¡Descarga Asimetría y fluidez de las membranas: Propiedades lipídicas y proteicas - Prof. Bañuelos C y más Apuntes en PDF de Biología Celular solo en Docsity!
ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS
‐Toda célula está delimitada/limitada por una membrana, la membrana plasmática. Separa/mantiene y comunica dos medios diferentes, citoplasma y medio extracelular.
‐ Células procarióticas sólo presentan la membrana plasmática. Células eucarióticas ,sin embargo , tienen el citoplasma dividido en compartimentos denominados orgánulos celulares delimitados por una o varias membranas, membranas citoplásmicas o membranas de tal o cual orgánulo. Separan, mantienen y comunican dos medios diferentes: Citosol e interior (matriz o lumen de los
orgánulos correspondientes)
‐Debido al escaso grosor de las membranas éstas solo fueron visualizables a MET a partir de los 1950´s. ‐ En micrografías electrónicas tanto de células eucarióticas como de procarióticas toda membrana ofrece una imagen similar: Una banda más clara entre dos obscuras, más densas a los electrones. Esta imagen común es el reflejo de una estructura/composición común
‐Las células son sistemas termodinámicamente abiertos, es decir intercambian materia y energía con el medio. Las membranas como barreras selectivas de
permeabilidad están implicadas en el transporte selectivo de compuestos. Además las membranas participan en la captación y transducción de señales del medio y son la sede de procesos implicados en la conversión energética como fosforilación oxidativa (respiración celular) y fotofosforilación (fotosíntesis).
‐La membrana plasmática participa en la adhesión/unión a otras células y/o a la MEC
‐Toda membrana está estructurada en base a una bicapa lipídica con proteínas, unas insertadas en esta bicapa y otras adheridas a ella ( integrales y periféricas ). Las membranas presentan asimetría y fluidez
Biología Celular e Histología D 2011-12. Biológicas UCM. M. Bañuelos Calvo
Div
disti se co qued sino relat insa ejem inter La la co com situa físic
versidad.
intos tipos onstata un da patentiz o también e tiva o porc aturados fo mplo, desd rna mitoco a dieta y la omposició mposición l aciones: V ca, en la pe
. Si se ana s de célula na gran var zada no só en los lípi centaje de ormando p de un 10% ondrial. as condici ón lipídica lipídica de Variacione ermeabilid
aliza la com as y dentro riedad de ólo en dive idos partic e cada uno parte de lo en la mem
ones fisio a de las me ebe de ten es en la flu dad a ione
mposición o de cada t lípidos. L erso porce culares que o de esos lí os lípidos d mbrana de
ológicas y embranas ner implica uidez de la es inorgáni
n lipídica p tipo la de La diversid entaje de p e forman c ípidos. La de membr e mielina h
ambiental de ciertas aciones fu as membra icos de pe
particular las memb dad de líp proteínas e cada mem a proporció ana varía hasta un 5
les pueden células. E ncionales anas, en su equeño tam
de membr branas de l idos de m en relación mbrana y e ón de ácid considera 50% en la
n inducir a Estas varia en la may u estabilid maño
ranas de los orgánu membranas n a lípidos n la cantid dos grasos ablemente; membrana
a variación aciones en yoría de la dad mecán
ulos s s, dad
; por a
n en n la as nica o
2.- F
Tod pola anfip entre Las
estas con con bioló
Formaci
dos los líp ar/hidrofíli páticos o s es sí a trav colas tien
s bicapas el que int las de la o ógica, es l
ión de bi
idos de m ica y una c sometidos vés de fue nden a asoc
las cabeza eraccionan otra. Esta t la clave po
icapas li
membrana s cola larga s a fuerzas erzas electr ciarse entr
as hidrofíl n y las cad tendencia or la que fu
ipídicas
son anfipá hidrocarb s contrapu roestática re sí debid
licas de ca denas hidr a formar fueron evolu
áticos: Pre bonada ap uestas. Las s y de pue do a fuerza
ada capa se rocarbona bicapas es utivamente
