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Espectroscopia de Fluorescencia Objetivos :

• Obtener los espectros de absorción, fluorescencia y excitación de un colorante orgánico en solución acuosa.
• Determinar la concentración de quinina de agua tónica comercial
• Obtener los espectros de fluorescencia y excitación del compuesto [Eu(phen) 2 (H 2 O) 2 ]Cl 3 en estado sólido. Procedimiento experimental: Colorantes orgánicos en solución

1. Registre el espectro de absorción del colorante rodamina b entre 250-800 nm.
2. Registre el espectro de fluorescencia (emisión) de 250 nm hasta 700 nm utilizando como longitud de onda de excitación el valor máximo de absorción.
3. Registre el espectro de excitación entre 4 50 y 650 nm utilizando como longitud de onda de excitación aquella del máximo de fluorescencia obtenida en el apartado anterior.
4. Superponga los espectros de excitación y fluorescencia. ¿Por qué la banda de fluorescencia está situada a mayores longitudes de onda que la banda de absorción?. Determinación de concentración de quinina en agua tónica comercial Se realizó una curva de calibración a partir de una serie de disoluciones patrón de quinina en H 2 SO 4 0.05 M. Se obtuvo el espectro de emisión de la quinina barriendo desde 360 nm a 600 nm, utilizando una longitud de onda de excitación de 350 nm.

Quinina

Concentración de quinina (ppb) Señal de emisión 0.1 53. 0.5 59. 1 67. 3 121. 5 162. 7 196. 10 256. 30 585. 50 793. 0 10 20 30 40 50 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 y = 15,293x + 71, Intesidad de emision (u.a.) R² = 0, Concentracion de quinina (ppb)

Quinina (ppb) = señal de emisión - 71.

¿Por qué no se utilizó HCl como ácido para diluir las soluciones de quinina? ¿Qué interferentes podría contener el agua tónica comercial en la determinación de quinina? [Eu(phen) 2 (H 2 O) 2 ]Cl 3 en estado solido

1. Registre el espectro de fluorescencia (emisión) de 550 nm hasta 700 nm utilizando como longitud de onda de excitación 370 nm.
2. Registre el espectro de excitación entre 4 00 y 60 0 nm utilizando como longitud de onda de excitación aquella del máximo de fluorescencia obtenida en el apartado anterior.

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   Rodamina b [Eu(phen) 2 (H 2 O) 2 ]Cl 3 

400 450 500 550 600 650 700

0 50 100 150 200 250 300 350 400 Intensidad (u.a.) Longitud de onda (nm) Emision Excitacion Rodamina B 560 580 600 620 640 660 0 100 200 300 400 500 Emision (u.a.) Longitud de onda (nm)