FUNDAMENTOS
COLORACIONES
BACTERIOLOGÍA
Ana Sofia Alfonso Suárez - Microbiología Industrial
2020-1
COLORACIÓN DEGRAM:
El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células
bacterianas (tanto gram positivas como gram negativas) a través de la
pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en
equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales están
presente para solubilizar el yodo, y actúan de mordiente, haciendo que el
cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula
bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en
solución acuosa con el cristal violeta. La mezcla de alcohol-acetona que
se agrega, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es
soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos gram positivos no se
decoloran, mientras que los gram negativos sí lo hacen. Para poner de
manifiesto las células gram negativas se utiliza una coloración de
contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina
o la fucsina. Después de la coloración de contraste las células gram
negativas son rojas, mientras que las gram positivas permanecen
violetas.
COLORACIÓN CON ROJO CONGO:
El glicocálix, hace referencia a sustancias densas o pegajosas,
constituidas por glucanos solubles e insolubles que secretan la mayoría
de procariotas, sobre su pared. El glicocálix cumple la función de fijar los
microorganismos patógenos a sus huéspedes, hacerlos difíciles de
reconocer y destruir por fagocitosis, son adhesinas que intervienen en los
procesos de adhesión, agregación y coagregación de las bacterias a las
superficies lisas ya sea, de los tejidos, del esmalte de los dientes, las
paredes, objetos metálicos o a otras bacterias.
Las coloraciones utilizadas para la observación de glicocálix, y cápsula
son las denominadas negativas y son: rojo congo, nigrosina y tinta china.
Estas coloraciones por tener el ion colorante cargado negativamente, son
rechazadas por la cápsula y el glicocálix, dejando la estructura incolora
pero coloreando el medio que la rodea. Como resultado se observará un
fondo coloreado sobre el cual se observan pequeños agujeros incoloros
que corresponden a la cápsula cuando es de escaso diámetro, y al
glicocálix cuando el diámetro es más amplio. Si en el proceso de
coloración se incluye un colorante básico,
este tiñe la pared de la bacteria, observándose coloreada dentro de
la cápsula o del glicocálix.
● Ponga sobre una lámina limpia y desengrasada una pequeña