esentan un olar/hidro s cabezas t entes de hi as hidrófo
. Un el p de b . Es esta más los mem que hidr volu acom 20 a e orientan das de una s de capita seleccionad
na cabeza ofóbica. En tienden a i idrógeno y obas y de v na forma d problema e bicapas li sta estructu able o ener s favorable lípidos qu mbranas b e sus caden rocarbona uminosas modarse e a 200 Å de n hacia el m a capa inte al importa dos para for
n agua son interaccio y con el ag van der W de solucio es la forma pídicas ura es la m rgéticame e para ue forman biológicas nas adas son m para en micelas e calibre. medio acu eraccionan ancia mar membr
n nar gua. Waals. onar ación
más nte
las dado
muy
s de En uoso n
ranas
3.- L
Lo están se es pres bidi
-Ver ener
- La de la apre pare que la qu refle alto, valo bica
Las bica
os lípidos n en conta scapan o s sentan mov imensiona
r movimie rgéticamen a fluidez v as cadena etada hace ecido a la d las bicapa ue se da es eja el grad , 40ºC p.ej or de la Tm apa lipídic
apas lipíd
que se ma acto con e se desligan vilidad, di ales
entos perm nte desfav iene deter as hidroca que la flu de la marg as tengan u sa transici do de fluid j., implica m de -15 ºC a pase a g
dicas son
antienen c l medio ac n de la bic ifusión lat
mitidos (ro vorables (“ rminada po arbonada uidez dism garina. Po una estruc ión se den dez de una a que por d C signific gel. En este
n un flui
ohesionad cuoso por capa pero teral : las
otación sob “flip-flop” or el grado as de los lí minuya has r el contra ctura o fas nomina Tm a bicapa o debajo de a que hay e segundo m b u l m T u p
idos bidi
dos por fue ambas ca las molécu bicapas li
bre su eje ”) (Figura o de empa ípidos. Un sta adquiri ario un gra se más flui m o tempe de una me esa T la b que desce o caso se tr más fluida
- La fluide bicapa o d una conse lipídica p mayoría d Tm es má usualment parte, de f
imension
erzas no c aras. Los lí ulas indiv pídicas so
y difusión adjunta, B aquetami na compac ir una estr ado de com ida, más lí eratura d embrana. U bicapa está ender hast rata de una a que en e ez y el val de cada me ecuencia d particular de las mem ás bajo que te las célu forma que
nal
covalentes ípidos ind viduales y on fluidos
n lateral) B) iento o com ctación mu ructura o f mpactació íquida. La e transici Un valor d á en fase d ta ese pun a bicapa m el primero. lor de la T embrana e de la com r. Para la in mbranas el e la T a la ulas de las e son fluid
y que in v dividuales de cada lí
y
mpactaci uy densa o fase de gel ón menor h a temperat ión de fas de Tm mu de gel. Un to la T par muchísimo . Tm de cada es obviam posición nmensa l valor de que viven que form as a esa T
vivo no ípido
ón o l hace tura a e y uy
ra la o
a mente
su n an T
- La Al a dism sería un c ácid C, 1 Do hidr Con
cade exte cole mita fluid la flu aum com
- El e de c perm
- La orga Una ciert Esto dism form
-La que cond conf
a longitud alargarse a minuye la f an inestab compromis dos grasos 8C y 20C obles enla rocarbonad ntribuyen,
enas hidro erior u orie esterol tien ad más int dez en esta uidez de l mentar su e mpuestos d efecto net células an meabilida
capacida anismos o a forma de to rango, l o se puede minuyendo mar parte d
existencia ésta es ne diciona la formación
de las ca aumenta la fluidez. L les por ex so entre es que form C. ces en con das que di por lo tan
ocarbonada entada hac nde a dific terior o ha a zona. El la membra estabilidad de pequeño to del cole imales a l ad de la m
ad de regu células, c e consegui las temper e consegui o la longitu de sus lípi
a de mecan ecesaria pa a fluidez d n necesario
denas hid a interacci as cadena xcesivamen stos dos ex an los lípi
nformació ificultan la nto, a aume
as de lípid cia la supe cultar la in cia el núcl anillo pla ana ya que d mecánica o tamaño y esterol a l las T fisio membrana
ular la flu omo micr r que la m raturas es r, por ejem ud de la ca dos.
