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fecundacion equinodermos, Apuntes de Biología

fecundacion equinodermos documento para las practicas

Tipo: Apuntes

2018/2019

Subido el 11/05/2019

manu999-3
manu999-3 🇪🇸

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Fecundación en equinodermos
El objetivo de esta actividad es observar el proceso de fecundación.
Marco teórico:
En los organismos con reproducción sexual el óvulo es fecundado por el
espermatozoide formándose el cigoto, a partir del cual se originará el nuevo
individuo. La contribución de los gametos masculino y femenino al cigoto es
muy diferente; el óvulo aporta tanto su conjunto haploide de cromosomas
como un rico citoplasma que posee los requerimientos necesarios para que,
al menos, se inicie el desarrollo. El espermatozoide, sin embargo,
principalmente aporta su núcleo y escasos componentes citoplasmáticos
(centriolos).
El proceso de fecundación comprende una serie de sucesos que en la mayor
parte de los organismos puede resumirse en: ·
Activación del espermatozoide (capacitación), que ocurre en respuesta a las
secreciones del oviducto (fecundación interna) o al contacto con el medio
acuoso (fecundación externa).
Reacción acrosómica que permite que el espermatozoide se abra paso a
través de las distintas cubiertas que posee el óvulo hasta la membrana
plasmática.
Fusión de las membranas plasmáticas del espermatozoide y del óvulo.
Bloqueo de la polispermia para evitar que un mismo óvulo sea fecundado
por más de un espermatozoide.
Continuación de la meiosis en caso de que el óvulo expulsado del ovario se
encuentre detenido en alguna de las fases del proceso meiótico (en
humanos se encuentra en metafase II, mientras que en equinodermos ya ha
finalizado la meiosis).
Fusión de los pronúcleos, formándose un núcleo diploide de fecundación, o
bien los cromosomas maternos y paternos se ordenan directamente sobre
la placa ecuatorial en la primera división de segmentación.
Activación metabólica del huevo y comienzo del desarrollo.
Los equinodermos se usan habitualmente en estudios de biología del
desarrollo ya que sus gametos se obtienen en grandes cantidades, pueden
ser inseminados fácilmente in vitro (en medio acuoso donde la fecundación
ocurre de forma natural) y también son sencillos de mantener en el
laboratorio. Además, la fecundación en equinodermos y en mamíferos tiene
muchos puntos en común.
Tras la fecundación comienza el proceso de segmentación. En
equinodermos se habla de una segmentación holoblástica radial, esto es,
todo el embrión se divide y los planos de división son perpendiculares unos
a otros. Las dos primeras divisiones del cigoto y los blastómeros son
meridionales, si bien perpendiculares entre sí, lo cual significa que el surco
de división se forma desde el polo animal al polo vegetativo del embrión. La
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Fecundación en equinodermos

El objetivo de esta actividad es observar el proceso de fecundación.

Marco teórico:

En los organismos con reproducción sexual el óvulo es fecundado por el espermatozoide formándose el cigoto, a partir del cual se originará el nuevo individuo. La contribución de los gametos masculino y femenino al cigoto es muy diferente; el óvulo aporta tanto su conjunto haploide de cromosomas como un rico citoplasma que posee los requerimientos necesarios para que, al menos, se inicie el desarrollo. El espermatozoide, sin embargo, principalmente aporta su núcleo y escasos componentes citoplasmáticos (centriolos). El proceso de fecundación comprende una serie de sucesos que en la mayor parte de los organismos puede resumirse en: · Activación del espermatozoide (capacitación), que ocurre en respuesta a las secreciones del oviducto (fecundación interna) o al contacto con el medio acuoso (fecundación externa). Reacción acrosómica que permite que el espermatozoide se abra paso a través de las distintas cubiertas que posee el óvulo hasta la membrana plasmática. Fusión de las membranas plasmáticas del espermatozoide y del óvulo. Bloqueo de la polispermia para evitar que un mismo óvulo sea fecundado por más de un espermatozoide. Continuación de la meiosis en caso de que el óvulo expulsado del ovario se encuentre detenido en alguna de las fases del proceso meiótico (en humanos se encuentra en metafase II, mientras que en equinodermos ya ha finalizado la meiosis). Fusión de los pronúcleos, formándose un núcleo diploide de fecundación, o bien los cromosomas maternos y paternos se ordenan directamente sobre la placa ecuatorial en la primera división de segmentación. Activación metabólica del huevo y comienzo del desarrollo. Los equinodermos se usan habitualmente en estudios de biología del desarrollo ya que sus gametos se obtienen en grandes cantidades, pueden ser inseminados fácilmente in vitro (en medio acuoso donde la fecundación ocurre de forma natural) y también son sencillos de mantener en el laboratorio. Además, la fecundación en equinodermos y en mamíferos tiene muchos puntos en común. Tras la fecundación comienza el proceso de segmentación. En equinodermos se habla de una segmentación holoblástica radial, esto es, todo el embrión se divide y los planos de división son perpendiculares unos a otros. Las dos primeras divisiones del cigoto y los blastómeros son meridionales, si bien perpendiculares entre sí, lo cual significa que el surco de división se forma desde el polo animal al polo vegetativo del embrión. La

tercera división, en cambio, es perpendicular a las dos anteriores, ecuatorial, determinando un embrión de ocho células de idéntico tamaño. A partir de este momento, las subsiguientes divisiones originarán blastómeros de diferente tamaño, definiéndose éstos como macrómeros, mesómeros y micrómeros, cuya disposición en relación a los polos del embrión determinará finalmente el destino de dichas células y la posterior formación de las tres hojas embrionarias principales: endodermo, ectodermo y mesodermo, respectivamente.

