Espectroscopía Molecular: Absorción UV-Vis - Prof. Carga, Diapositivas de Química Clínica

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C U R S O : Q U Í M I C A A N A L Í T I C A

I N S T R U M E N TA L

P R O F E S O R A : D R A. D E L I A W H U

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN

MOLECULAR V- UV

INTERACCIÒN DE LA RADIACIÒN CON LA

MATERIA

La muestra se estimula aplicando E ( calor, energía eléctrica, luz, reacción química ). El analito se encuentra en su estado basal energéticamente Al aplicarle un estimulo hacen que las especies del analito sean excitados y pasen a niveles energéticos superiores. Esta respuesta se mide por medio de la absorbancia o tramitancia. Los resultados se expresan cualitativamente mediante un espectro.

• ESPECTRO DE EMISIÒN

• (^) 1.- Espectro de líneas ( emisión atómica) En la región UV-Vis son producidas por partículas atómicas en fase gaseosa produciendo espectros de líneas bien definidas.

• (^) 2.- Espectro de bandas ( moléculas) Las bandas es el resultado de numerosos niveles vibracio- nales que se sobreponen en el nivel energético del estado fundamental de una molécula.

ABSORCIÒN DE LA RADIACIÒN

De acuerdo a la teoría cuántica, los átomos, moléculas ò iones tienen una cantidad limitada de niveles de E discretos. Para que haya ABSORCIÒN de la radiación , la E del fotón excitado debe corresponder exactamente con la diferencia de E entre el estado fundamental y uno de los estados excitados de la especie adsorbente. Siendo única para cada especie.

• (^) METODO ESPECTROFOTOMETRICO UV-V

Es un método analítico que tiene como propiedad

fisicoquímica de absorber la radiación molecular

UV : 200 – 400 nm V : 400 – 800 nm

Aplicaciones:

• Det. Iones metálicos y

complejos de elementos de transición ( Ni +2, Cu +2,

Cr207).

-Complejos de transferencia de carga.

Fe( II – 1,10 Fenantrolina , Fe(III)- tiocianato).

• Campos: Clínico, Forense, medio ambiente.

METODO DE ABSORCIÒN ATÒMICA

Método que tiene

la

propiedad fisico quìmica

absorción atòmica de la r

radiaciòn

E

Espectrofotómetro de AA

METODO DE ESPECTROMETRIA DE EMISIÒN ATÒMICA Partes de espect. EA ESPECTROFOTOMETRO DE EMISIÒN ATÒMICA Método que tiene la propiedad de medir la emisión de la radiación atómica.

Absorción inducida por un campo magnético

Cuando los electrones del núcleo de ciertos elementos están sometidos a un fuerte campo magnético. La diferencia energética entre los estados inducidos y las transiciones entre los estados solo al adsorber radiaciones de baja frecuencia, onda de radio (30 – 500 MHZ) que actúa sobre el núcleo. Espectroscopia RMN.

ESPECTROSCOPÌA DE RMN

Método que tiene la propiedad físico químico de absorber energía de radiofrecuencia por un núcleo atómico. APLICACIONES

• Aplicación en In- agroin- dustria alimentaria Anàlisis cuantitativo de agua pesada Elucidaciòn de estructu- estructuras moleculares Espectrómetro de RMN

2.- Relajación por fluorescencia

La fluorescencia y fosforescencia son procesos de emisión La especie excitada por un haz de luz , produce el fenò- meno de absorción. La emisión se produce al regresar a su estado fundamental presentando una frecuencia mas baja ( desplazamiento de Stokes ).

ESPECTROSCOPÌA DE FLUORESCENCIA/FOSFOR.

Es un método que tiene la propiedad de absorber

energía radiante y emitirla.

Aplicaciones:

• (^) Antigenos virales , genoma viral , detecciòn de tumores , detecciòn de lesiòn inicial de caries.

METODOS DE ABSORCIÒN

Cuando un rayo de luz de una determinada longitud

de onda de intensidad ( lo ) incide

perpendicularmente sobre una disolución que

contiene cromòforo , el compuesto absorberá una

parte de la radiación incidente ( I a ) y dejará pasar

el resto ( l t ).

Io = Ia + It

TRAMITANCIA (T)

Es la relación entre la cantidad de luz trasmitida que

llega al detector una vez que ha atravesado la

muestra ( It ) y la cantidad de luz que incidió sobre

ella ( Io ) y se representa en %

%T = It / Io x 100

ABSORBANCIA ( A ) Es la cantidad de luz absorbida por la muestra y se define como el logaritmo de 1/T. A = log 1/T = - log T = - log lt / l o Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales Io = It T = 100% Indicando que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda y entonces : A = log 1 = 0 La cantidad de luz absorbida dependerá de la sustancia que atraviesa la luz atreves de la solución del cromoforo y de la concentración.