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Una detallada descripción de las partes del microscopio óptico y de los sistemas ópticos adicionales, así como de su aplicación en la observación de tejidos y células. Además, se explica la resolución y la importancia de la apertura numérica, la refracción y la densidad en la obtención de imágenes claras y precisas. También se abordan los microscopios de contraste de fases, de interferencia, de campo oscuro, de fluorescencia, confocal y de polarización, así como la microscopía electrónica.
Tipo: Apuntes
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Histología apuntes: Semana 1: Concepto de histología: Estudio de los tejidos con base en su estructura. Si la función no está bien hay enfermedad Microscopía: Microscopio: Instrumento que amplifica la imagen y permite ver más detalles de los que se ven a simple vista. ¿Quién creó el microscopio? Anton leeuwenhoek Compuesto: Hans Lippershay y Zacharias Janssen Micro simple: una sola lente Micro compuesto: lentes múltiples. Sistemas del Microscopio: ➔ Mecánico: base, brazo o asa, revolver, platina, tubo, tornillos (macro y micrométricos) ➔ Óptico: ocular y objetivos ➔ Iluminación: condensador, diafragma, foco. Partes del microscopio:
● Diafragma: Regula la salida de la luz ● Condensador: Concentra la luz en la muestra ● Macrométrico: mueve la platina - micro- lo mismo pero más lento y justo ● Platina: Donde se coloca el portaobjetos ● Lente ocular: A través de la cual se puede examinar directamente la imagen formada por la lente objetivo. ● Lente objetivo: Para recoger la luz que ha atravesado la muestra. Características del microscopio: ➢ Poder de resolución: capacidad de un lente de microscopio o sistema óptico para obtener imágenes separadas de objetos que están muy cerca unos de otros. ➢ Aumento: Medida de la capacidad del microscopio de agrandar una imagen. ➢ Aumento vacío: Tope máximo que puede mejorar una imagen, por más que se aumente la calidad es la misma. -Conceptos- ❖ Tejido Blanco: Cancer, Morado en la muestra: muchos núcleos, Células blancas: Protegen ❖ La vista humana: .2 mm = 200 micras ❖ Apertura numérica: Ángulo de la luz que se forma entre el objetivo *entre más cerca está el objetivo más amplio su ángulo y mejor la resolución *entre más cerca esté el objetivo de la muestra mejor se ve ❖ Refracción: luz atraviesa un medio y cambia su dirección (a mayor índice de refracción mejor resolución)
-Microscopio de contraste de fases: ➔ Entre mayor densidad del tejido hay mayor refracción ➔ A mayor refracción hay mayor resolución ➔ áreas más oscuras=más densas ➔ Diafragma ranurado ➔ No tinción ➔ Trabaja con índices de refracción o sea densidad ➔ .5 micras -Microscopio ultravioleta: ➔ Resolución: .1 macrómeros ➔ función depende de la luz UV de la muestra ➔ útil para detectar ácidos nucleicos, bases de purina y pirimidinas ➔ luz UV= 200 nm ➔ Técnica de tinción de feulgen A MENOR LONGITUD DE ONDA MEJOR RESOLUCIÓN -Microscopio confocal de barrido: ➔ MO de campo claro mezclado con un sistema de barrido para diseccionar una muestra ópticamente ➔ 3 dimensiones ➔ 2 lentes ➔ Resolución .2-.5 micras ➔ sistema de iluminación láser ➔ imagen 3D ➔ fotomultiplicador -Microscopio de polarización: ➔ MO campo claro con un polarizador- lente medio oscuro que hace la luz menos brillosa y más nítido ➔ se añade “analizador” -Microscopía electrónica: ➔ MET y MEB ➔ ventaja: la longitud de onda del ME es 2,000 veces menor que el haz de un MO- aumenta su resolución.
