Baixe Relatório de Aulas Práticas e outras Trabalhos em PDF para Microbiologia Farmacêutica, somente na Docsity! UNIVERSIDADE DA AMAZÔNIA - UNAMA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE - CCBS CURSO DE BACHARELADO EM FARMÁCIA RELATÓRIO AULAS PRATICAS DE MICROBIOLOGIA CLINICA LIDIANE SUELEN SERRAO MENDES BELÉM - PA 2021 AULA 1: PREPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA 1. INTRODUÇÃO Para o cultivo e identificação de microrganismos, usam-se soluções e substâncias nutritivas chamadas meios de cultura, que devem atender às exigências nutricionais das espécies a serem cultivadas. Quanto a composição química, podem ser: Meios sintéticos (os componentes são quimicamente definidos) e Meios complexos (quando se adicionam ao meio substâncias complexas, como por exemplo, extrato de carne, peptona, sangue, etc). Em relação ao estado físico, podem ser líquidos, também denominados de caldos, ou sólidos (caldo contendo 1,5% a 2% de Ágar). 2. OBJETIVO Preparar diferentes meios de cultura a serem utilizados para o cultivo de microrganismos. 3. MATERIAL Meio de cultura desidratado (ágar Macconkey e Mueller hinton) Béqueres; Cabine de segurança Biológica; Água Destilada; Balança; Placas de Petri; Papel crepado; Autoclave. Amostra (urina) 4. MÉTODO Para seguir o protocolo indicado, precisa-se adicionar separadamente à água destilada, tomando-se o cuidado de homogeneizar a cada componente adicionado. Neste caso, é necessário pesar a quantidade de mistura AULA 2: TÉCNICA DE SEMEADURA Meio de cultura padrão para a realização do TSA MATERIAIS UTILIZADOS: 1. Placa de Petri contendo meio de cultura padrão: Agar Müeller-Hinton. 2. Swab de algodão estéril para a semeadura bacteriana. 3. Discos de variados Antibióticos (cada um destes apresenta uma concentração padrão, fixa). 4. Pinças para manuseio dos discos. MÉTODO 1° passo, é necessário retirar a placa e os discos já resfriados, aguardar aproximadamente de 20 a 30 minutos para que adquiram a temperatura ambiente antes da execução da prova. 2° Passo: com o auxílio da alça de inoculação, retirar a colônia ao qual foi semeada na placa, em seguida, coloque no tubo até que seu aspecto fique turvo. Em seguida, tocar a colônias da bactéria em análise; 3° Passo: Suspender as colônias contidas no tubo, retirar o excesso de caldo, comprimindo a haste contra a parede do tubo para retirar o excesso até se obter uma turvação compatível com o grau 0,5 da escala Mac Farland; nestas condições o inóculo estará contendo 108 bactérias/mL, quantidade padronizada pelo NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards). 4° Passo: Semear em seguida a suspensão bacteriana em movimento de ZIG E ZAG e de forma suave em todas as direções na placa (ágar Mueller-Hinton), procurando abranger toda a superfície. Entretanto, o Semeio deve ser realizado em três planos, para que haja crescimento confluente. Em seguida, aguardar a superfície do agar secar para dar continuidade ao procedimento. 5° passo: Com o auxílio de uma pinça flambada, escolher o medicamento e colocar os discos sobre a superfície do meio inoculado, resguardando um espaço de, pelo menos, 2 a 3 cm do disco para a borda da placa. Em seguida, realizar uma leve pressão com a ponta da pinça para uma boa adesão dos discos.