nismos de ara su func de las pro os para el
drocarbon ión entre e as muy cor nte fluidas xtremos p idos de las
ón cis intr a interacci entar la flu
dos a las q erficie. La nteracción leo hidróf ano y rígid e tiende a c a o física y ya que tap las cantid ológicas es a y hace a
uidez de la roorganism membrana variar la c mplo, aum adena hid
e regulació cionamien oteínas de funcionam
nadas de l ellas y el g rtas por el s. Las mem para mante s membran
oducen to ión entre e uidez y a d
-El co compl memb memb anima cantid cabeza con el fosfolí hidrof plana que tiende cadena hi de las cad fobo de la do contribu compactar y a dismin pona los re dades en la s que dism a éstas físi
a membra mos, plant conserve composici mentando e rocarbona
ón de la flu nto. La flu membran miento de
los lípidos grado de co contrario, mbranas b enerse esta nas son m
rsiones en ellas y su e disminuir
lesterol a leja a la f brana. Re brana plasm ales está pr dades. El g a polar hid grupo car ípido. El a fóbico, tien rígida y qu a agregar idrocarbon denas hidr bicapa y, uye, por e rlos en su nuir la perm esquicios e as que fig minuye la icamente
ana es mu as y anim su fluidez ón lipídica el grado de ada de los
uidez de la uidez de la na. Puede a muchas p
s influye e ompactac , por deba biológicas ables y flu mayoritaria
n las caden empaqueta la Tm.
afecta de f fluidez de ecordemos mática de resente en grupo –OH drofílica, i rbonilo, = anillo, apo ne una con queda rode en su mit nada corta rocarbonad por lo tan el contrario mitad sup rmeabilida entre los f gura en la a fluidez y más estab
uy importa males poiqu z al bajar, a de sus m e instaura ácidos gra
as membr a bicapa l afectar los proteínas d
en la fluide ión, con lo ajo de 12C han adop uidas: Los amente de
nas amiento.
forma la s que en la membran n grandes H, la peque interaccion C=O, de u olar e nformació eado de tad más a y flexible das en su nto, ament o, a dismin perior, a ad a fosfolípido as membr y la bles.
ante para uilotermos dentro de membranas ción o asos que v
ranas sugie lipídica s cambios de membra
ez: o que C, tado
16
a nas
eña na un
ón
e del
tar la nuir
os. anas
s. un s
van a
ere
de ana
Se flop El hidr lo qu
Si may estru Ti trans Pe In
e genera e ” contribu l colestero rofílica ( -O ue en este
bien la bi yoría de su uctural de ipos de pr sversales eriféricas ntegrales :
en el RE y uye a mant ol → distr OH) es mu e caso sí ha
B.- P
icapa lipí us funcion ella. roteínas d -1, 2 y 3- : Solubiliz Solibiliza
y Golgi, lu tenerla ibución pa uy pequeñ ay movim
ROTE
dica es ba nes son atr
de membr y anclada zables con ables al de
ugar de su
arecida en ña en relac miento “flip
EÍNAS
ase estruc ribuibles
rana : Peri as a lípidos n alta fuerz esintegrar l
u síntesis. L
n ambas m ción al res p-flop”.
