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guion volumen celular, Apuntes de Fisiología Animal

Asignatura: Fisiología Animal, Profesor: Carmen Acebal, Carrera: Biología, Universidad: UCM

Tipo: Apuntes

2016/2017

Subido el 21/06/2017

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Fisiología Animal Guión de Prácticas. Sesión 6B
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SESIÓN 6
B. VOLUMEN CELULAR
INTRODUCCIÓN
Cuando los parámetros del medio interno del animal se alejan de su intervalo de valores
normales se disparan una serie de sistemas fisiológicos de control que están dirigidos a mantener su
medio interno relativamente estable, capacidad que se denomina homeostasis. El medio interno acuoso
de los animales multicelulares es el líquido extracelular, que actúa como una transición entre el medio
externo del animal y el líquido intracelular. En la relación de parámetros que se encuentran bajo control
homeostático se incluyen: la osmolaridad, temperatura, pH, nutrientes, agua, sodio, calcio y otros iones
inorgánicos, oxígeno… Si el organismo no lograr mantener la homeostasis de estos parámetros, la
función normal se ve afectada, pudiendo aparecer, como resultado, un estado de alteración que puede
llegar a ser patológico. En esta práctica estudiaremos la respuesta (en cambio de volumen) de las
células frente a cambios de osmolaridad en el medio externo.
El movimiento neto de agua a través de una membrana semipermeable en respuesta a un
gradiente de concentración se denomina ósmosis. Durante la ósmosis el agua se desplaza a través de
la membrana celular para diluir la solución más concentrada, una vez que las concentraciones a ambos
lados de la membrana se igualan se detiene el movimiento neto de agua. En función de cómo sea este
desplazamiento neto de agua, cuando comparamos dos soluciones decimos que éstas pueden ser,
isosmóticas, hiperosmóticas o hiposmóticas. La tonicidad es un término fisiológico empleado para
describir una solución y cómo ésta afecta al volumen celular. Si una célula situada en una solución
incorpora agua a su interior aumentando el volumen celular, se dice que la solución es hipotónica para la
célula. Si la célula pierde agua cuando se sitúa en la solución, decimos que la solución es hipertónica. Si
la célula no cambia de tamaño en la solución, decimos que ésta es isotónica.
CONCEPTOS FUNDAMENTALES
- Ósmosis, Osmolaridad (soluciones isosmóticas, hiposmóticas, hiperosmóticas), Tonicidad
(soluciones isotónicas, hipotónicas, hipertónicas).
OBJETIVOS
- Estudiar el efecto de la osmolaridad del medio sobre el volumen celular de eritrocitos de rata.
PROTOCOLO
Preparar 4 tubos eppendorf que contengan cada uno 10 µl de sangre y 40 µl de las siguientes
soluciones:
a) Tubo 1: solución de cloruro sódico al 15 %.
b) Tubo 2: solución de cloruro sódico al 0,9 %.
c) Tubo 3: solución de cloruro sódico al 0,45 %.
d) Tubo 4: agua destilada.
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Fisiología Animal Guión de Prácticas. Sesión 6B

SESIÓN 6

B. VOLUMEN CELULAR

INTRODUCCIÓN

Cuando los parámetros del medio interno del animal se alejan de su intervalo de valores normales se disparan una serie de sistemas fisiológicos de control que están dirigidos a mantener su medio interno relativamente estable, capacidad que se denomina homeostasis. El medio interno acuoso de los animales multicelulares es el líquido extracelular, que actúa como una transición entre el medio externo del animal y el líquido intracelular. En la relación de parámetros que se encuentran bajo control homeostático se incluyen: la osmolaridad, temperatura, pH, nutrientes, agua, sodio, calcio y otros iones inorgánicos, oxígeno… Si el organismo no lograr mantener la homeostasis de estos parámetros, la función normal se ve afectada, pudiendo aparecer, como resultado, un estado de alteración que puede llegar a ser patológico. En esta práctica estudiaremos la respuesta (en cambio de volumen) de las células frente a cambios de osmolaridad en el medio externo.

El movimiento neto de agua a través de una membrana semipermeable en respuesta a un gradiente de concentración se denomina ósmosis. Durante la ósmosis el agua se desplaza a través de la membrana celular para diluir la solución más concentrada, una vez que las concentraciones a ambos lados de la membrana se igualan se detiene el movimiento neto de agua. En función de cómo sea este desplazamiento neto de agua, cuando comparamos dos soluciones decimos que éstas pueden ser, isosmóticas, hiperosmóticas o hiposmóticas. La tonicidad es un término fisiológico empleado para describir una solución y cómo ésta afecta al volumen celular. Si una célula situada en una solución incorpora agua a su interior aumentando el volumen celular, se dice que la solución es hipotónica para la célula. Si la célula pierde agua cuando se sitúa en la solución, decimos que la solución es hipertónica. Si la célula no cambia de tamaño en la solución, decimos que ésta es isotónica.

CONCEPTOS FUNDAMENTALES

  • Ósmosis, Osmolaridad (soluciones isosmóticas, hiposmóticas, hiperosmóticas), Tonicidad (soluciones isotónicas, hipotónicas, hipertónicas).

OBJETIVOS

  • Estudiar el efecto de la osmolaridad del medio sobre el volumen celular de eritrocitos de rata.

PROTOCOLO

 Preparar 4 tubos eppendorf que contengan cada uno 10 μl de sangre y 40 μl de las siguientes soluciones:

a) Tubo 1: solución de cloruro sódico al 15 %.

b) Tubo 2: solución de cloruro sódico al 0,9 %.

c) Tubo 3: solución de cloruro sódico al 0,45 %.

d) Tubo 4: agua destilada.

Fisiología Animal Guión de Prácticas. Sesión 6B

 Agitar suavemente para mezclar bien.

 Inmediatamente extraer mediante una pipeta automática una gota de cada eppendorf y situarla en un portaobjetos. Es importante emplear una punta distinta para cada eppendorf. Se puede utilizar un mismo portaobjetos para dos preparaciones distintas teniendo cuidado de que estén bien separadas para que no se mezclen. Colocar distintos cubreobjetos sobre cada gota y observar al microscopio.

 Transcurridos al menos 5 minutos extraer una nueva gota del tubo 4 y repetir la observación.

 Observar y anotar el aspecto de los hematíes en cada solución y para el tubo 4 a los dos tiempos estudiados (0 y 5 minutos).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Realizar un dibujo de cómo es la morfología de los eritrocitos en cada solución:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tiempo 0 Tiempo 5 min

Teniendo en cuenta tus resultados y los de todo el grupo de prácticas responde las siguientes cuestiones:

  1. ¿Qué ha ocurrido a los hematíes de los distintos tubos? ¿La solución de cada uno de ellos es iso-, hiper- o hipotónica?

  2. Elaborar una explicación fisiológica razonada de las diferencias observadas entre las distintas soluciones.

  3. La solución 2 respecto a la 1 ¿es hiperosmótica o hipoosmótica? ¿cómo es esta misma solución 2 respecto a la 3? ¿y en términos de tonicidad, cómo es la solución 2 para los eritrocitos?

  4. ¿En la naturaleza los organismos (y sus células) se han de enfrentar a cambios de osmolaridad de magnitud similar a las ensayadas en la práctica? Piensa en posibles ejemplos.