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Temario para Auxiliar de Laboratorio.
Tema 3. Material de laboratorio: Materiales de uso en el laboratorio: El vidrio, el plástico y la porcelana. Material
volumétrico. Mediciones de volumen: Matraces aforados, pipetas, buretas, probetas y dispensadores automáticos.
MATERIALES DE USO EN EL LABORATORIO: El VIDRIO, EL PLÁSTICO Y LA PORCELANA.
Los materiales del laboratorio se pueden clasificar en tres tipos: los materiales de vidrio, los de plástico y los de porcelana.
- Vidrio: En un laboratorio de química se utilizan diversos materiales de laboratorio; a aquellos que están constituidos principalmente por vidrio, se les denomina material de vidrio o vidriería de laboratorio. Ciertos materiales son creados y graduados para poder medir volúmenes con mayor precisión; en estos casos se habla de material volumétrico. El vidrio es uno de los materiales más antiguos y más utilizados en química. Para su uso en el laboratorio es común que estos materiales sean refractarios (resistentes al calor), para evitar accidentes cuando sea necesario exponer alguno de estos a llamas u Asadores. Agitador Embudo de decantación Balón de destilación Bureta Matraz Matraz de Erlenmeyer Cristalizador Dedo frio (condensador) Desecador Kitasato Medida cónica Pipeta Retorta Tubo de ensayo Placa de Petri Tubo refrigerante Tubo de desprendimiento Varilla de vidrio Vaso de precipitado Vidrio de reloj Decantador Probeta
- Plástico: El plástico es un material caracterizado por su alta resistencia a la rotura. Además, a diferencia del vidrio y el metal, es bastante ligero y puede ocupar poco espacio. Algunos instrumentos de laboratorio están hechos de plástico desechable para evitar la contaminación de sustancias. Por lo general, los laboratorios utilizan dos tipos de materiales de plástico: los elastómeros y los termoplásticos. Los primeros se localizan en tapones, tubos y tetinas hechos de caucho natural o silicona; los segundos, por su parte, son más frecuentes en equipos de laboratorio. Otros tipos de plástico que se utilizan para fabricar materiales de laboratorio son el polietileno, la poliamida, el polipropileno y el polimetilpenteno. Todos ellos cuentan con las propiedades de poseer resistencia térmica y soportar todo tipo de sustancias, incluido los ácidos. Embudo Vaso precipitado Gradilla Cubetas Pipetas Pinzas de soporte universal Piseta o Vaso lavador Aspirador de Cremallera
- Porcelana: En un laboratorio de química o estudios se utilizan diversos materiales de laboratorio; a aquellos que están constituidos principalmente de porcelana, se los denomina material de porcelana. No sólo son muy delicados y frágiles, sino que además tienen un costo bastante alto. Por eso se recomienda tener especial cuidado con los materiales de porcelana. Al terminar de ser usados deben limpiarse bien en agua y esperar a que estén secos antes de volver a ser usados. Se ocupan para experimentos donde se utilizan temperaturas de hasta 1088 K (815°C/1500 ºF). Crisol Mortero Embudo buchner Capsula de evaporación o calcinación Gradilla Placa con cavidades Triangulo de tierra pipa
MATERIAL VOLUMÉTRICO. MEDICIONES DE VOLUMEN. (matraces aforados, pipetas, buretas, probetas y dispensadores
automáticos)
Se clasifica como material volumétrico a aquellos recipientes que se utilizan en un laboratorio de química para medir volúmenes. La mayoría están constituidos por vidrio para permitir la visualización del líquido o líquidos que se desea medir. Aunque en algunos casos se utilizan de plástico transparente, ya sea por su bajo precio, o para evitar una reacción entre el líquido y el vidrio (por ejemplo, cuando se mide ácido fluorhídrico). Pero debe tenerse en cuenta que, en general, tienen una precisión menor. El material de vidrio volumétrico se encuentra diseñado tanto para contener como para entregar, también hay materiales en los cuales se calienta y sirve para medir líquidos.
- Para contener: Cuando son llenados a su marca a la cual fueron calibrados para contener un volumen determinado. Significa que si se utiliza para entregar, entregaría menos del volumen indicado.
