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“ AÑO DE LA RECUPERACIÓN Y CONSOLIDACIÓN DE LA ECONOMÍA PERUANA”
UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
TEMA:
EXTRACCIÓN DE ADN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
ASIGNATURA:
BIOLOGÍA MOLECULAR
DOCENTE:
ZELADA FERIA, WALTER
INTEGRANTES
1. MONTERO LUNA, GALO
2. MONTESINOS DEL AGUILA, NICOL
3. MORALES MEDINA, DAYANA
4. PALACIOS CABRERA, BARHEN
5. PALACIOS CESPEDES, JAIRO
6. PEREZ RAMIREZ, ADRIANA
7. QUITO ANCAJIMA, ANNGI
8. RAMOS VARGAS, ARIANA.
GRUPO N° 2 - MESA 2
2025
1. CUESTIONARIO
Leer cuidadosamente las siguientes preguntas y responder utilizando fuentes bibliográficas confiables.
1. ¿Cuál es el objetivo principal de la etapa de lisis celular en la extracción de ADN?
El objetivo principal de la etapa de lisis celular en la extracción del ADN es romper la membrana celular y nuclear para liberar el contenido interno de la célula, incluyendo el ADN. Esta etapa permite que el ADN quede accesible para ser aislado del resto de los componentes celulares, como proteínas, lípidos y otros orgánulos.
2. Menciona dos aplicaciones biomédicas del ADN extraído mediante estas técnicas.
Estas técnicas transforman una muestra biológica en datos cuantitativos o cualitativos sobre mutaciones o niveles de patógenos, fundamentales para diagnóstico, pronóstico y seguimiento terapéutico como:
● Detección de mutaciones en BRCA1 y BRCA2:
El ADN extraído se amplifica por PCR y luego se secuencia para identificar mutaciones puntuales en estos genes. Esto permite evaluar el riesgo genético de desarrollar cáncer de mama u ovario.
● Cuantificación de carga viral de VIH:
Se extrae ADN a partir de linfocitos infectados y se utiliza PCR para medir la cantidad de copias del ADN proviral del VIH. Esto ayuda a monitorear la progresión de la enfermedad y la eficacia del tratamiento antirretroviral.
3. ¿Por qué el uso de detergentes y enzimas es crucial en la etapa de lisis celular?
El uso de detergente y enzimas es crucial en la etapa de lisis celular porque facilita la ruptura de las membranas celulares y la liberación del contenido intracelular, incluyendo ADN. El detergente rompe la membrana y libera el adn y las enzimas limpian la muestra y protege el adn liberado para que se pueda trabajar (como el ADN en una extracción).
5. Explica cómo el cambio de pH permite la elución del ADN purificado en los métodos basados en columnas.
En los métodos que usan columnas con membranas de sílica, el ADN se pega a la columna cuando el pH es bajo y hay muchas sales. Esto pasa porque los grupos del ADN y de la sílica interactúan mejor en esas condiciones. Pero cuando se quiere sacar el ADN, se cambia el pH a uno más alto (usando, por ejemplo, agua MilliQ o un búfer TE con pH mayor a 6). Ese cambio hace que el ADN ya no se quede pegado y se libera, permitiendo recogerlo en una solución limpia.
6. Describe cómo la extracción de ADN puede contribuir al diagnóstico molecular de enfermedades genéticas.
La fibrosis quística (FQ) es una enfermedad genética autosómica recesiva causada por mutaciones en el gen CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), ubicado en el cromosoma 7. Este gen codifica una proteína que regula el transporte de cloruros y sodio en las membranas celulares, y su mal funcionamiento provoca acumulación de moco espeso en pulmones, páncreas y otros órganos.
El diagnóstico molecular de esta enfermedad comienza con la extracción del ADN a partir de células obtenidas comúnmente de una muestra de sangre o saliva. Una vez extraído el ADN, se analiza mediante técnicas como la PCR y la secuenciación del gen CFTR para identificar mutaciones específicas, como la ΔF508, que es la más común.
● Detectar estas mutaciones permite:
⇾ Confirmar el diagnóstico clínico en pacientes con síntomas. ⇾ ⇾ Realizar pruebas de portadores en familiares. ⇾ ⇾ Hacer diagnóstico prenatal si ambos padres son portadores. ⇾ ⇾ Seleccionar terapias específicas, como moduladores de CFTR, en función del tipo de mutación.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
- Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 3rd ed. Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2001.
- Ivanova NV, Dewaard JR, Hebert PD. An inexpensive, automation-friendly protocol for recovering high-quality DNA. Mol Ecol Resour. 2006;6(4):998–1002.
- • Tan SC, Yiap BC. DNA, RNA, and protein extraction: the past and the present. J Biomed Biotechnol. 2009;2009:574398.
- Orphanet. Fibrosis quística [Internet]. Paris: INSERM; 2023 [citado 2025 Abr 8]. Disponible en: https://www.orpha.net/consor/cgi-bin/OC_Exp.php?Lng=ES&Expert=
- Orphanet. Fibrosis quística [Internet]. Paris: INSERM; 2023 [citado 2025 Abr 8]. Disponible en: https://www.orpha.net/consor/cgi-bin/OC_Exp.php?Lng=ES&Expert=
