/07/2023

alexandra-ferreira-28
alexandra-ferreira-28 🇵🇹

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Biosegurança e controlo
3 princípios de condução do trabalho de laboratório:
Segurança - Antes de fazer qualquer coisa no laboratório, pergunte se é seguro,
caso contrário, não faça.
Qualidade - Todo o trabalho de laboratório deve ser baseado em alta qualidade
cientificamente.
Quantidade - Terminaremos o máximo de trabalho laboratório que pudermos.
Níveis de biossegurança (NBS)
BSL-1 - Agentes microbianos não causam doenças. Apresentam risco mínimo para o
pessoal do laboratório.
Ex.: Escherichia coli genérica e pseudomonas spp.
BSL-2 - Agentes microbianos causam risco moderado ao pessoal do laboratório e ao
ambiente.
Ex.: E. coli O157:H7, Salmonella spp.
BSL-3 - Os agentes microbianos podem causar doença grave ou potencialmente total.
Através da via inalatória de exposição.
Ex.: Clostridium botulinum.
BSL-4 - Os 600 microbianos apresentam um alto risco individual de Transmissão
Moreno ao Sol. Infeções laboratoriais e doenças com risco de vida.
Ex.: Mycobacterium tuberculosis
! Nas aulas só usamos BSL 1 e 2!
Controle microbiano:
Prevenir a transmissão de doenças e infeções.
Prevenir a contaminação ou proliferação descontrolada de microrganismos.
Evitar a deterioração do material.
Morte - Perda irreversível da capacidade de reprodução.
Esterilização – Perda irreversível da capacidade de produção de todas as formas
microbianas de vida.
Não garantem a eliminação completa: (reduzem o número de microrganismos.
Inativam agentes patogénicos)
Desinfeção - Remoção de todos os microrganismos que podem causar infeções.
Objetivo animado e superfície.
Ex.: hipoclorito
Antissepsia – Prevenção de infeção. Reduz a carga microbiana ao nível das
mucosas. Aplicado para tecidos vivos, pele, campo cirúrgico.
Ex.: betadine
Sanitização - Redução da carga microbiana para níveis seguros.
Higienização/Desinfeção.
Ex.: detergentes
Espectro de ação: os germicidas têm um espectro mais amplo; fungicida é eficaz
para fungos, mas não para
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Biosegurança e controlo

3 princípios de condução do trabalho de laboratório:  Segurança - Antes de fazer qualquer coisa no laboratório, pergunte se é seguro, caso contrário, não faça.  Qualidade - Todo o trabalho de laboratório deve ser baseado em alta qualidade cientificamente.  Quantidade - Terminaremos o máximo de trabalho laboratório que pudermos. Níveis de biossegurança (NBS) BSL-1 - Agentes microbianos não causam doenças. Apresentam risco mínimo para o pessoal do laboratório. Ex.: Escherichia coli genérica e pseudomonas spp. BSL-2 - Agentes microbianos causam risco moderado ao pessoal do laboratório e ao ambiente. Ex.: E. coli O157:H7, Salmonella spp. BSL-3 - Os agentes microbianos podem causar doença grave ou potencialmente total. Através da via inalatória de exposição. Ex.: Clostridium botulinum. BSL-4 - Os 600 microbianos apresentam um alto risco individual de Transmissão Moreno ao Sol. Infeções laboratoriais e doenças com risco de vida. Ex.: Mycobacterium tuberculosis ! Nas aulas só usamos BSL 1 e 2! Controle microbiano:  Prevenir a transmissão de doenças e infeções.  Prevenir a contaminação ou proliferação descontrolada de microrganismos.  Evitar a deterioração do material. Morte - Perda irreversível da capacidade de reprodução. Esterilização – Perda irreversível da capacidade de produção de todas as formas microbianas de vida. Não garantem a eliminação completa: (reduzem o número de microrganismos. Inativam agentes patogénicos) Desinfeção - Remoção de todos os microrganismos que podem causar infeções. Objetivo animado e superfície. Ex.: hipoclorito Antissepsia – Prevenção de infeção. Reduz a carga microbiana ao nível das mucosas. Aplicado para tecidos vivos, pele, campo cirúrgico. Ex.: betadine Sanitização - Redução da carga microbiana para níveis seguros. Higienização/Desinfeção. Ex.: detergentes Espectro de ação: os germicidas têm um espectro mais amplo; fungicida é eficaz para fungos, mas não para

esporos (= estrutura biológica mais resistente); esporicida garante a esterilização Etanol 90%. – Bactericida, evapora facilmente. Antisséptico. Etanol 70% - Desinfetante. Concertação mais baixa. Tempo de evaporação aumenta. Mais eficaz. Iodo – Iodo dissolvido em álcool. Bom anti séptico. Agressivo. Processos físicos… Temperatura  Alto (esterilização):

  • Húmido (desnaturação de proteínas) – autoclave 121ºC/15 min ou 115 ºC/20 min
  • Seco – ar quente 160ºC/2h ou 180ºC/1h ou chama direta/inceneração  Baixo (conservação) Radiação  Energia alta (destruição do DNA)  Energia baixa (danos ao DNA) Filtração Material p autoclave:  Material de vidro  Meio de cultura não termo sensível  Soluções contaminadas  Material descartável contaminado e não reutilizável  Jalecos cirúrgicos, panos de campo O vapor de água sob pressão tem uma maior capacidade de penetração Incubadora/forno - método de esterilização; materiais de vidro, metal sem solda, porcelana, pós, óleos, ... 160ºC / 2h; 180ºC / 1h Chama direta: bico de Bunsen; Instrumentos de semeadura de metal (laços, fios), bicos de tubo, pipetas, ... 10-15 cm tudo estéril Baixas temperaturas (4ºC): Repressão do metabolismo – estagnação do funcionamento enzimático, impede a multiplicação; Conservação e preservação de material biológico (bactérias, vírus, células) Abaixo de –20ºC é necessário o uso de um crioprotetor