- Para entregar: Es el material que se calibra durante su proceso de manufactura, para transferir una cantidad establecida de líquido con propiedades similares de viscosidad y tensión superficial al agua. A fin de medir el volumen poseen unas marcas grabadas. Se puede subclasificar el material según el formato de estas marcas.
- Material volumétrico graduado: En este caso el elemento posee una graduación, una serie de líneas que indican diferentes volúmenes.
- Material volumétrico aforado: Posee uno o más aforos. Hay otra subclasificación que pueden recibir algunos de estos materiales, por ejemplo las pipetas y buretas (tanto las graduadas como las aforadas), pero no las probetas.
- De simple enrase/aforo: En este caso, los 0 ml corresponden al elemento vacío (en realidad, se tiene en cuenta que siempre quedan unas gotas). En este caso deberá enrasarse una sola vez.
- De doble enrase/doble aforo: En este caso, existe una marca para los 0 ml. Tiene como desventajas que es necesario enrasar dos veces (una al principio, y otra al final de la medición); y que si por error seguimos vertiendo el líquido más allá de la marca podemos arruinar el trabajo hecho. Y tiene la ventaja de poder utilizarse si se rompe la punta. Para saber cómo se miden los volúmenes de la mayoría de los materiales, puedes consultar cómo enrasar. Al margen de esto, el material volumétrico debe usarse con cuidado:
- No se lo debe exponer a variaciones bruscas o amplias de temperatura. Generalmente indican el rango de temperatura en el que puede operarse.
- Tener un manejo cuidadoso, ya que son muy frágiles. Esto incluye también no apoyarla horizontalmente sobre superficies que pueden estar inclinadas, ni muy cerca de elementos de metal que puedan romperlo. Materiales para medir volúmenes.
- Matraces aforados: Recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones químicas.
- Pipetas: Está formada por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) con la que se indican distintos volúmenes
- Buretas: Son tubos largos, graduados, de diámetro interno uniforme, provistas de una llave en su parte inferior. Se usan para verter cantidades variables de líquidos, y por ello están graduadas con pequeñas subdivisiones (dependiendo del volumen, de décimas de mililitro o menos). Su uso principal se da en volumetrías, debido a la necesidad de medir con precisión volúmenes de líquido variables.
- Probetas: Está formado por un tubo generalmente transparente, de cristal, de unos centímetros de diámetro y tiene una graduación desde 5 ml hasta el máximo de la probeta, indicando distintos volúmenes. En la parte inferior está cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras que la superior está abierta (permite introducir el líquido a medir) y suele tener un pico (permite verter el líquido medido). Generalmente miden volúmenes de 25 o 50 ml, pero existen probetas de distintos tamaños; incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml.
- Dispensadores automáticos: tiene como propósito traspasar volúmenes de un recipiente a otro (usarlo como pipeta) siempre y cuando no se requiera mayor exactitud al momento de la medición de volúmenes. También se utiliza para añadir un volumen determinado de un reactivo o de un diluyente a una solución.
Desecador Es un instrumento de laboratorio que se utiliza para mantener limpia y deshidratada una sustancia por medio del vacío. Kitasato Sirve para realizar experimentos con agua, como destilación, recolección de gases hidroneumática (desplazamiento de volúmenes), filtraciones al vacío, etc. Medida Cónica Para permitir el fácil vertido de líquidos, y tiene marcas de graduación para permitir la medición fácil y precisa de los volúmenes de líquido. Pipeta Toman medidas exactas de líquidos y tienen un material de cristal que se encuentran calibradas en pequeñas divisiones para medir cantidades diferentes de líquido. ... Se emplean en los laboratorios para medir volumen o transferir cantidades de líquido de un recipiente a otro. Retorta Se usa en la destilación de sustancias. Tubo de Ensayo Se utiliza en los laboratorios para contener pequeñas muestras, líquidas o sólidas, aunque pueden tener otras fases, como realizar reacciones químicas en pequeña escala. Entre ellos está el exponer a temperatura el mismo contenedor. Placa de Petri Es utilizado para poder observar diferentes tipos de muestras tanto biológicas como químicas, las cuales se encuentran encerradas dentro de la placa. Es utilizado para el cultivo de bacterias y otras especies relacionadas. También es utilizado para masar sólidos en una balanza.
