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HEMATOLOGÍA
El Laboratorio de Análisis Veterinarios realiza la hematología por medio de un autoanalizador ADVIA 120 (Siemens). Este instrumento está provisto de un programa informático, para distintas especies de mamíferos. Con este programa se pueden determinar todos los parámetros hematológicos de todos los mamíferos, ya que automáticamente se varía el umbral de sensibilidad, adaptándose a los diferentes tamaños celulares de cada especie.
El instrumento, por medio de un láser, cuenta al menos 10.000 células (hematíes, leucocitos o plaquetas), y por medio de distintos reactivos y según el tamaño celular realiza la fórmula leucocitaria.
La forma de trabajar del instrumento, y la interpretación de los resultados se explica a continuación, de forma detallada. Al tratarse de un citómetro de flujo y contar un número elevado de células, los resultados son más precisos que si se realizara este tipo de análisis en otros analizadores hematológicos o de forma manual, debido a su tecnología. Para mayor información sobre la interpretación de este tipo de gráficas, reproducimos el siguiente artículo:
De todas formas, en la clínica se pueden determinar parámetros hematológicos también de forma manual. El número de los distintos tipos de células se puede obtener mediante cámaras de recuento, y las plaquetas con tinciones específicas. Respecto a la fórmula leucocitária, tras una tinción se pueden clasificar al microscopio las distintas poblaciones de forma manual, según su morfología, como se muestra en un artículo que adjuntamos.
FÓRMULA LEUCOCITARIA: INTERPRETACIÓN
Reproducción del artículo: Interpretación de la fórmula leucocitaria. Sánchez Visconti, G. ARGOS, Abril de 2002., 42-44.
Los leucocitos son las células que, por sus características, nos proporcionan más información sobre el estado general de salud de un paciente. Responsables de la defensa del organismo, ya que eliminan cualquier agente infeccioso (bacterias, virus o parásitos), actúan en procesos inflamatorios, son los mediadores del funcionamiento de las vacunas y, como cualquier otro tipo de células, pueden sufrir alteraciones, dando lugar a diversas neoplasias.
Los leucocitos se dividen, según la presencia o ausencia de gránulos en su citoplasma, en granulocitos y agranulocitos.
Granulocitos:
- Neutrófilos.
- Eosinófilos.
- Basófilos.
- Agranulocitos:
- Monocitos.
- Linfocitos.
El recuento en la sangre del número de cada una de estas células, expresado en porcentaje, es lo que se denomina FÓRMULA LEUCOCITARIA o leucograma.
REALIZACIÓN DE LA FÓRMULA LEUCOCITARIA:
La forma más sencilla y exacta de realizar una fórmula leucocitaria es con un frotis sanguíneo. Para ello se debe obtener una fina capa de sangre entera recién extraída, o conservada en anticoagulantes (EDTA disódico-tripotásico, heparina sódica-litio o citrato sódico), extendiendo la sangre en un porta objetos y ayudándonos con el borde de otro. Una vez seca la extensión, ésta se tiñe con un colorante de tipo Romanowsky; tras un lavado y secado, se añade una gota de aceite de inmersión y se observa al microscopio en el objetivo 100X. La mejor zona de observación es desde la mitad del frotis hacia el extremo más fino, empezando de arriba abajo, y de izquierda a derecha, para evitar contar simultáneamente la misma célula. Contando de 100 a 200 células, podremos calcular el porcentaje final de los distintos tipos celulares sin demasiado error.
Actualmente existen autoanalizadores hematológicos que de modo automático realizan la fórmula leucocitaria. Estos instrumentos hoy en día están muy introducidos en muchas clínicas veterinarias, y todos ellos nos informan correctamente del número de leucocitos totales. Sin embargo, respecto a la fórmula, los únicos analizadores hematológicos que pueden competir con el ojo humano son los citómetros de flujo. Debido a su tecnología y al número elevado de leucocitos que son capaces de contar (cerca de 10.000), estos analizadores nos proporcionan una fórmula leucocitaria de 5 POBLACIONES con una precisión cercana a la nuestra y realizan distintos tipos de gráficas que son extremadamente útiles, ya que existen ciertos patrones compatibles con algunas patologías, y además nos ayudan a detectar cualquier error en la fórmula. Con cualquier otro tipo de instrumentos, únicamente tendremos una aproximación de la fórmula leucocitaria, por lo que ésta debería ser realizada manualmente, y fundamentalmente cuando nos hallemos ante una fórmula alterada.
Nuestros intervalos de referencia para los distintos tipos de leucocitos son:
PERROS/GATOS
Neutrófilos: 45 – 76 %./ 35 – 75 %.
Linfocitos: 16 – 45 %. / 20 – 55 %.
Monocitos: 1 - 8 %./ 1 - 4 %.
Eosinófilos: 1 – 10 %. / 1 – 10 %.
los cuales inducen a un aumento del número total de los mismos, y en particular de neutrófilos, además de producir linfopenia.
El ejercicio y el estrés son otras causas que producen leucocitosis, siendo predominantemente neutrofílica y monocítica en el perro, y linfocítica en el gato. Por el contrario, la leucopenia suele aparecer en ciertas enfermedades víricas (como la parvovirosis) y tras la anestesia.
ALTERACIONES DE LA FÓRMULA LEUCOCITARIA:
Cada tipo de leucocito tiene una función específica en el organismo. A continuación explicaremos cuáles son, y en qué procesos están involucrados. Su morfología se describe refiriéndonos a células teñidas.
NEUTRÓFILOS.