Desarrollo:

1.- Obtención de gametos

  • Inyectar a través de la membrana oral (peristoma, zona oral) 1 ml de 0, M de KCl en agua de mar (Figura 2.B).
  • Colocar el espécimen sobre un recipiente de vidrio que contiene unos ml de agua salina sobre la cara aboral, lado puesto a la zona oral.
  • Pocos minutos después aparece un líquido espeso en la cara aboral, donde se localizan los gonoporos. Si el líquido es blanquecino se trata de esperma, mientras que si es rojizo corresponde a óvulos (no existe forma alguna de distinguir los sexos por caracteres externos) (Figura 2.C y 2.D).
  • Observar al microscopio en vidrios de reloj el aspecto y movimiento de óvulos y espermatozoides recién eyaculados y después de diluir con agua (1:10). Los espermatozoides sólo adquieren movilidad después de contactar con el agua salina. IMPORTANTE: NO UTILIZAR EL MISMO MATERIAL DE VIDRIO NI PLÁSTICO PARA ÓVULOS Y ESPERMATOZOIDES.

Resultados:

embargo, los porcentajes de metamorfosis nunca fueron tan altos como los obtenidos con pulsos cortos de exceso de K+ de 100 mM. Los datos de inducción a la metamorfosis obtenidos con exceso de K+ mostraron que las tres especies de erizos de mar estudiadas, S. franciscanus, S. purpuratus y Lytechinus pictus, son inducidas a la metamorfosis por la presencia de un exceso de K+. La respuesta dependió de la concentración y la duración de la exposición. La exposición continua a un exceso de K+ de 100 mM indujo la metamorfosis en el 100% de las tres especies de erizos probadas, pero más del 90% de las larvas que sufrieron metamorfosis murieron después de 24 h de exposición continua a la solución. Aunque el exceso de K+ es un inductor efectivo para las tres especies analizadas, este se vuelve tóxico para las larvas durante exposiciones prolongadas. Los porcentajes de metamorfosis en presencia de exceso de potasio siempre fueron más altos que los obtenidos en presencia de una biopelícula de la diatomea béntica N. inserta. La falta de respuesta a la película de diatomeas puede deberse al poco tiempo que se dió a la diatomea, en asociación con las bacterias apropiadas, para desarrollar una película en las cajas de Petri de depósitos múltiples. Es bien conocido que las larvas de erizos de mar son inducidos a la metamorfosis en presencia de películas microbianas formadas con hasta 75 días de antelación (Pearce y Scheibling, 1991) “Se ha propuesto que el exceso de potasio (K+) induce a la metamorfosis por la despolarización de las células excitables más externamente accesibles (Baloun y Morse, 1984; Yool et al., 1986; Carpizo-Ituarte y Hadfield, 1998), presumiblemente las que cuentan con receptores externos para inductores de la metamorfosis (Hadfield et al., 2000). Sin embargo, en la mayoría de los experimentos llevados a cabo por distintos autores, incluyendo el presente estudio, todas las larvas se sumergen en agua de mar con altas concentraciones de potasio y este ión puede estar actuando en todo el sistema nervioso, además de las células quimiosensoras (Todd et al., 1991). Resultados recientes del efecto del K+ y el Cs+ en el nudibranquio Phestilla sibogae por Hadfield et al. (2000) sustentan la hipótesis de que el K+ actúa a partir de las células sensoriales primarias las cuales poseen los receptores para inductores a la metamorfosis. Sin embargo, un efecto simultáneo del ión en las células sensoriales primarias y, al mismo tiempo, en otras células es aún una posibilidad que debe ser aclarada. Aunque aún no comprendemos el mecanismo por el cual el exceso de K+ induce la metamorfosis en algunas larvas de invertebrados marinos, este representa una herramienta útil para inducir la metamorfosis de manera sincronizada en las especies de erizo de mar en condiciones de cultivo, y para investigar las rutas de transducción y expresión genética involucradas durante la metamorfosis de equinodermos.” Bibliografía: Induction of metamorphosis with KCl in three species of sea urchins and its implications in the production of juveniles. http://www.redalyc.org/pdf/480/48028204.pdf Protocolo del test de toxicidad de sedimentos marinos con larvas del erizo de mar Paracentrotus lividus (Lamarck, 1816). http://www.azti.es/rim/wp- content/uploads/2014/01/revista_marina_11.pdf

Fecundación en equinodermos. Desarrollo temprano del erizo de mar. https://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/Descargas/gu ion_practica5.pdf Desarrollo en equinodermos. http://www.unioviedo.es/morfologia/asignatu/biologia/embriologia/Library/Eq uinodermos.htm Fecundación in vitro. https://issuu.com/esterastur/docs/lafecundacioninvitro