Corriente de Na+ y K+, Diapositivas de Fisiología

¡Descarga Corriente de Na+ y K+ y más Diapositivas en PDF de Fisiología solo en Docsity!

EL RESURGIMIENTO DE LA CORRIENTE DE SODIO Y

FORMACIÓN DE POTENCIAL DE ACCIÓN EN NEURONAS

CEREBELOSAS DISUELTAS DE PURKINJE

Indira M. Raman y Bruce P. Haba

Andrea sosa Barrios

Daniela Mignon Varona

neuronas de Purkinje in vivo (caracteristicas)

disparo espontáneo regular

la formación de "picos complejos"

tras la estimulación de las fibras trepadoras

pueden depender propiedades intrínsecas

de la membrana de las neuronas de

Purkinje.

también se observan potenciales de

acción multicapa en células

cultivadas de Purkinje en ausencia

de fibras trepadoras u otra entrada

sináptica

MATERIALES Y METODO

1.-Preparación de células

neuronas de Purkinje y CA

aisladas enzimáticamente a

partir de cerebelo de rata e

hipocampo

técnicas de

disociación

establecidas en el

laboratorio



Diseccionó en una solución de disociación oxigenada enfriada con hielo que contenía (en mM)

Na2SO4, 30 K2SO4, 5 MgCl2, 10 HEPES, 10 glucosa y rojo de fenol al 0,001%,



pH 7,4 con NaOH

Las células piramidales CA3 se identificaron sobre la base de su morfología piramidal.

Las células de Purkinje se identificaron por su gran diámetro y forma de pera característica

debido al muñón de la dendrita apical.

2.-Técnicas de grabación…

Se llenaron pipetas de borosilicato (1-5 MV) con una solución interna que

contenía (en mM) 117 CsCl, 9 EGTA, 9 HEPES, 1.8 MgCl2, 14 Tris-creatina

PO4, 4 MgATP y 0.3 Tris-GTP, tamponada a pH 7.4 con CsOH.

Se aplicó una solución externa de control que contenía (en mM) 50 NaCl,

110 TEA Cl, 2 BaCl2, 0,3 CdCl2, 10 HEPES, tamponado a pH 7,4 con NaOH,

a través de tubos de flujo a la celda fijada por voltaje.

RESULTADOS

Se estudiaron las corrientes de sodio en las neuronas

de Purkinje disociadas mediante las características de

las corrientes de sodio convencionales provocadas por

despolarizaciones únicas

Las corrientes de sodio en las células

de Purkinje se activaron e inactivaron

ligeramente más rápido que las

corrientes en las neuronas CA3.

C , Conductancia pico (círculos rellenos) y curvas

de inactivación de estado estacionario (círculos

abiertos) para las celdas mostradas en A..

CORRIENTES TRANSITORIAS DE SODIO EN LAS NEURONAS

PURKINJE Y CA3.

A , Las corrientes evocadas desde un potencial

de retención de 290 mV

B , relación corriente-voltaje para las corrientes

máximas en A. L

Imagen 1

A , Corriente de sodio resurgente máxima

Dependencia de voltaje de la corriente

de sodio resurgente

B , constantes de tiempo de subida (tiempo

hasta el pico) y de decaimiento para las

corrientes de sodio resurgentes.

.Corriente de sodio resurgente después

de breves pasos a 130 mV.

Figura 8. Potenciales de acción de

disparo espontáneo y conglomerado en

células de Purkinje aisladas de forma

aguda

A , Posibles potenciales de acción

espontáneos

en una celda aislada de Purkinje.

B , respuestas de voltaje de un Purkinje

Para determinar si la corriente de sodio

resurgente se activó durante

la forma de onda del potencial de acción del

conglomerado, utilizamos la forma de onda

como voltaje de comando.

Es posible comparar el tamaño de la

corriente de sodio

provocado por el potencial de acción

conglomerado con el flujo de

la corriente iónica global.

Si la corriente entre los picos en las

neuronas de Purkinje corresponde

a la corriente resurgente, puede

estar asociado con la inactivación

Examinamos la extensión

de inactivación después del primer

pico de la acción del conglomerado

potencial y probado si hubo

recuperación de la inactivación

entre el primer y segundo pico.

Inactivación y recuperación de la corriente de Na1 durante el

conglomerado

potencial de acción

A, Respuestas de una célula de

Purkinje evocadas por el

protocolo de voltaje mostrado.

REFERENCIAS

Bell CC, Grimm RJ (1969) Discharge properties of Purkinje cells recorded

on single and double microelectrodes. J Neurophysiol 32:1044–1055.

Brown A, Schwindt P, Crill W (1994) Different voltage dependence of

transient and persistent Na1 currents is compatible with modal-gating

hypothesis for Na1 channels. J Neurophysiol 71:2562–2565. Cardozo DL,

Bean BP (1995) Voltage-dependent calcium channels in rat midbrain

dopamine neurons: modulation by dopamine and GABAB receptors. J

Neurophysiol 74:1137–1148. Cepeda C, Chandler SH, Shumate LW,

Levine MS (1995) Persistent Na1 conductance in medium-sized

neostriatal neurons: characterization using infrared videomicroscopy and

whole-cell patch-clamp recordings. J Neurophysiol 74:1343–1348. Crill WE

(1996) Persistent sodium current in mammalian central neurons. Annu

Rev Physiol 58:349–362. Demo SD, Yellen G (1991) The inactivation gate

of the Shaker K1 channel behaves like an open channel blocker. Neuron

7:743–753. Eccles JC, Llina´s R, Sasaki K (1966) The excitatory synaptic

action of climbing fibers on the Purkinje neurons of the cerebellum. J

Physiol (Lond) 182:268–296. Eccles JC, Ito M, Szentagothai J (1967) The

cerebellum as a neuronal machine. Berlin: Springer

Resurgent%20Sodium%20Current%20and%20Action

%20Potential%20Formation%20in%20(1).pdf