DE M
ctural de t a las pro
féricas ( 7 s –5 y 6- ) za iónica. la bicapa l
La ausenc
monocapas to de la es
EMBR
toda memb teínas que
7 y 8 ) e in
lipídica co
cia de mov
s. La cabez structura q
RANA
mbrana la in e forman p
ntegrales (
on ciertos
vimiento “
za polar e que apolar
nmensa parte
detergent
“flip-
r por
tes
1- P
- So unid puen
- Se regi prot med
- So la m cate Pu Prot Seña conf
- Lo frag
- La solu . Si u . Si . Si v
2.- P
- La prec cale iónic Las no t ancl
- Par polia dete Dad nega
Proteína
on proteína das a la car ntes de H unen a ca iones E ó teínas que dio acuoso on más ab membrana ninas. ueden esta teíntirosín alamiento funden con os eritroci mentos de a alta fuer ubilizar las utilizamos fragmento vesículas
Proteína
a mayoría ciso desint ntando la cos fuerte proteínas transversa ladas a líp ra aislar u acrilamida ergente se do que en p ativa emig
s perifér
as que se s ra E o P d y fuerzas abezas hi P de otra en su con o extracelu undantes y el citoes
ar implicad n kinasas a celular). E n la matriz itos se lisa e membran rza iónica s proteínas s células e os de mem membran
as integr
a de prote tegrar la b suspensió es como SD s así solub ales otra s , idos ). unas de ot a ( PAGE llevan a u presencia gran hacia
ricas
solubiliza de la bicap electroest idrofílicas as proteín njunto son ular o intra s en la car squeleto c
das tambié asociadas a En el lado z extracelu an en un m na plasmá debe ten s periféric enteras → mbrana →P osas inver
rales: Sol
eínas de m bicapa lipí ón de fragm DS ( dode bilizadas , unidas co
tras se rec E ) en prese un gel de p de SDS la el polo po
an a alta fu pa por fuer táticas ). s de lípido as integra globulare acelular. ra P. Aquí omo, por
én en la tra a los recep o E son me ular. medio hip ática, vesíc er acceso as: Periférica Periféricas rtidas → P
lubilizac
membrana ídica solub mentos de ecil sulfato son de do ovalentem
curre a la encia de S poliacrilam as proteína ositivo y s
fuerza ión rzas no co
os de la bi ales de me es e hidrof
í pueden a ejemplo, a
ansducció ptores de c enos abun
potónico y culas al re a la cara
as cara E s de amba Periféricas
ción y ai
a no se sol bilizando e membran o sódico ), os tipos: I mente a alg
técnica de SDS. Mue mida y se s as solubili se separan
ica (0,3M valentes y
icapa ( ca embrana. E fílicas ya q
actuar de p ankirina, t
ón de señal citoquinas ndantes y e
y pueden o vés o al d a correspo
as caras, E s cara P
slamient
lubilizan los lípidos nas en pre o no ióni ntegrales gún lípido
e electrofo stras de la someten a izadas pre n unas de
M KCl, p.e y no hidró
ara E ó P En genera que están
proteínas-e talina, dist
ales como, s (Tema de en la práct
obtenerse derecho ondiente p
E y P
to
a alta fue s. Esto se esencia de icos como s transver de membr
oresis en g a suspensi a un campo sentan car e otras en
ej.) al esta fobas (
) y/o a al se trata d expuestas
eslabón en trofina y
por ejemp e tica se
fácilmente
para
erza iónic consigue e detergen Tritón X- rsales una rana (
gel de ón tratada o eléctrico rga neta función d
r
de a un
ntre
plo,
e
ca. Es
ntes
as y
a con o.
de su
3.- I
So ) la b Tr
Integral
on proteína bicapa lip ransversa
les transv
as integral ídica. Está ales unipa
versales
les que atr á, por lo ta aso
raviesan u anto, parc
Exist transve membr activida Aparato Atrav sus extr distinta hacia e por lo t domini y P. La regi mayori proyect bicapa; bicapa Las re ha glo po tra po hid mi
L de un de glu pu qu pro ca pu G pro est
una (unipa ialmente e
en múltipl ersales un rana del er ad Proteín o de Golg viesa una v remos N y as proteína l medio ex tanto, en e os: Transv
ión Tm : α taramente tadas haci unen, ins vía fuerza egiones E acia medio obulares , or el extrem avés de ell or fuerzas drógeno c isma topol
La región e la membr nidas cova e oligosacá ucoproteí ueden pres ue estabiliz oteína. En denas de o uentes disu Glucofori oteína tra tudiada.
