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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA CLÍNICA
NOMBRE: Diana L. Jerves G. CURSO: P FECHA: 27/05/
- TEMA: Flebotomía (técnica de extracción de sangre)
2. OBJETIVOS:
2.1.OBJETIVO GENERAL:
- Determinar todos los pasos que se deben seguir para conseguir una buena técnica de extracción de sangre.
2.2.OBJETIVO ESPECÍFICO:
- Observar al microscopio todas las estructuras sanguíneas presentes.
3. MARCO TEÓRICO:
FLEBOTOMÍA
El término “flebotomía” es usado para describir una incisión realizada a la vena por motivos diversos.
La flebotomía consiste en la extracción de sangre desde una vena periférica a través de un sistema estéril como es una aguja, equipo o bolsa de colecta, semejante al procedimiento para la transfusión de sangre.
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para evitar errores, esto incluye la absoluta identificación del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en posición cómoda, de preferencia en una silla especial para venopunción con descanso para los brazos y si está en cama, preferiblemente acostado.
Se deben tener en cuenta varias condiciones previas para comenzar el procedimiento de extracción de sangre:
- Selección del sitio de punción:
- Palpación (torniquete).- Una vez seleccionada el sitio de punción, se procede a colocar el torniquete 10 centímetros por encima del dobles del brazo y por no más de 3 minutos para evitar hemoconcentración.
- Desinfección.- Se procede a realizar una desinfección del área con alcohol etílico o isopropílico al 70% utilizando un algodón y con movimientos circulares del interior al exterior sin volver a tocar el área ya desinfectada.
- Punción Venosa.- El brazo debe estar preferiblemente en posición cómoda horizontalmente. Con el torniquete en posición, haga que el paciente cierre y abra el puño de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puño cerrado. Si se trata de un niño, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del codo del paciente, para evitar que doble el brazo durante la extracción.
▲ Se debe insertar el agua en un ángulo de 15 a 30 grados y con un movimiento firme y seguro.
▲ Pedir al paciente que realice puño con la mano del brazo a realizar la punción.
▲ Si se trata de un vacutainer se debe insertar los tubos correspondientes cuidando de no insertar demasiado la aguja y posteriormente homogenizar la muestra cuidadosamente; si se trata de una jeringuilla se debe insertar la aguja y jalar el émbolo con movimiento continuo.
▲ Antes de proceder a sacar la aguja, quitar el torniquete, pedir al paciente que afloje el puño, colocar el algodón con alcohol sin presionar demasiado en el lugar de punción y retirar la aguja.
▲ Realizar presión con el algodón sin demasiada fuerza para evitar un edema por dos minutos y colocar un curita.
BIOSEGURIDAD
- Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar de mandil durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio. Cuando se va a extraer muestra, es requisito la utilización de guantes de protección. Es recomendable el uso de lentes de protección.
- (^) No se permite comer ni tomar en el área de trabajo.
- No se permite fumar.
- No se permite la aplicación de cosméticos en el área de trabajo.
- No se permite el uso de lentes de contacto para la manipulación en el área de trabajo.
- Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrás su cabello, de forma tal que no entren en contacto con superficies contaminadas.
- Lavado de las manos: Las manos deben ser lavadas con frecuencia durante todo el día de labor, antes y después del contacto con los pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio
- Practique las precauciones universales mínimas con todo paciente a ser atendido.
- (^) Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.
- Limpie su mesa antes de iniciar sus labores.
- Si el paciente tose con frecuencia, colóquese una mascarilla.
- Evite tocar áreas visiblemente infectadas del paciente.
- Tome precauciones al manipular las agujas y lancetas.
- No deje agujas y lancetas usadas en la mesa de trabajo. Descartar inmediatamente en su contenedor apropiado.
- Dejar secar la placa completamente y rotularla.
TINCIÓN WRIGHT
La tinción de Wright es un tipo de tinción usada en histología para facilitar la diferenciación de los tipos de células de la sangre. Se usa principalmente para teñir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al microscopio. En citogenética se usa para teñir cromosomas, para facilitar el diagnóstico de síndromes y enfermedades.
Debido a que ayuda a distinguir fácilmente las células de la sangre se convirtió en una técnica muy usada para el conteo de los glóbulos blancos, una técnica rutinaria usada cuando hay sospecha de infecciones.
Una tinción de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B.
La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos y da color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.
- Se coloca 2.5 ml aproximadamente de colorante de Wright por 5 minutos.
- Agregar 2 ml de solución amortiguadora de pH 6,8 por 6 minutos.
- Observar la capa metacoromática.
- Enjuagar con agua destilada y dejar secar.
4. GRÁFICOS
5. OBSERVACIONES:
- Al realizar la extracción de sangre se realizó una homogenización de la misma en los tubos colectados, uno se realizó en el tubo de tapa morada, y otro en el tubo de tapa azul.
- Se realizó la tinción de Wright con dos placas, una placa con sangre del tubo de tapa morada y otra placa con sangre del tubo de tapa azul. Para ambos casos se observó, después del procedimiento para la tinción, una coloración morada.
- (^) Se observó al microscopio en aumento de 100 y con aceite de inmersión. En un principio no se observó ninguna estructura, por lo que se procedió a limpiar la parte trasera de la placa, logrando una mejor visión.
- La placa con la sangre del tubo morado tenía las estructuras con una morfología aparentemente normal, en donde en 7 campos se logró divisar, eritrocitos, que poseían
Florudo de Sodio) Tubo tapa amarilla
(Orina)
------------------ Recolección de muestras de orina al vacío.