Tubo refrigerante Se usa para condensar los vapores que se desprenden del matraz de destilación, por medio de un líquido refrigerante que circula por este, usualmente agua. Tubo de desprendimiento Sirven para evacuar los gases producidos en una reacción química para poder aislarlos por atrapamiento haciéndolos borbotear en una disolución adecuada. Varilla de vidrio Sirve para agitar disoluciones, con la finalidad de mezclar productos químicos y líquidos. Vaso de precipitado Se utiliza muy comúnmente en el laboratorio, sobre todo, para preparar o calentar sustancias, medir o traspasar líquidos. Vidrio de reloj Para medir la masa o el peso de productos sólidos en cantidad, evaporar ... Probeta Permite contener líquidos y sirve para medir volúmenes de forma exacta. Gradilla Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayo o tubos Eppendorf. Cubetas Para mantener las muestras durante los experimentos de espectroscopía.
Tema 4. Utensilios de uso básico en el laboratorio. Tipos de limpieza. Control de calidad de lavado de material usado en el
laboratorio.
UTENSILIOS DE USO BÁSICO EN EL LABORATORIO.
En el laboratorio hay material básico como se ha mencionado en el tema anterior. Sin embargo, hay utensilios que no pertenecen al material propiamente dicho. Son utensilios como guantes, bata y material de protección.
INTRODUCCIÓN.
Para que los resultados obtenidos en el laboratorio sean fiables, se ha de mantener la mesa de trabajo perfectamente limpia y se debe limpiar el material de laboratorio de forma adecuad, procediendo a su limpieza lo antes posible una vez que ha sido utilizado.
LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO.
Es necesario que tanto las superficies, como los instrumentos y equipos reúnan las condiciones necesarias en cuanto a:
- Limpieza, desinfección y esterilización. El laboratorio dispone de PNT (procedimientos normalizados de trabajo) relativos a la limpieza y desinfección de sus instalaciones, los productos que se utilizaran, los medios por los que se realizaran los controles de calidad de estos procesos, etc. - La sepsis o septicemia es la respuesta sistémica del organismo ante la presencia de microorganismos patógenos, y está causada por la acción del sistema inmunitario. - La asepsia es el conjunto de métodos aplicados para la conservación de la esterilidad. La presentación y uso correcto de la ropa, instrumental, materiales y equipos estériles se conoce como asepsia. - La antisepsia es el empleo de sustancias químicas (antisépticos) para acabar con la presencia de microorganismos de la piel o las mucosas. - La higiene es el conjunto de conocimiento y técnicas que aplican los individuos para el control de los factores que ejercen o pueden ejercer efectos nocivos sobre su salud.
- La limpieza:
- La limpieza es un procedimiento que elimina la suciedad de un objeto, combinando la frotación con la acción química de los detergentes.
- La limpieza es un procedimiento que en algunas ocasiones es suficiente por si mismo mientras que en otras se aplica como un paso previo a una desinfección o a una esterilización. Debemos tener en cuenta que una buena limpieza nos permitirá obtener los resultados deseados en los pasos de desinfección y esterilización. Con la limpieza se consigue retirar la mayor parte del llamado bioburden o carga biológica que llevan los materiales y esto permite que mejore la efectividad de la desinfección o esterilización.
- Para una buena limpieza se deben tener en cuenta las propiedades del agua y de los detergentes.
- La limpieza es la acción de eliminar la suciedad, es decir, cualquier sustancia que no forme parte de aquello que queremos limpiar.
- Los detergentes son mezclas de sustancias tensioactivas que tienen la propiedad química de disolver la suciedad o las impurezas de un objeto sin corroerlo.
- Características de los detergentes. Aunque estos compuestos varían considerablemente en su estructura química, todos ellos son moléculas tensioactivas o surfactantes, es decir, con una parte polar y una no polar. Se caracterizan por tres propiedades básicas cuya combinación los hace efectivos, y que son las siguientes: a) Poder humectante. El detergente ayuda a romper la tensión superficial del agua, consiguiendo así que “moje” mejor. Al reducirse la tensión, se reduce la atracción entre las moléculas de agua y estas pueden llegar mas libremente.a todas las zonas. b) Dispersión. El detergente rompe la suciedad compacta y la reduce a partículas muy finals (la dispersa) c) Suspensión. El detergente envuelve las partículas de suciedad que previamente ha dispersado, formando una emulsión. Estas partículas emulsionadas serán arrastradas por el agua durante el enjuague. Si no se produjera esta emulsión de la suciedad, las partículas se volverían a adherir a la superficie.