aso ) o múl embebidas
les ejempl nipaso : Gl ritrocito, R ntirosín kin i, etc. vez la bica y C, de lon as, uno hac xtracelular estas prote versal o tr
α-Hélice d e con cade a el núcle sertan y m as hidrófob y P dado o acuoso so de longitu mo N ó C las estas pr electroestá on proteín logía.
n E de las p rana plasm lentement árido, es d ínas. Tamb entar puen zan la con n la región oligosacár ulfuro. ina ( Figur ansversal u
ltiples vec s en la bic
los de pro lucoforina Receptores nasa ), enz
apa lipídic ngitud var cia el cito r ( E ). Ca eínas tres r ransmemb
de uno 20- enas latera o hidrófob mantienen l bas y de v que están on hidrof ud variabl según los roteínas p áticas y pu nas perifér
proteínas mática pue te una o va decir puede mbién en es ntes disul nformación n P no cabe ridos unid
ura) de erit unipaso b
ces ( multi capa.
teínas a de de la s-PTK (co zimas del
ca y proye riable segú sol ( P ) y abe disting regiones o rana ( Tm
-30 aa les apolar bo de la la hélice a van der Wa proyectad fílicas y le y forma s casos. A pueden uni uentes de ricas de la
transversa eden tener arias cade en ser ste caso furo, -S-S n de la e encontra as ni tamp
trocitos es bien
ipaso
on
ecta ún las y otro guir, o m ), E
res
a la aals. das
adas
irse
a
ales r nas
S- ,
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una
Es a tra prof tamb prot Gluc Tra At se in inse cana trim desd bact Es
sta proteín avés de la fusamente bién prese teína perif cofonina d nsversale traviesan l nsertan en rción a tra ales iónic méricas que de hace tie teriorhod stas proteí
na está form cual se in glucosila enta puent férica Band de la mem es multipa la bicapa l la membr avés de β - os, superf e tienen pa empo y qu dopsina. nas consta
mada por serta en la ada con 16 es disulfu da 4,1 que mbrana. aso lipídica m rana a trav láminas. E familia de arecido es ue se toma
an de tanta
un total d a bicapa. S 6 cadena d uro. A trav e actúa de
múltiples ve vés de mú Ejemplos Receptore structural c a como eje
as α-hélice bi el α- L re tr re en pa
m ba m P co tr ce
de 131 aa (^) s Su región de oligosac vés de esta eslabón e
eces. En la últiples α -h de T. mul es de seña con otra p emplo cara
es como n icapa y va l caso de l -hélices, c Lo mismo c eceptores a riméricas. egiones E n términos ara las uni La bacter membrana acterias, e multipaso: formadas omo una b ransportan elular
de los qu E, hasta e cárido unid región P, entre el cit
a mayoría hélices, au ltipaso: Tr ales asocia roteína tra acterístico
número de arias regio a bacterio cuatro regi cabría dec asociados Para las h y P de est s generale ipaso. riorhodop plasmátic es una prot Siete α-hé s por lazos bomba de ndo proton
ue 36 form el aa 73, es das covale , más corta toesquelet
a de los ca unque hay ransporta ados a prot ansversal m o, la
e veces atr ones o dom orhodpsina iones E y cir del al s a proteína hélices y p tas proteín es lo mism
psina , pre ca de un gé teína trans élices y la s entre las H+^ activad nes hacia e
man un α-h stá entemente a, se une a o y la prop
sos conoc y casos de adores , teínas G muy cono
raviesan la minio E y P a siete otras cuat uperfamil as G para las nas cabe d mo que diji
esente en l énero de sversal s regiones hélices. A da por la l el exterior
hélice
e y a la pia
cidos
ocida
a P. En
tro P. lia de
ecir imos
a
s E y Actúa luz
α-H
cana
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o má
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que
