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BD Salmonella Shigella Agar (agar SS) es un medio selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en especial los pertenecientes al género Salmonella, a partir de muestras clínicas.
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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PA-254047.06 Rev.: April 2013
BD Salmonella Shigella Agar (agar SS) es un medio selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en especial los pertenecientes al género Salmonella , a partir de muestras clínicas.
Método microbiológico. El agar Salmonella-Shigella es una modificación del agar citrato desoxicolato descrito por Leifson 1. Se le considera un medio moderadamente selectivo según el nivel de inhibición de los microorganismos gram positivos y Enterobacteriaceae diferentes de Salmonella y Shigella , que inhibe por contenido de sales biliares, verde brillante y citratos. En BD Salmonella Shigella Agar , la diferenciación de los organismos entéricos se logra mediante la incorporación de lactosa en el medio. Los organismos que fermentan lactosa producen ácido que, en presencia del indicador rojo neutro, propicia la formación de colonias de color rojo. Los organismos no fermentadores de lactosa forman colonias incoloras. Este último grupo incluye la mayoría de los patógenos intestinales, incluidas Salmonella y Shigella. El tiosulfato sódico y el citrato férrico permiten la detección de producción de ácido sulfhídrico, como lo demuestran las colonias con centros de color negro. Este medio se utiliza para el aislamiento primario de Salmonella a partir de muestras fecales humanas^2. Dado que existen medios más eficaces para el aislamiento de Shigella , no debe utilizarse para el aislamiento de este organismo 2-4.
BD Salmonella Shigella Aga r Fórmula* por litro de agua purificada Extracto de carne bovina 5,0 g Digerido pancreático de caseína 2, Digerido péptico de tejido animal 2, Lactosa 10, Sales biliares 8, Citrato sódico 8, Tiosulfato sódico 8, Citrato férrico 1, Rojo neutro 0, Agar 13, Verde brillante 0,330 mg pH 7,2 ± 0, *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
. Solamente para uso profesional. No utilizar las placas si muestran evidencia de contaminación microbiana, decoloración, deshidratación, agrietamientos o cualquier otro signo de deterioro. Consultar los procedimientos de manipulación aséptica, riesgos biólogicos y desecho del producto usado en el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO.
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 °C, envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelación y el
calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de incubación recomendados. Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos pueden usarse durante una semana siempre que se almacenen en un lugar limpio a una temperatura entre 2 y 8 °C.
Inocular muestras representativas con las cepas siguientes (para obtener los detalles, véase el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO ). Incubar las placas en condiciones aerobias a una temperatura entre 35 y 37 °C, por un período de 18 a 24 horas.
Cepas Resultados del crecimiento Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición de parcial a completa; colonias de color rojo carmesí con precipitación Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición completa. Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Crecimiento de bueno a excelente; colonias de color beige con centros blancos Shigella flexneri ATCC 12022 Crecimiento de adecuado a excelente; colonias de color de rosa claro a incoloras Sin inocular Rojo anaranjado, tono rosado
Materiales suministrados BD Salmonella Shigella Agar (placas Stacker de 90 mm). Controladas microbiológicamente.
Material no suministrado Medios de cultivo auxiliar, reactivos y el equipo de laboratorio que se requiera.
Tipos de muestras Se trata de un medio selectivo de diferenciación para el aislamiento de Salmonella a partir de muestras fecales o torundas rectales de pacientes en los que hay sospecha de una infección entérica bacteriana (véase también CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO ).
Procedimiento de análisis Extender las muestras tan pronto como sea posible después de recibirlas en el laboratorio. La placa de extensión se utiliza principalmente para aislar los cultivos puros de las muestras con flora mixta. Si, por el contrario, el material se cultiva directamente empleando una torunda, hacerla girar en una sección pequeña cercana al borde, extendiendo luego a partir de esta área inoculada. También debe inocularse un medio menos selectivo tal como BD MacConkey II Agar a fin de incrementar la posibilidad de recuperación cuando la población de microorganismos gram-negativos sea escasa y de proporcionar una indicación sobre otros microorganismos presentes en la muestra. Incubar las placas, protegidas de la luz, a una temperatura de 35 ± 2 °C durante un período de 18 a 24 h o durante más tiempo si es necesario.
Resultados En la tabla siguiente se indica la morfología característica de las colonias: Organismos BD Salmonella Shigella Agar E. coli Crecimiento ligero, color rosa o rojo Enterobacter/Klebsiella Crecimiento leve, color rosa Proteus Incoloro, con centros blancos Salmonella Incoloro, generalmente con centro de color negro Shigella Incoloro Pseudomonas Crecimiento leve e irregular Bacterias gram positivas Ausencia de crecimiento