- Clasificación de los detergentes. Se clasifican en ionicos o no ionicos; y dentro de los ionicos, catiónicos y anfóteros, dependiendo de su carga. Todos ellos, por definición, son moléculas tencioactivas. Existen multitud de moléculas tensioactivas entre las que podemos destacar:
a) Los jabones son tensioactivos aniónicos conocidos desde la antigüedad, aunque en la practica no los consideramos detergentes. Se obtienen al reaccionar un ácido graso de cadena larga con un hidróxido, frecuentemente de sodio o de potasio. Este proceso se denomina saponificación. b) Los alquilbencenos sulfonatos son también tensioactivos aniónicos. Son los detergentes mas usados por su fuerte acción Surfactante. c) Las sales de amina y los compuestos de amonio cuaternario son los detergentes catiónicos mas usados. Los detergentes catiónicos tienen capacidad de absorber las cargas negativas de las superficies de las fibras o del pelo y se usan en suavizantes textiles y acondicionadores de pelo. Además, impiden el crecimiento bacteriano y se utilizan en la formulación de desinfección y detergentes bacterianos.
- El procedimiento de limpieza. La limpieza suele hacerse de forma manual, aunque hay otros sistemas como los lavavajillas de laboratorio o los ultrasonidos. La efectividad de un procedimiento de limpieza depende de cinco factores: a) Acción mecánica b) Acción química. c) Tiempo d) Temperatura e) Cantidad y calidad de agua.
- La Limpieza manual.
- Debemos ponernos un delantal plastificado y guantes de goma.
- Frotamos el material con agua fría y detergente, usando cepillos, escobillas u otros productos que nos ayuden a eliminar toda la suciedad. En este momento no debemos usar agua caliente porque coagula las proteínas de la materia orgánica y hace que se adhieran más. Si hay restos muy pegados que no se liberan, será necesario poner el material en remojo con algún producto corrosivo para poder arrancarlos. En este caso, debemos seguir las instrucciones de uso y de seguridad del fabricante del producto.
- Una vez retirada la suciedad más gruesa, frotamos el material con agua caliente y detergente, cepillando bien todos sus rincones.
- Aclaramos bien con agua del grifo.
- Efectuamos un segundo aclarado, enjuagando bien todo el material con abundante agua desionizada o destilada, un mínimo de cuatro veces. De esta forma eliminamos las sustancias contaminantes disueltas en el agua de la red pública, como cloro y otros iones.
- Dejamos secar el material en un soporte adecuado.
- Nos quitamos el delantal y los guantes y nos lavamos las manos.
- La Limpieza con lavavajillas. a) Es el procedimiento mas recomendable porque obtiene buenos resultados en poco tiempo, reduce el riesgo de cortes por rotura de instrumentos de vidrio y es muy sencillo de aplicar, ya que lo único que tenemos que hacer es colocar los instrumentos en las distintas cestas y elegir el programa de lavado más adecuado para ellos. b) La mayoría de los lavavajillas que se usan en los laboratorios disponen de un mecanismo de secado final gracias al cual, cuando saquemos los objetos, estarán listos para ser usados.
- La Limpieza con un baño de ultrasonido. a) Los baños de ultrasonido son particularmente útiles para la limpieza de instrumentos que tienen partes de las que es muy difícil quitar la suciedad. b) El baño de ultrasonido consta de una cubeta que se llena con agua y detergente, en la que se sumergen los objetos sucios. Cuando se pone el equipo en marcha, genera ultrasonidos que hacen que el agua vibre a unas frecuencias muy altas, friccionando los objetos sumergidos en ella; esta fricción desprende la suciedad que se haya adherido.
