Amilasa pancreática CC FS – Página 1 * color completo
**Fluid Stable = líquido estable
Amilasa pancreática CC
*
FS
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Reactivo para la determinación cuantitativa In Vitro de amilasa pancreática en suero, plasma u orina en
equipos fotométricos
Información de pedido
Nº de pedido Tamaño del envase
1 0551 99 10 021 R1 5 x 20 mL
+ R2 1 x 25 mL
1 0551 99 10 023 R1 1 x 800 mL
+ R2 1 x 200 m L
1 0551 99 10 930 R1 4 x 20 mL
+ R2 2 x 10 mL
Resumen
[1,2]
Las alfa amilasas son enzimas hidrolíticas que transforman el
almidón en maltosa. Las alfa amilasas del cuerpo humano
proceden de diferentes órganos: la amilasa pancreática se
produce en el páncreas y se elimina en el intestino, mientras que
la amilasa salival se sintetiza en las glándulas salivales y se libera
en la saliva. Dado que la amilasa pancreática y la amilasa salival
presentan una homología estructural del 97%, sólo se pueden
diferenciar adecuadamente con un test que utiliza dos anticuerpos
monoclonales para la inhibición de la amilasa salival. La amilasa
sanguínea se elimina a través de los riñones en la orina. Por tanto,
el aumento de la actividad de la amilasa en el suero se refleja en
el aumento de la actividad de la amilasa en la orina. La
determinación de la alfa amilasa en suero y en orina se realiza
principalmente para diagnosticar enfermedades pancreáticas y
detectar el desarrollo de complicaciones. En el caso de una
pancreatitis aguda, la actividad de la amilasa en la sangre
aumenta pocas horas después del inicio del dolor abdominal, llega
a su cota máxima después de aprox. 12 horas y vuelve a los
valores de referencia después de 5 días como máximo. Aunque la
amilasa pancreática es mucho más específica para detectar las
enfermedades pancreáticas que la amilasa total, se recomienda la
determinación adicional de la lipasa con el fin de confirmar una
pancreatitis aguda.
Método
Test enzimático fotométrico por el cual el sustrato 4,6-etilideno-
(G7)-p-nitrofenil-(G1)-alfa-D-maltoheptaosido (EPS-G7) de las alfa
amilasas se fracciona en distintos componentes. En un segundo
paso, éstas se hidrolizan con alfa glucosidasa, y se da lugar a la
formación de glucosa y p-nitrofenol [1,2]. La amilasa salival se
inhibe mediante dos anticuerpos monoclonales durante la fase de
preincubación, de forma que el aumento de la absorbancia indica
sólo la actividad de la amilasa pancreática en la muestra [3–5].
Principio
5 EPS-G7
+ 5 H
2
O < alfa-amilasa > 2 etilideno-G5
+ 2 G2PNP
+ 2 etilideno-G4
+ 2 G3PNP
+ etilideno-G3
+ G4PNP
2 G2PNP + 2 G3PNP + G4PNP + 14 H
2
O <alfa-glucosidasa > 5 PNP +14 G
(PNP = p-nitrofenol, G =glucosa)
Reactivos
Componentes y concentraciones
R1:
Amortiguadora Good pH 7,15 0,1 mol/L
NaCl 62,5 mmol/L
MgCl
2
12,5 mmol/L
alfa glucosidasa ≥ 2,5 kU/L
Anticuerpos monoclonales contra
la amilasa salival (ratón)
≥ 31 mg/L
R2:
Amortiguadora Good pH 7,15 0,1 mol/L
EPS-G7 8,5 mmol/L
Conservación y estabilidad de los reactivos
Los reactivos se pueden conservar a una temperatura de 2 a 8 °C
hasta el final del mes de caducidad indicado en el envase,
protegido de la luz y siempre que se evite la contaminación una
vez abiertos los frascos. ¡No se deben congelar los reactivos!
Advertencias y medidas de precaución
1. Puede producirse una actividad residual de la amilasa salival
de hasta el 3 %. En ocasiones muy raras, la actividad
extremadamente elevada de la amilasa salival puede
aumentar los valores de la amilasa pancreática. La saliva y la
piel contienen alfa amilasa. Por ese motivo, no se deben
pipetear nunca los reactivos con la boca, y es asimismo
preciso evitar que dichos reactivos entren en contacto con la
piel.
2. Los reactivos contienen azida de sodio (0,95 g/L) como
conservante No ingerir. Evitar el contacto con la piel y las
mucosas.
3. El reactivo 1 contiene material de origen animal. Tratar el
producto como potencialmente infeccioso según las
precauciones universales y la buena práctica de laboratorio.
4. Excepcionalmente pueden obtenerse valores erróneos en
muestras de pacientes con gammapatías [10].
5. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar
todas las medidas de precaución necesarias para la
manipulación de reactivos de laboratorio. Para un correcto
diagnóstico, se recomienda evaluar los resultados según la
historia médica del paciente, los exámenes clínicos así como
los resultados obtenidos con otros parámetros.
6. ¡Únicamente para el empleo profesional!
Eliminación de residuos
Obsérvese la normativa legal al respecto.
Preparación de los reactivos
Los reactivos son listos para usar.
Equipo adicional necesario
Solución de NaCl 9 g/L
Equipo usual de laboratorio
Muestras
Suero, plasma (heparina o EDTA) u orina
Estabilidad al almacenamiento [8]:
en suero/plasma: 7 días de 20 a 25 °C
7 días de 4 a 8 °C
1 año a –20 °C
en orina: 2 días de 20 a 25 °C
10 días de 4 a 8 °C
3 semanas a –20 °C
¡Congelar sólo una vez! ¡Desechar las muestras contaminadas!
Esquema de la prueba
Hay disponibles a petición aplicaciones para sistemas
automáticos.
Longitud de onda Hg 405 nm
Paso óptico 1 cm
Temperatura 37 °C
Método de medida Respecto blanco de reactivo
Blanco
Suero /
Plasma
Orina
Muestra
/Calibrador
- 20 µL 10 µL
Reactivo 1
1000 µL 1000 µL 1000 µL
Mezclar, incubar aprox. 3 min. y, a continuación, añadir:
Reactivo 2
250 µL 250 µL 250 µL
Mezclar, leer la absorbancia después de 2 min. y empezar a
cronometrar. Leer la absorbancia nuevamente después de 1, 2
y 3 min.
