Jimena: El primer paso es preparar el reactivo de trabajo, en donde se necesitan 5 volúmenes de R1,
(Buffer alcalino), y 1 volumen de R2 (Ácido pícrico). En este caso preparamos para todos los equipos, así
que combinamos 15 partes de R1, con 3 partes de R2
Oscar: El siguiente paso es programar la cubeta a 37 grados para que se caliente, ya que este es un
proceso tardado.
Jimena: El paso 3, es hacer la punción de sangre venosa, y próximamente poner el tubo en la centrifuga
a 250 rpm por 3 minutos para así conseguir el suero.
Oscar: Después, colocaremos 50 microlitros de suero con ayuda de una pipeta automática en un nuevo
tubo.
Oscar: Y pondremos el espectrofotómetro en cero, con el blanco de reactivo a 510 nm.
Jimena: El paso 7 Será agregar 1000 microlitros o 1 mililitro de reactivo de trabajo a los tubos, se mezcla
e inmediatamente se pone en la cubeta a baño maría a 37 grados por 60 segundos
Oscar: Después de 60 segundos exactamente, lo colocamos en el espectrofotómetro, leemos y
anotamos la absorbancia 1.
Jimena: Transcurridos los 60 segundos de la absorbancia 1, volvemos a colocar por 60 segundos a baño
maría, colocamos en la muestra en el espectrofotómetro otra vez y leemos la absorbancia 2.
Oscar: Luego calculamos. ∆ABS/MIN restando Absorbancia 2 – Absorbancia 1, que en nuestro caso es
0.041 menos 0.033, dándonos un valor de 0.008.
Jimena: El valor de la creatinina desconocida es comparando su cambio de absorbancia con el estándar
desconocido.
Mg/dl=∆ABS (desconocido) x concentración de estándar (mg/dl)
∆ABS (estándar)
Sustituyéndolo se vería como en la imagen y el resultado sería ----- por lo que está dentro de los valores
-----