- La desinfección elimina los microorganismos vegetativos, pero no asegura la eliminación de las esporas bacterianas. La desinfección es el procedimiento que destruye la mayoría de los microorganismos de un objeto, material o superficie, con la esperanza de destruir todos los microorganismos patógenos. No siempre son necesarios los mismos niveles de desinfección y, por ello, se describen los tres niveles:
- Desinfección de intensidad baja. Puede destruir la mayoría de las formas vegetativas bacterianas y también algunos virus y hongos. No destruye las esporas bacterianas.
- Desinfección de intensidad media. Destruye todas las formas vegetativas bacterianas y la mayoría de los virus y los hongos, pero no destruye las esporas bacterianas.
c) En la pulverización el desinfectante se proyecta uniformemente en pequeñas gotas sobre la superficie del objeto que quiere tratarse. Se aplica en superficies, y en algunas partes de los equipos de laboratorio. Los desinfectantes deben manejarse con cuidado. También deben tomarse precauciones para su conservación. El procedimiento general de aplicación de un desinfectante podría describirse de la siguiente forma:
- Lavamos el objeto aplicando el procedimiento de limpieza que hemos explicado. En el caso de superficies o equipos, retiramos la suciedad mas gruesa y aplicamos un lavado por loción, frotando con una bayeta o una esponja humedecida con detergente y enjuagando con una bayeta con agua. En todos los caos debemos usar los detergentes y aplicar los procedimientos previstos en los protocolos correspondientes.
- Preparamos el desinfectante que corresponda, realizando una disolución con agua corriente y la concentración indicada, siguiendo las instrucciones del fabricante.
- Aplicamos el procedimiento de desinfección establecido, por inmersión, loción o pulverización.
- Secamos el instrumento o la superficie. Los instrumentos debemos guardarlos inmediatamente en el lugar que les corresponda, debidamente protegidos del polvo. Precauciones de uso de los desinfectantes. Todos los desinfectantes, como productos químicos que son, disponen de su ficha de seguridad y en sus etiquetas se muestran las advertencias de seguridad y en sus etiquetas se muestran las advertencias de seguridad que corresponda. Es necesario consultar y aplicar toda esta información. De forma general adoptaremos las siguientes precauciones: a) Nos pondremos guantes para manipular desinfectantes, ya que irritan la piel y las mucosas. b) Prestaremos a las advertencias sobre los riesgos respiratorios, ya que algunos desinfectantes producen vapores tóxicos y solo se pueden usar en espacios con ventilación. c) No mezclaremos desinfectantes, salvo que los fabricantes lo aconsejen. d) La mayoría de las soluciones desinfectantes no se pueden guardar de un día para otro. Por tanto, a la hora de prepararlas tendremos presente el tiempo durante el cual se puede guardar para que no sobre disolución que se deba tirar. e) Debemos conservar las disoluciones que se puedan guardar en recipiente correctamente tapados, que protejan de la luz y del calor, y etiquetarlos para que no puedan producirse confusiones. En la etiqueta, además de a información general, debemos hacer constar la concentración y la fecha de preparación. Principales desinfectantes: Los químicos desinfectantes de uso más frecuente son: a) Hipoclorito sódico (legía). Es un potente bactericida. Es de acción rápida pero transitoria, porque su agente activo, el cloro, se evapora. Es el desinfectante ambiental de uso más común y se usa para desinfectar suelos, paredes, etc. No puede usarse como antiséptico porque es corrosivo, y tampoco sirve para desinfectar ciertos instrumentos, porque corroe los metales, algunos plásticos y el caucho. b) Alcohol etílico al 70%. Elimina muchas bacterias y algunos virus (VIH incluido) y hongos, pero no esporas. Su principal desventaja es que tiene un espectro antibacteriano limitado. Es uno de los productos de uso mas común para la desinfección de superficies de trabajo en los laboratorios y también puede usarse como antiséptico de uso externo (piel) c) Detergentes catiónicos. Se usan diluidos al 1% para desinfectar manos o material y diluidos al menos al 1% para inmersión de ropas y objetos. Suelen añadirse a los productos de limpieza ambiental para aumentar su poder desinfectante. d) Clorofenoles. Son muy eficaces para la limpieza de paredes, sobre todo asociados a detergentes catiónicos. Se usan también para la desinfección de las manos. e) Compuestos yodados. Son potentes bactericidas, viricidad y fungicidas, el mas usado es la povidona yodada que se puede emplear en soluciones jabonosas, alcohólicas o acuosa y a diferentes concentraciones (0,1%, 5%, 10%) f) Glutaraldehido. Se emplea en disolución acuosa al 2% durante 20 – 45 minutos como desinfectante de alto nivel. g) Biguanidas. Se usan en solución alcohólica o acuosa para desinfectar la piel, uno de los más usados en la clorohexidina. h) Oxidantes, como el agua oxigenada que tiene un efecto rápido ya que se descompone por la actividad de la catalasa de las células epiteliales.
