T.0 Introducció a la enginyeria genètica
1. Clonatge de DNA
Passos del clonatge:
1. Construcció de la molec. de DNA recombinant (vector + inserto).
2. Introducció en una cel. hoste (organisme senzill, cel. eucariota o procariota).
3. Multiplicació del DNA recombinant.
4. Propagació del DNA recombinant a la població.
5. Obtenció dels clons (selecció d’organismes que tenen les molec. de DNA recombinant
d’interès).
És important saber el procés biològic que es vol estudiar i quin gen és responsable del que vull
estudiar. També és important fragmentar el DNA a estudiar correctament per poder-lo unir al
vector i generar el DNA recombinant.
2. Llibreries
Hi ha 2 tipus de llibreries:
1. Llibreries genòmiques o genoteques: Estan construïdes mitjançant inserció de
diferents fragments del genoma de l'organisme objecte d'estudi, obtinguts per digestió
a l'atzar, en un vector de clonatge apropiat.
Cada clon conté una única regió del genoma.
2. Llibreries de cDNA: Estan construïdes a partir d'mRNA obtingut de les cèl·lules o teixits
d'estudi, que han esdevingut DNA i lligat en un vector de clonatge.
Cada clon presenta una còpia de DNA de l'mRNA obtingut.
En aquest cas s’utilitza DNA codificant en forma de mRNA però com aquest no es pot
clonar el que es fa és passar l’ARNm a cDNA per obtenir el DNA recombinant o poder-lo
clonar.
3. Aplicacions
BIOFARMACEUTIC :
- Antibiòtics.
- Proteïnes heteròlogues (insulina,....)
- Proteïnes més operatives o amb noves funcions.
- Generació de vacunes (hepatitis,...).
AGRÍCOLA I RAMADERO :
- Modificació genètica de plantes.
- Animals transgènics.
CLÍNIC :
- Diagnòstics (HIV, Hepatitis, etc.)
- Teràpia gènica.
FORENSE :
- Resolució de crims.
