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Microscopia
Los procesos tecnológicos han posibilitado la investigación cada vez más profunda de la materia viva y los procesos vitales. Por ello el microscopio que data de finales del siglo XVI, desempeño un papel fundamental contribuyendo a la elaboración de hipótesis y teorías que condujeron a duraderas polémicas.
El microscopio, es un instrumento óptico destinado a observar de cerca objetos extremadamente diminutos, la combinación de sus lentes produce el efecto de la que se mira, aparezca con dimensiones extraordinariamente aumentadas haciéndose perceptible lo que no lo es a simple vista.
- Objetivos
- Determinar el estudio de la microscopia
- Conocer las diferentes clases de microscopio
- Determinar las partes del microscopio
- Marco Teórico
_Microscopia: Es la exploración mediante el microscopio, de elementos pequeños que no son observables a través del ojo desnudo. La microscopia en cuanto ha permitido descubrir los microbios de las enfermedades infecciosas y conocer la intima estructura celular de los órganos y de los tejidos, ha proporcionado unos servicios extraordinarios al área de salud.
Microscopia óptica:
- Microscopio óptico compuesto.−
Sistema óptico
♦ OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo. ♦ OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta. ♦ CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
♦DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. ♦ FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Sistema mecánico
♦ SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. ♦ PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación. ♦ CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular,.. REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.
Manejo y uso del Microscopio Óptico
Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones.
- Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
- Para realizar el enfoque: Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
- Empleo del objetivo de inmersión:
- Bajar totalmente la platina.
- Microscopio de barrido con focal.−
Es un sistema relativamente nuevo se usa para estudiar la estructura de sustancias biológicas.
En este microscopio se utiliza un rayo láser de iluminación que es fuertemente convergente y por lo tanto produce un punto de barrido muy poco profundo. La luz que emerge del punto es dirigida a un tubo foto multiplicado, donde es analizada. Se utiliza un sistema de espejos para mover el rayo láser a través del espécimen iluminando un solo punto por vez.
Se registren los datos de cada punto y se guardan en una computadora, luego se puede llevar la información a un monitor de alta resolución para crear una imagen visual. Su ventaja es su capacidad de tomar imágenes de la muestra en cortes ópticos muy finos.
- Microscopio de luz ultravioleta.−
Se utiliza una fuente de luz ultravioleta y depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra. Sus resultados se registran fotográficamente.
No es posible examinar en forma directa el espécimen en el ocular, ya que la luz ultravioleta daña la retina.
Este método sirve para detectar ácidos nucleicos, específicamente bases puricas y pirimidicas del nucleótido.
También es útil para detectar proteínas que contienen ciertos aminoácidos.
- Microscopio de polarización.−
Es una simple modificación del microscopio óptico, pero el espécimen es atravesado por luz paralizada y se usa otro polarizador que se hace rotar para detectar la orientación molecular en muestra de tejidos.
Microscopía Electrónica:
- Microscopio electrónico de transmisión (MET).−
Se utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz visible para producir una imagen.
Los electrones deben pasar a través de la muestra y chocar luego con la placa fotográfica. La formación de la imagen en el microscopio electrónico depende del hecho de que algunos electrones no atraviesan el espécimen y en consecuencia, no llegan a la placa fotográfica, sino que experimentan una deflexión provocada por sustancias de alta densidad que encuentran normalmente en la muestra o han sido agregadas a ellas durante el proceso de fijación y tinción.
- Microscopio electrónico de barrido.−
En este los electrones no atraviesan la muestra en el proceso de formación de imágenes. En cambio, se explora la superficie de la muestra desplazando un haz de electrones, estos, al reflejarse de la superficie son recogidos por un detector y procesados de manera tal que puede verse en imagen tridimensional en una pantalla de televisión.
Partes de un microscopio:
1.− Pie o base ; da estabilidad
2.− Columna ; sirve para sostener las diferentes partes
3.− Platina ; allí se coloca el objeto que se quiere estudiar
4.− Carro ; colocado sobre la platina permite desplazar la preparación
5.− Brazo ; sirve para tomar el microscopio y se encuentran dos tornillos reguladores
6.− El tornillo macrométrico ; para efectuar movimientos verticales grandes que permiten un enfoque rápido
7.− El tornillo micrométrico ; permite movimientos lentos para afinar y precisar el enfoque
8.− El tubo ; esta unido al brazo, en su parte superior hay un orificio donde se coloca el ocular y en la parte inferior se encuentra el revolver
9.− Revólver ; donde van enroscados los objetivos
10.− Ocular , esta en la parte superior del tubo, cumple la función de aumentar la imagen
11.− Objetivos ; son una serie de lentes montados sobre cilíndricos de diferentes tamaños que se enroscan en el revólver
12.− Espejo ; permite dirigir la luz ya sea natural o artificial
13.− Condensador ; es un sistema de lentes situado debajo de la platina que permite variar la iluminación del campo y concentrar la luz sobre el objeto en observación
14.− Diafragma o iris ; es un disco situado en la parte inferior del condensador que regula la cantidad de luz
Mantenimiento y precauciones
Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
- No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