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com
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o ha
) Las
Unió
un g
Hélices tam ales por los nsporte ). E ás α-hélice s deben de parte hidrof ofóbico de los aminoá ona hidrofó bre del can aas polares
bién son de
Proteína
as proteína ponente lip féricas. Co acia el citos s proteínas ón covalen glucolípido,
mbién pued s que pasa En el caso es. Dado q e ser anfip fófica, a tra la bicapa ácidos con óbica y los nal vendría s cuyas ca
eterminant
as integ
as integrale pídico de l omo éstas e sol, P, son s integrales te al fosfol , luego nec
den formar an por difus de los can ue el cana páticas: En avés de la ( Figura ). n cadenas polares en determina adenas late
tes de la e
rales no
es no trans a bicapa. E están total globulares s no transv ípido Gluc cesariamen
r poros o c sión distint nales iónico al hidrofílico n parte hidr que intera Estas héli laterales a n la superf ado por el erales se p
especificida
o transve
sversales e Este factor lmente pro s e hidrofíl versales d cosil fosfati nte orienta
canales ión tos compu os éstos e o está conf rofílicas, la accionan y ces están apolares se ficie hidrofí número de proyectan h
ad del cana
ersales
están unida r es lo que oyectadas icas. Unida e la cara E dil inositol ado hacia la
nicos y otro estos ( Ve stán confo formado p zona orien se unen a construida e sitúan es ílica. Muy i e hélices q hacia el la
al.
as covalen las defere hacia el m as a GPI ( E presentan ( GPI ) ( F a cara E. E
os tipos de er Tema de ormados po or esas hé ntada al ca l núcleo as de forma stratégicam importante ue le confo luz del can
ntemente a encia de la edio extrac Glucosil fo n este tipo Figura ).Se Estas prote
e el or cinco élices anal, y
a tal mente en e, el orman y nal. Éstos
algún s celular, E, osfatidil ino o de anclaje e trata de eínas se
ositol e:
solu
Fosf
fosfa
lípido
Inte
Se
a un
el ot
Eje
en la
bilizan tras folipasa C. ato y inosit
o residual,
egrales no e trata de p n ácido gra tro, estas p emplos de a transducc
s tratar cél Esta fosfo tol, con lo q
, fosfatidil,
o transve proteínas in so o a un g proteínas n este tipo d ción de se
ulas entera olipasa est que la prot
permanec
ersales un ntegrales n grupo pren no son solu de proteína ñales quím
as o prepa tablece un teína se de
ce en la bic
Ejempl Fosfatas superfic
nidas a á no transve nílico, deriv ubilizables as : Proteí micas y la P
araciones d corte hidro esliga de la
capa.
os de prot sa alcalina ie de cierto
cidos gra rsales de t vado de iso por Fosfo nas Ras y Proteíntiro
de membra olítico ( Fig a membran
eínas ancl y otras hid o tipo de cé
asos o a g topología P opreno. Ta lipasa C proteínas sín kinasa
anas aislad gura ) entre na y se sol
ladas de to drolasas p élulas.
grupos pr P unidas co anto en un
G triméric Src.
das con e el grupo lubiliza y e
opología e resente en
renílicos ovalentem n caso com
cas implica
l
: n la
ente mo en
das
6- Proteínas y asimetría de las membranas
Las proteínas también contribuyen a la asimetría de la membrana. Esta contribución es
mucho más obvia y mas fácil y directa de visualizar que la de los lípidos. Las proteínas
periféricas de la cara E son obviamente diferentes de las periféricas con topología P. Lo
mismo cabe decir respecto a las proteínas ancladas a lípidos. Unas ancladas a GPI son
de topología E y otras distintas de topología P se anclan vía grupos acilo o prenílicos.