◆ MET: microscopio electrónico de transmisión ● utiliza un haz de electrones en vez de uno de luz ● mejor para organelos ● áreas oscuras son electrodensas ● RT: .05nm ● RP: 1nm ◆ MEB ● imagen 3D ● se ve el volumen ● lámpara de tungsteno -membrana plasmática- ➔ Se ve con el MET ➔ Espesor de 8-10 nm ➔ doble capa de lípidos ➔ mosaico fluido ➔ Anfipática: parte hidrófila y parte hidrófoba ➔ Hecha de fosfolípidos, colesterol y proteínas ➔ Superficie extracelular ◆ glucocaliz: cubierta celular de la superficie ● glucoproteínas:hidratos de carbono y proteínas ● glucolípidos:hidratos de carbono y lípidos ➔ Balsas lípidas: ◆ Microdominios que controlan el movimiento o distribución de las proteínas dentro de la bicapa lípida ● altas concentraciones de colesterol y glicoesfingolípidos ◆ 2 tipos de balsas ● planas: ● caveolas: puntos de infección ➔ Tinción: metales pesados -RER- ➔ Tiene membrana ➔ se ve con el MET/también el óptico= ergastoplasma ➔ basófilo
➔ funciones: ATP/energía ➔ participa en la cadena de transporte de electrones en la cara interna ➔ interface ➔ 2 membranas: ◆ interna: impermeable: cardiolipina ◆ externa: permeable ➔ Partes: ◆ matriz ◆ crestas ◆ gránulos ◆ ribosomas -Endosoma- ➔ Tempranos: reciclar y clasificar proteínas ➔ Tardíos: convierten el hidrasa Vías ligado-receptor:
➔ utiliza histoquímica enzimática para la tinción ➔ .2 a .5 micras ➔ contiene peroxidasas: catalasa: desintoxica al alcohol. jllñs Capítulo 3: -Núcleo Celular- -Fundamentos del núcleo- Núcleo: Compartimento limitado por una membrana, el cual contiene un genoma (inf genética) en las células eucariotas. ¿Qué contiene el núcleo? ➔ Información genética ➔ Maquinaria para la duplicación del ADN y transcripción y el procesamiento del ARN Interfase: periodo de la célula en la que NO está dividiéndose Partes del núcleo:
◆ Cromatina Marginal: periferia del núcleo ◆ Cariosomas: cuerpos discretos de cromatina de tamaño y forma irregular *En todo el núcleo ◆ Cromatina asociada al nucleolo Predomina en células metabólicamente inactivas, como linfocitos pequeños circundantes y en los espermas, células plasmáticas. *heterocromatina: se tiñe con H & E, se observa bien con técnica de feulgen y con colorantes fluorescentes vitales. ➔ Eucromatina: Dispersa ◆ *Tinción más clara y está activo ◆ dentro del nucleoplasma entre la hetero y alrededor de ella ◆ puede leerse y transcribirse ◆ presente en células activas como neuronas y hepatocitos -Nucleosoma- Complejos macromoleculares de ADN e histonas, unidad más pequeña de la estructura de la cromatina. Características: ➔ Miden 10 nm de diámetro. ➔ Son el primer nivel de plegado de la cromatina ➔ Se forman por enrollamientos de la molécula de ADN alrededor de un núcleo proteínico. Composición: ➔ Centro del nucleosoma: ◆ Octámero : ocho moléculas de histonas, por la cual el ADN gira 2 veces extendiéndose entre cada partícula. Cuentas de collar: subestructura nucleosómica de la cromatina. Fibrilla de cromatina (30 nm): larga hebra de nucleosomas que se enrollan. ➔ Dominios de bucles: segmentos de fibrilla organizados, anclados en el armazón cromosómico o matriz nuclear. -Cromosomas-
*Cuando las células están en divisón, la cromatina se condensa y se organiza en cromosomas ➔ Formado por 2 cromátidas unidas al centrómero ➔ Área en cada extremo es el telómero (se acortan en cada división) Células somáticas: ➔ 46 cromosomas en 23 pares homólogos (22 autosomas y 1 sexual) Células sexuales ➔ 23 cromosomas 46: diploide 23: haploide Corpúsculo de Barr: cromosoma X reprimido en el núcleo en interfase, heterocromatina adyacente al núcleo. ¿Cómo se observan los cromosomas? Microscopio de fluorescencia con el método de hibridación in situ con fluorescencia. -Nucléolo- Sitio donde se produce la síntesis del ARNr y el armado inicial de los ribosomas. ● NO tiene membrana ● Rodea los genes de ARNr ● Algunas células tienen más de 1 ● Se tiñe con H&E 3 regiones
1. Centros fibrilares: contienen bucles de cromosomas diferentes (13,14,15,21 y 22) con genes de ARNr, ARNp y factores de trascripción 2. Material fibrilar (pars fibrosa): contiene genes ribosomales en proceso de transcripción activa y grandes cantidades. 3. Material granular (pars granulosa): representa el sitio del armado ribosómico inicial y contiene partículas pre-ribosómicas densamente compactadas.
-Transporte núcleo - citoplasma- Moléculas grandes:
○ células epiteliales y los fibroblastos del revestimiento de la mucosa del tubo digestivo. -Ciclo celular- Controla el crecimiento y la división celular. Interfase: crecimiento continuo de la célula
➔ Cada cromosoma se alinea a lo largo del ecuador del huso mitótico ➔ separación de cromátidas hermanas-2 células hijas con 23 cromosomas c/u Entrecruzamiento: consiste en el intercambio de segmentos de cromátidas entre el par de cromosomas homólogos. Muerte celular. puede presentarse como resultado de una lesión celular o de un programa de suicidio programado. ➔ Necrosis: muerte accidental, se presenta cuando la célula está expuesta a un entorno físico o químico desfavorable ➔ Apoptosis: muerte celular programada, independientemente del mecanismo desencadenante, células innesesarias son eliminadas-autodigestión.