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Manual de prácticas secas bioquímica UNAM
Tipo: Ejercicios
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Elaboración: Dra. Rebeca Milán Chávez Dra. Sara Morales López Dra. Norma Lilia Morales García
Solución 1: 77 mEq/L NaCl + 5 % dextrosa (glucosa)
Solución 2: 150 mEq/L NaCl + 0.5% dextrosa (glucosa
1.1 ¿Cuál es el valor de la osmolaridad plasmática?
1.2 Considerando solamente la concentración de NaCl presente en la solución 1 y 2 ¿Cuál de las dos soluciones es isotónica con respecto al plasma?
1.3 Al adicionar la glucosa a la solución, ¿cuál es la osmolaridad final de cada de una de las dos soluciones?
Observe la figura 1 con eritrocitos humanos colocados en soluciones con diferente osmolaridad. 2.1 Con respecto al efecto que tiene la solución sobre morfología del eritrocito indique cuál es la tonicidad de la solución en cada inciso. 2.2 Explique qué proceso se manifiesta en los eritrocitos al ser colocados en cada una de las soluciones.
Figura 1. Cambios en la estructura de eritrocitos. Modificado de https://sites.google.com/site/lacelulaunidadfundamental/osmosis.
Compuesto mEq/L mM Porcentual NaCl 77 Dextrosa 5
Compuesto mEq/L mM Porcentual NaCl 150 Dextrosa 0.
Usted tiene 3 soluciones comerciales de suero para “rehidratar”
3.1 Calcule la osmolaridad de cada suero
3.2 En un paciente adulto con deshidratación leve a causa de un síndrome diarreico, usted elije la marca A (ya que reconoce que se trata de vida suero oral). Seleccione la justificación por la cual es la mejor opción:
a) La concentración de calcio de la MARCA B es mejor para reforzar la masa ósea del paciente y no para hidratar.
b) La elevada concentración de glucosa en la MARCA B y C, ejerce un efecto osmótico en el lumen intestinal lo cual favorece a la disminución de consistencia de las evacuaciones.
c) La elevada concentración de glucosa de la MARCA C, favorece el incremento de expresión de los GLUT hidratando y nutriendo al paciente.
MARCA A
Cloruro de potasio 0.15 % Cloruro de sodio 0.35 % Citrato trisódico dihidratado
Glucosa 2%
MARCA B cada 100 mL Cloruro de potasio 149 mg Cloruro de sodio 12 mg Cloruro de calcio dihidratado
30 mg
Glucosa 5 g
MARCA C
Potasio 3.45 mEq/L Sodio 19.86 mEq/L Cloruro 23.31 mEq/L Glucosa 361.11 mEq/L
Marca A Marca B Marca C Osmolaridad (mOsm/L)
Práctica 2
Al terminar la práctica el estudiante debe:
1. Comprender el papel de los riñones en el mantenimiento del equilibrio ácido- base en una situación de alcalosis metabólica y en una de acidosis _metabólica.
Realizar un mapa conceptual mencionando la función del riñón en la regulación del equilibrio ácido-base y cuál es el efecto en el caso de una alcalosis y de una acidosis metabólica.
Analizar los datos de la siguiente tabla y describir cuál de las dos condiciones es la que permite observar el cambio y ajuste del pH en los diferentes voluntarios.
Voluntario Condición Basal
minutos
minutos
minutos
minutos pH en orina 1 Bicarbonato 5.85 6.68 7.18 7.50 7. 2 Bicarbonato 6.65 6.92 7.45 7.34 7. 3 Bicarbonato 5.73 6.10 6.80 7.06 5. 4 Bicarbonato 6.20 6.30 7.52 7.77 7. 5 Ejercicio 6.33 5.62 5.43 5.71 5. 6 Ejercicio 6.78 4.82 5.60 6.18 6. 7 Ejercicio 7.20 5.72 5.46 6.40 6. 8 Ejercicio 6.53 4.68 4.98 5.18 4.
Completar y analizar las siguientes gasometrías:
Lea la siguiente viñeta clínica y conteste a las preguntas que se le piden:
Paciente femenino de 58 años es llevado al servicio de urgencias presentando nausea severa, vómito y dolor abdominal. La semana anterior se le realizó una resección laparoscópica estomacal debido a una perforación gástrica. Su historia médica hace constar de enfermedad úlcera péptica tratada, diabetes tipo 2 e hipertensión. En la sala de emergencia, la paciente presenta signos de hipovolemia y abdomen distendido. Los datos de laboratorio son creatinina 0.7 mg/dL, potasio 4.8 mEq/L, glucosa 110 mg/dL, sodio 129 mEq/L, cloro 82 mEq/L y albúmina 5 g/dL. La gasometría mostró: pH 7.29, pCO 2 15.5 mm Hg, HCO 3 -^ 7 mM, lactato 12 mg/dL.
4.1 ¿Qué padecimiento ácido-base presenta la paciente?
4.2 ¿Cuál es el valor de la brecha aniónica?
GASOMETRÍA 1
pH:
pCO 2 : 32 mmHg
HCO 3 - : 11.2 mEq/L
Trastorno que presenta:
GASOMETRÍA 2
pH : 7.
pCO 2 : 28.7 mmHg
Trastorno que presenta:
GASOMETRÍA 3
pH : 7.
pCO 2 :
HCO 3 - : 11.2 mEq/L
Trastorno que presenta:
Práctica 3
Cinética enzimática
Al terminar la práctica el estudiante debe:
Para observar el efecto que tienen la concentración de sustrato sobre la actividad enzimática, es necesario realizar una curva con diferentes concentraciones del sustrato. En la Tabla 1 se encuentra indicado el volumen adicionado de glucosa; en los tubos 5 al 8 la concentración es de 40 mM (solución A) y en los tubos del 1 al 4 es de 4 mM (solución B).
