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La espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección especifica de moléculas y también el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. También podemos decir que la espectrofotometría se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda.
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Espectrofotometría La espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección especifica de moléculas y también el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. También podemos decir que la espectrofotometría se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda. Cada componente de una solución tiene un patrón de absorción de luz característico entonces comparando la longitud de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra versus soluciones standard, es posible determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra o sea una solución incógnita. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza y estado de agregación. La espectrofotometría se usa para diversas aplicaciones como: Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas Detección de niveles de contaminación en aire y agua Determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos Espectrofotómetro Un espectrofotómetro es un instrumento que permite proyectar un haz de luz a través de una muestra y medir la absorbancia (cantidad de luz absorbida por la muestra) o transmitancia (cantidad de luz que pasa a través de la muestra, es decir, el reciproco matemático de la absorbancia). La cantidad de luz absorbida o transmitida a una determinada longitud de onda es proporcional a la concentración del material. Si el material no absorbe luz por sí mismo, se puede mezclar con otros reactivos para obtener, mediante una reacción química específica, una solución que si absorba luz. Las principales aplicaciones de los espectrómetros son determinación de la cantidad en una solución de un compuesto en específico (concentración de hierro en sangre, de cobre en un tejido), identificación de unidades estructurales específicas, detección de niveles de contaminación en aire y agua, determinación de impurezas en alimentos y reactivos,
determinación de constantes de disociación de indicadores acido-base, y estandarización de colores de diversos materiales. Un espectrómetro típico posee cuatro componentes básicos: Una fuente de radiación que tiene intensidad constante en el rango de longitud de onda que cubre (usualmente es lámpara de tungsteno para luz visible, y deuterio para ultravioleta) Un compartimiento para la muestra Un monocromador que separa la banda de longitud de onda deseada del resto del espectro y la dispersa al compartimiento de la muestra, Un fotodetector, que mide cuantitativamente la radiación que pasa por la muestra.