PCR → reazione a catena della polimerasi. Sistema per amplificare il DNA
Ingredienti
✗Campione di DNA
✗Una miscela che contiene 4 nucleosidi trifosfato
✗Primer → innesco per la reazione
✗Una DNA polimerasi termoresistente
Serve
✗Medicina → diagnostica ed evidenziazione di cellule tumorali quando sono
poche
✗Medicina legale → analisi di paleontologia e antropologia molecolare
✗Ingegneria genetica → studio del genoma di organismi non coltivabili
✗Ecologia → studio di popolazioni
Fasi
1) Una molecola di DNA contenente una sequenza che si desidera copiare
viene riscaldata a 90° e così denaturata
2) Quando la miscela si raffredda, inneschi ottenuti per sintesi artificiale si
associano al DNA a
filamento singolo
3) I nucleotidi trifosfato e una DNA polimerasi resistente al calore
consentono la sintesi di due nuovi filamenti di DNA
4) Il processo viene ripetuto e la quantità di DNA raddoppia
5) Grazie alla ripetizione del processo, si possono ottenere milioni di copie
del DNA originale in poco tempo
ELETTROFORESI → tecnica che consente di separare ed analizzare frammenti
di acidi nucleici
Questa tecnica sfrutta le cariche presenti nelle molecole di DNA o RNA caricate
negativamente per farle migrare in un campo elettrico attraverso un gel di
agarosio.