1.1 Tomando en cuenta las concentraciones de las soluciones A y B. Calcule la concentración de glucosa (sustrato) en cada uno de los tubos. Considere que el volumen final en cada tubo es de 4 mL ya que además del agua se adicionó a todos los tubos 3 mL de la solución de enzima.
Tabla 1. Concentración de sustrato
# Tubo H 2 O (mL) Solución de glucosa
Volumen de la solución de glucosa (mL)
Concentración de glucosa μ M 1 1. B
0 2 0.90 0. 3 0.75 0. 4 0.50 0. 5 0. A
6 0.75 0. 7 0.50 0. 8 0 1.
Tabla 2. Datos obtenidos en la práctica de cinética enzimática.
# TUBO
Concentración de sustrato (μmolas de glucosa L-1)
Velocidad de la reacción (unidades Klett/min)
Velocidad de la reacción con el inhibidor (unidades Klett/ min)
1 Coloque la concentración de glucosa (μM ) que obtuvo en la tabla 1 para cada tubo
0 0 2 40 20 3 58 32 4 95 65 5 125 90 6 160 105 7 185 140 8 200 162
Después de completar cada tabla:
1.1 Graficar los datos obtenidos en la Tabla 2 (considere que el tiempo de incubación de la reacción fue de 20 min).
1.2 Realizar una gráfica de Lineweaver-Burk con los valores de 1/v Vs 1/[S].
1.3 A partir del gráfico doble recíproco, calcular el valor de la velocidad máxima (Vmáx) y de la constante de Michaelis (Km) con y sin inhibidor.
1.4 Determinar el tipo de inhibición de acuerdo con las gráficas del punto anterior.
El estudio de las enzimas no solo permite entender la importancia que tienen en el metabolismo celular y conocer cómo se catalizan diferentes reacciones, sino que además se emplean como blanco farmacológico o marcadores de ciertas enfermedades.
Masculino de 44 años que es encontrado por sus familiares con un cuadro severo de desorientación; el paciente refiere visión borrosa. Como antecedente importante, una noche antes compró una botella de tequila de un expendio cerca de su hogar. A la exploración física se encuentra consciente, orientado en persona y desorientado en tiempo, lugar. Frecuencia cardiaca de 120 latidos por minuto, frecuencia respiratoria: 30 respiraciones por minuto, abdomen sin alteraciones y reflejos osteotendinosos normales. Fondo de ojo: alterado sugerente a pérdida de la visión.
Diagnósticos: Intoxicación por metanol y disminución de visión secundaria a intoxicación.
A continuación, se presentan dos viñetas clínicas. Con base en el diagnóstico que se proporciona, complete la tabla que se encuentra al final.
CASO 1
Paciente masculino de 45 años que inició con mareo y sudoración excesiva (diaforesis) después de hacer una mudanza; 10 minutos después comenzó con dolor en el pecho del lado izquierdo y dificultad para respirar. Por esta razón llega a urgencias con ayuda de sus familiares. Exploración física: IMC 35 Kg/m 2 , 120 latidos por minuto, 25 respiraciones por minuto, 160/90 mmHg de presión arterial. Antecedentes personales patológicos: tabaquismo positivo desde los 20 años a razón de 6 cigarrillos al día, dislipidemia diagnosticada hace 6 meses sin tratamiento. En la sala de urgencias se le realiza un electrocardiograma que revela un patrón que correlaciona con isquemia en ventrículo derecho. Se inicia protocolo administrándole ácido acetilsalicílico y nitroglicerina, así como el monitoreo continuo de signos vitales y electrocardiograma.
Diagnóstico: Síndrome coronario agudo.
CASO 2
Paciente femenino de 35 años acude a consulta porque hace 2 días inicio con fiebre de 38ºC por la noche, se acompaña de dolor abdominal que se incrementa cuando se recuesta de lado derecho, al caminar y al toser. En la exploración física se encuentra dolor a la palpación media en cuadrante superior derecho, se delimita el hígado a 3 cm debajo del borde costal derecho. Usted decide realizar un ultrasonido donde se observa hepatomegalia y una lesión redonda de 10 cm de diámetro de bordes bien delimitados hipoecoica que sugiere absceso hepático. En sangre se encuentran presentes anticuerpos contra E. hystolitica. Se inicia tratamiento con metronidazol y se sigue en vigilancia para evitar el drenaje quirúrgico del absceso.
Diagnóstico. Absceso hepático amebiano.
3.1 Escriba la(s) enzima(s) de escape que podría encontrar elevadas en sangre en cada caso
CASO 1 CASO 2
3.2 Con respecto al caso 1 ¿Cuál enzima de escape tiene mayor duración en el plasma e indique el tiempo que permanece? 3.3 ¿Se deben considerar a las enzimas de escape hepáticas como marcadores en el diagnóstico de daño biliar?
Czech Repub. 2016 Mar; 160(1):54-63.
Cinética Enzimática. Regulación y mecanismo de acción de las
enzimas. En Bioquímica de Laguna y Piña 8 a^ Ed. (pp.127-159). Facultad de Medicina/Manual Moderno.
Regulación de las enzimas. En Bioquímica Médica Básica 5 a^ Ed. (pp.
128-168). Wolters Kluwer.