1. Materiales Necesarios
Cebolla fresca (colocada en agua unos días antes para que crezcan raíces).
Microscopio óptico.
Portaobjetos y cubreobjetos.
Ácido clorhídrico (HCl) 1N (para ablandar los tejidos).
Colorante: Orceína A y B, o Acetocarmín (para teñir los cromosomas).
Pinzas, bisturí o tijeras.
Papel absorbente.
Mechero de alcohol (opcional, para fijación térmica).
2. Procedimiento Paso a Paso
Paso A: Preparación de la Raíz
1. Corta unos 2-3 mm del extremo final de las raíces más blancas y sanas. Es
fundamental que sea la punta, ya que ahí es donde ocurre la división celular.
2. Coloca las puntas en un vidrio de reloj con unas gotas de HCl 1N durante unos 5
a 10 minutos. Esto disuelve la pectina que mantiene unidas a las células,
permitiendo que se separen luego.
Paso B: Tinción
1. Traslada las raíces a un portaobjetos limpio.
2. Cúbrelas con el colorante (Orceína). Si usas Orceína A, puedes calentar
suavemente el portaobjetos sobre la llama del mechero (sin que llegue a hervir)
para que el tinte penetre mejor.
3. Deja actuar el colorante durante unos 5-8 minutos.
Paso C: Técnica del "Squash" (Aplastamiento)
1. Coloca el cubreobjetos sobre la raíz teñida.
2. Pon un trozo de papel absorbente sobre el cubreobjetos.
3. Presiona firmemente con el dedo pulgar hacia abajo, sin desplazar el vidrio
lateralmente. El objetivo es que la raíz se extienda en una sola capa fina de
células.
3. Observación al Microscopio
Al mirar por el ocular, busca primero con el objetivo de menor aumento (4x o 10x) para
localizar la zona donde las células estén mejor esparcidas. Luego, cambia a 40x o 100x
(con aceite de inmersión si es necesario) para identificar las fases:
