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Asignatura: Citogenètica, Profesor: Joan Blanco, Carrera: Genètica, Universidad: UAB
Tipo: Apuntes
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Durante la fase S ocurre la replicación, lo que implica la reproducción cromatídica. Además se produce el intercambio de cromátidas hermanas. Durante la replicación, se va rompiendo la molécula de DNA con el objetivo de relajar la estructura (helicasas y topoisomerasas). Tras su actuación, la mayoría de veces se unen las cadenas tras el corte de manera normal, pero a veces la cadena vieja se une a la que se está sintetizando de nuevo. Esto implica una reorganización de cromátidas homólogas, con secuencias idénticas, por lo que no se producen cambios y no afectan la viabilidad celular. Al final hay dos moléculas dobles que tienen algunas monocadenas con regiones nuevas y viejas. Si en condiciones experimentales se elimina la timina y se las sustituye por 5 bromodesoxiuridina, los fragmentos nuevos tendrán este compuesto. Si volvemos a cultivarlas, todas incorporarán este compuesto en lugar de timina. Al final de todo el proceso, se observan cromátidas monosustituidas y otras disustituidas, que se tiñen de distintos colores (blanco y negro). Si no hay intercambio, una cromátida sería negra y otra blanca, de lo contrario, tendrán 4.1. EL CICLE CEL·LULAR
ambos colores. A este tipo de cromosomas que tienen una cromátida ‘’negra’’ y otra ‘’blanca’’ los llamamos: cromosomas arlequinados.
Su estructura es en forma de anillo que puede abrirse y cerrarse gracias a estas dos proteínas localizadas en el dominio globular. Las cohesinas se colocan y se cierran al final de la fase G 1 uniendo así las cromátidas hermanas. Permanecerán cerradas a pesar de que en la G 2 se produzca la replicación del DNA. Hasta anafase varía la cantidad de cohesinas dependiendo de la especie tratada. En humanos, entre G 2 y metafase-‐anafase se pierde cohesividad que queda reducida solo a la región pericentromérica. En la transición entre la fase G 2 y la fase M, se activa la MPF (kinasa dependiente de ciclina) y que actúa fosforilando las condensinas haciendo que se activen, esto provoca una condensación del DNA. Una vez rota la lámina nuclear, los microtúbulos se unen a los cinetocoros de forma aleatoria. Los microtúbulos de van poli y despolimerizando hasta que ‘’pesca’’ un cromosoma, una vez unido deja de polimerizar y puede pasar dos cosas: o que se estabilice la unión, o que se rompa esta unión por haberse unido de manera incorrecta. MPF también tiene otras dianas haciendo que se provoquen cambios en el citoesqueleto, rotura de la lámina nuclear… C) Unión de los microtúbulos a los cinetocoros: tipos de orientaciones. Existen cuatro posibilidades de orientación: A) Sintética : Todos los microtúbulos provienen del mismo polo. B) Merotélica : Unión al azar de microtúbulos a los dos cinetocoros. C) Monotélica : Todos los microtúbulos de la derecha se unen al cinetocoro de la derecha o a la inversa. D) Amfitélica o bipolar : Los de la derecha se unen a la derecha y los de la izquierda a la izquierda. Esta combinación es la única compatible con la mitosis.
D) Segregación amfitélica o bipolar. La unión de los microtúbulos no está regulada, por lo que se puede dar cualquier combinación. Solo cuando todos estén unidos de forma amfitélica se dará la anafase. En esta fase, participa la proteína Aurora quinasa. Esta proteína estará presente en la región cinetocórica y su función es la de romper las uniones de los microtúbulos al cinetocoro cuando la fuerza de unión no sea homogénea. Cuando hay equilibrio de fuerzas, es decir, existe una unión amfitélica, Aurora lo detecta y se inactiva quedando así el cromosoma con las uniones estabilizadas. En metafase, los cromosomas están todos alineados en la placa metafásica con una unión amfitélica de los microtúbulos manteniendo así una unión estable por el equilibrio de fuerzas. En la transición de metafase a anafase, se activa MPF que activa a APC, una fosfatasa que actúa como factor de iniciación de la anafase. Su objetivo son las separasas cuya actividad está regulada por las securinas. APC destruye las securinas, lo que provoca que la separasa se active actuando estas sobre las cohesinas, más concretamente en Scc 1. Esto impide que se mantenga cerrado el anillo de cohesinas lo que permite que las cromátidas se separen. NOTA: la separasa solo actúa sobre las cohesinas peri y centroméricas. Existen varios puntos de control a lo largo del ciclo celular, además es importante que las cohesinas se mantengan hasta que todos los cromosomas estén alineados. Existe el punto de control del huso mitótico. Si un cromosoma no está en equilibrio de fuerzas , se libera la proteína Mad 2 actuando estas sobre los centrómeros modificándolos. Si no existe equilibrio de fuerzas, Mad2 actúa contra APC impidiendo que este se active e inactivando así la segregación de cromátidas. Protecció vers Aurora B/Ipl