Respecto a las proteínas transversales son ”per se” asímétricas dado que la región o
dominio(s) E son diferentes a lo(s) P. En el caso de la membrana plasmática y de los
orgánulos que pertenecen a la vía secretora-endocítica cabe añadir que las
glucoproteínas orientan siempre su región glucosilada hacia la cara E.
La topología ( y por lo tanto la asimetría de la membrana en relación a las proteínas ) de
las proteínas se genera, para la inmensa mayoría de ellas, al ser sintetizadas sobre la
membrana del RE.
Conservan la misma topología porque son transportadas la membrana desde su lugar
de síntesis por transporte vesicular en el que se conserva la topología de la membrana.
Finalmente, se mantiene la topología porque el movimiento “flip/flop” está
energéticamente “prohibido” ya que supondría que un dominio o la proteína completa
globalmente hidrofílico tendría que atravesar el núcleo hidrófobo de la bicapa.
7.-Fluidez de las membranas y difusión lateral de proteínas
Debido a las bicapas lipídicas las membranas son un fluido bidimensional. Dado que las
proteínas están unidas a los lípidos no resulta difícil imaginarlas presentando los mismos
movimientos que los lípidos: el rotatorio sobre su eje perpendicular al plano de
la bicapa y el de difusión lateral.
El movimiento “flip/flop” es energéticamente mucho más desfavorable que para los
lípidos dado toda una proteína o dominios de ella, en conjunto hidrofílicos, deberían
atravesar el núcleo hidrófobo de la bicapa.
La función de muchas proteínas de membrana depende de su interacción con otra(s)
proteínas(s) de membrana. En algunos casos esto se facilita por el hecho de estar
asociadas formando complejos pero en otros es necesario que las proteínas colisionen
( p.ej., en la cadena respiratoria, en el caso de receptores de señales químicas con otras
proteínas de membrana implicadas en la transducción de señales ) y esto requiere que
presenten difusión lateral.
Biología Celular e Histología D 2011-12. Biológicas UCM. M. Bañuelos Calvo
De
hete
móv
Me
difus
fotob
la pr
y el á
distr
irrev
zona
tección
erocarión y viles se me
ediante otr sión de pro blanqueam roteína en área de la ribuye hom versibleme a pequeña
n de la
tras incub ezclarán las
ro método oteínas par miento ( FR cuestión fl superficie mogéneame nte la flore ( fotoblanq
movilid
bar un ciert s florescen
podemos e rticulares: RAP, de “flu uorescent celular do ente ) pres escencia a queamient
dad de p
to tiempo a ncias por to
estimar la Recuperac uorescenc emente a t onde se loc sentará flor continuac to ) y medi
proteín
a 37ºC si la oda su sup
velocidad ción de la f e recovery través de u calice la pr rescencia v ión median mos la rec
as Un e resp de m cons hete prod dos d otra las p Prev marc mem hum unido rhod y los antic flore verd desp fluor limita un h as proteína perficie.
de difusión fluorescen y after phot un anticue roteína ( to verde. Se d nte un haz cuperación
experiment ponderse s membrana siste en ge erocarión, c ducto de la distintas, u de ratón, y proteínas s vio a la fus can las pro mbrana de mana con a os covalen damina, flu s de ratón c cuerpos un esceína, flu de. Inmedia pués de la rescencia r arán cada hemisferio d as en cues
n o el coef ncia tras tobleachin rpo unido oda la supe destruye de láser u n de la
to clásico p i las proteí son móvile enerar un célula fusión de una human y comprob se mezclan ión se oteínas de la célula nticuerpos ntemente a orescente con nidos a uorescente atamente fusión la roja y verd una a del stión son
ficiente de
g” ). Marca a fluoresce erficie si se
una
para ínas es
otras na y bar si n.
s a rojo,
e
e se
amos eína e