Como hemos mencionado anteriormente, los neutrófilos son la primera barrera de defensa del organismo y normalmente su número es superior al resto de los leucocitos. Son células de forma redonda, con el núcleo lobulado de color azul oscuro y gránulos en el interior del citoplasma. Si en el núcleo observamos más de 5 lóbulos, significa que nos hallamos ante un neutrófilo envejecido. Suelen aparecer en inflamaciones crónicas o por efecto de los glucocorticoides.
Neutrófilo
El aumento de precursores de los neutrófilos, como los cayados es lo que se denomina desviación a la izquierda. Los precursores se incrementan cuando existe gran demanda de neutrófilos hacia un tejido, debido a un proceso inflamatorio. Si el número total de leucocitos es elevado y hay desviación a la izquierda, podemos tener la sospecha de la existencia de una infección.
Cayado
Cuando los neutrófilos presentan en su citoplasma un aspecto reticular azulado o inclusiones granulares de color azul (llamadas corpúsculos de Döehle) se define como granulación tóxica. Esta granulación se observa en infecciones bacterianas graves e intoxicaciones. Sin embargo, en gatos se suelen observar normalmente corpúsculos de Döehle
Así como la neutrofilia aparece en procesos inflamatorios, sobre todo agudos, sean o no de origen bacteriano, y por efecto de los glucocorticoides (por liberación de noradrenalina), la neutropenia es debida a ciertos medicamentos (como las cefalosporinas o algunos anestésicos), a leucemias o por ciertos virus como el parvovirus y los virus de la leucemia (FeLV) y de la inmunodecifiencia (FIV) felinas.
MONOCITOS.
Los monocitos tienen forma irregular, con el citoplasma basófilo (azulado), a menudo con vacuolas, y núcleo grande. Es la célula más grande de todos los leucocitos, y si no se posee demasiada experiencia se puede llegar a confundir con los cayados. Los monocitos cuando se encuentran dentro de los tejidos, se denominan macrófagos.
Monocito
inmune) y coadyuvantes o “helper” (inducen la multiplicación y diferenciación de los linfocitos B y otros linfocitos T).
Linfocito
La linfocitosis es típica de leucemias linfoblásticas, en las cuales suelen observarse células precursoras. Otras causas distintas, como la vacunación, o en el caso del gato por estrés, también la pueden producir. La linfopenia suele ser debida a glucocorticoides y a alteraciones como el quilotórax y los linfomas.
En el cuadro 1 se resume en qué procesos puede aparecer aumento o disminución de cada tipo de leucocito.
CUADRO 1
NEUTROFILIA Glucocorticoides
Inflamación (por infección o no)
NEUTRÓFILOS
NEUTROPENIA Parvovirosis
Cefalosporinas
FeLV-FIV
Leucemias (mieloides)
Anestesia LINFOCITOSIS Estrés (en gatos)
Leucemia linfocítica
Vacunas
LINFOCITOS
LINFOPENIA Glucocorticoides
Quilotórax
Linfosarcomas
MONOCITOS MONOCITOSIS^ Inflamación crónica
Anemia autoinmune
PIF EOSINOFILIA Alergias
Parásitos (filariosis)
Procesos asmáticos (en gato)
Granuloma eosinofílico
EOSINÓFILO
EOSINOPENIA Glucocorticoides
BASÓFILOS BASOFILIA^ Hipersensibilidad (alergias)
Mastocitomas
CONCLUSIONES
La fórmula leucocitaria, como hemos visto, nos puede dar gran información sobre el estado general de salud de un animal, pero hay que considerar también el número total de leucocitos, para su correcta evaluación. Como cualquier resultado analítico, la fórmula leucocitaria por sí misma no es capaz de confirmarnos una patología específica. Si los resultados obtenidos nos inducen a pensar que existe algún proceso patológico, esta sospecha se debería complementar con otro tipo de análisis. En el caso de inflamaciones, si son debidas a parásitos habrá que detectarlos por medio de pruebas inmunológicas u observación directa. Si el proceso es bacteriano, debería buscarse el origen y realizar cultivos microbiológicos. Actualmente existen métodos analíticos que nos evidencian la presencia de ciertos virus. Las neoplasias únicamente se pueden confirmar por estudios anatomopatológicos, como citologías o biopsias. Todos estos métodos confirmativos, inducidos por los resultados de la fórmula leucocitaria, siempre apoyan al diagnóstico clínico.
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- Rodón, J. Hematología Clínica. Canis et Felis. Madrid, 1995._
- PT aumentado, PTT aumentado, Fibrinógeno normal: Deficit de vitamina K (intoxicación por cumarinas, enteropatías graves) o hepatopatías.
- PT normal, PTT aumentado, Fibrinógeno normal: Déficit de algún factor de la vía intrínseca, tratamiento con heparina o enfermedad de Von Willebrand.
- PT aumentado, PTT aumentado, Fibrinógeno bajo: Hepatopatía severa o CID (coagulación intravascular diseminada).
Hay que tener en cuenta que el citrato sódico de los tubos está en forma líquida y en cantidad considerable, por lo que si la cantidad de sangre extraída no llega a la marca de llenado que indican todos los tubos, ésta estará más diluída y por tanto los tiempos de coagulación pueden ser más alargados.
PDF o Productos de Degradación del Fibrinógeno
Los trombos que aparecen en ciertas enfermedades están formados por fibrina con enlaces cruzados, cuya digestión producida por la plasmina, da lugar a los PDF molecularmente distintos a los del fibrinógeno. La aparición de PDF detectables en una muestra de sangre con citrato sódico, es indicativo de un proceso de caogulación intravascular diseminada (CID).
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