Tubo tapa negra
(Sangre total)
Citrato de Sodio al 3,2% (0,13mol/ml) (1 parte de Citrato de sodio por 4 partes de sangre)
Eritrosedimentación
- Orden de tubos
Los tubos están predeterminados para llenarse con un determinado volumen de sangre por vacío. El tapón de caucho está codificado por color, de acuerdo a su uso o sus aditivos.
ADITIVO: Ninguno
ADITIVO: Gel - Separador
ADITIVO: Anticoagulante EDTA
ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio (DEMAR, 2011)
- Anomalías morfológicas de glóbulos rojos
Las anormalidades morfológicas de los eritrocitos se presentan en tres categorías: Anormalidades en el tamaño, anormalidades en la forma y anormalidades citoplasmáticas.
Anormalidades en el tamaño:
Macrocitos: Son eritrocitos con diámetro superior a 8.5 micras. La macrocitosis está usualmente acompañada de un PVC por encima de 100 fL. Su aparición puede estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12 y/o ácido fólico. Estrés medular cuando hay eritropoyesis acelerada. Trastornos hepáticos. Es importante anotar que normalmente los extendidos de sangre periférica de neonatos se caracterizan por presentar una macrocitosis significativa.
Microcitos: Recibe este nombre el glóbulo rojo que presenta un diámetro inferior a 6.0 micras, la microcitosis está usualmente acompañada de un PVC por debajo de 75 fL. Se observan microcitos en entidades que cursan con alteraciones cuantitativas de la hemoglobina como son las anemias por deficiencia de hierro y las talasemias. Generalmente los microcitos se acompañan de bajo contenido de hemoglobina por lo cual se denominan microcitos hipocrómicos.
Megalocitos : Son los “grandes macrocitos ovales”, células donde se combina una alteración del tamaño y de la forma, pueden llegar hasta tener 12 micras de diámetro. Característicamente se observan en anemias megaloblásticas.
Anormalidades en la forma:
Equinocito : Característicamente aparece como una célula dentada que presenta sobre su superficie pequeñas progresiones redondeadas a manera de bombas o vesículas de tamaño uniforme y simétricamente distribuidas que con el MEB, semejan un erizo de mar.
Cuerpos de Howell – Jolly: Remanentes nucleares. En aspleniay estados hipoesplénicos, anemia perniciosa y anemias severas por déficit de hierro. Coloración Wright.
Anillos de Cabot : Remanentes nucleares en forma de anillos circulares doblados sobre si mismos o en figura de ocho. En intoxicación por plomo, anemia perniciosa y anemias hemolíticas. Coloración Wright.
Cuerpos de Heinz: Hemoglobina agregada o desnaturalizada. En pacientes con síndromes talasémicos o de hemoglobinas inestables, en el estrés oxidante cuando hay deficiencias enzimáticas de la vía de pentosas principalmente y pacientes con asplenia. Coloración azul de cresil brillante.
Siderocitos: Representan hierro no hemoglobínico dentro de los eritrocitos. Se observan aumentados en pacientes esplenectomizados y en pacientes con infecciones crónicas, anemia aplástica o en anemias hemolíticas.
Anormalidades en el color:
Normocromía: Término utilizado para indicar que el eritrocito contiene una cantidad de hemoglobina igual al nivel normal determinado por la concentración de hemoglobina corpuscular media (PCHC).
Hipocromía : Se origina por una síntesis anormal de hemoglobina, asociada a deficiencia de hierro, anemia sideroblástica, talasemia y anemia de las enfermedades crónicas. Se observa el eritrocito con una mayor palidez central.
Hipercromía: Término que no representa una situación real y que por lo tanto no se acoge.
Policromatofília : Los eritrocitos policromatófilos (reticulocitos), suelen ser más grandes que las células normales en los frotis de sangre teñidos con Romanowsky. El tinte azuloso es producido por la presencia de RNA residual en el citoplasma. Cantidades abundantes de estas células se presentan cuando hay disminución en la supervivencia del eritrocito o hemorragia, y una médula ósea hiperplásica eritroide. (Itzel, 2009)
- Phthirus Pubis
La ladilla (Pthirus pubis) es un insecto anopluro ectoparásito de los seres humanos, de entre 1- mm de longitud, casi redondo, achatado y de color amarillento. La infestación por ladillas se denomina ftiriasis.
La transmisión se realiza en la mayoría de los casos por contacto sexual, aunque también en raras ocasiones puede suceder al usar prendas que han estado en contacto con algún portador. Además de la región púbica, también pueden situarse en el cabello, las cejas, las pestañas y el velloaxilar y corporal (de las piernas y los brazos, por ejemplo).. El período de incubación de los huevos es de seis a ocho días.
Las ladillas se alimentan de sangre por lo menos cincuenta veces al día, lo que ocasiona un prurito muy molesto que puede hacer que el infectado se rasque provocando irritación e infección de la piel.
Existen cremas, champús y lociones que contienen hexacloruro de benceno gamma o permetrina. Aunque el parásito vive poco tiempo separado del cuerpo, es conveniente cambiar sábanas, toallas y ropas para evitar una reinfestación. (Reed, 2007)
8. BIBLIOGRAFÍA:
Libros:
(2006). Proteínas: Estructira Primaria. En D. Voet, Fundamentos de Bioquímica (págs. 94-118). Madrid: MÉDICA PANAMERICANA.