- La esterilización. Es un procedimiento que destruye todos los microorganismos de un objeto, superficie o material. Por su agresividad, es un procedimiento que nunca se puede utilizar sobre tejidos vivos. Actualmente muchos de los instrumentos que se necesitan estériles se adquieren de tipo desechable, que llegan con la garantía de calidad de la empresa fabricante. A pesar de ello, hay materiales que se deben esterilizar en el laboratorio. Al igual que hemos visto en la desinfección, existen métodos físicos y métodos químicos de esterilización. - Métodos físicos de esterilización. a) La esterilización por calor seco. El calor seco oxida las proteínas e incluso carboniza la materia orgánica. Podemos aplicarlo de tres formas: Flameado: El material se expone a la llma de un mechero bunsen durante un mínimo de 20 s. Se utiliza en el laboratorio de tubos o matraces de vidrio durante la preparación de cultivos microbianos. Hornos de incineración. En este caso se destruye tanto el microbio como el objeto. Se utiliza para eliminar determinados instrumentos contaminados o cultivados. Estufas de esterilización. Pueden alcanzar los 200ºC. En ellas pueden esterilizarse los objetos de vidrio o de porcelana y los instrumentos metálicos, después de empaquetarlos en cajas metálicas o en bolsas de papel de aluminio. No pueden utilizarse para productos de plástico, goma, tejido u otros materiales que no soporten las altas temperaturas. El procedimiento de uso de las estufas de esterilización es el siguiente: 1. Empaquetamos los objetos, generalmente en bolsas de papel, e indicamos el contenido, escribiéndolo sobre el paquete o con algún tipo de etiqueta o código. 2. Colocamos los paquetes en el interior de la estufa. 3. Ponemos la estufa en marcha y seleccionamos la temperatura y el tiempo adecuado, según el material de que se trate. Normalmente será 200ºC durante un mínimo de dos horas. 4. El aparato se detendrá una vez transcurrido el tiempo que hayamos programado. 5. Esperamos hasta que la temperatura baje por debajo de los 30 ºC. 6. Abrimos finalmente el horno y sacamos el material con cuidado porque todavía estará caliente. 7. Indicamos sobre cada paquete, al menos, el proceso que hemos aplicado y la fecha. Los guardamos sin abrirlos en un lugar donde queden protegidos, para que conserven su esterilidad hasta su uso. b) La esterilización por calor húmedo. Otra posibilidad es que el calor lo proporcione vapor de agua, que tiene dos propiedades muy interesantes: 1. Alta penetración: el vapor de agua caliente mas rápidamente el interior de los objetos que el calor seco. Por tanto, no necesitaremos la misma temperatura que con el calor seco para conseguir el mismo resultado, bastará una mas baja. 2. Facilidad para difundir el calor: el vapor ocupa todo el espacio y permite que el calor llegue uniformemente a todas partes. El proceso de esterilización, a 121ºC y 103 kPa suele durar unos 15 – 20 minutos, aunque el ciclo completo es mucho mas largo, ya que primero hay que conseguir las condiciones interiores adecuadas y posteriormente eliminar el vapor y esperar a que la temperatura baje lo suficiente. En la autoclave se pueden esterilizar objetos de goma, caucho, tejido, cristal, metal, líquidos, etc. Algunas consideraciones importantes en cuanto al uso del autoclave son: 1. El vapor necesita estar en contacto con todas las superficies. Por eso debemos abrir o desmontar todos los instrumentos y demás objetos, y colocarlos en el autoclavede tal forma que el vapor pueda circular entre ellos. 2. El auto clave no puede trabajar a presiones superiores a las que puede resistir. El fabricante debe informar al jefe del laboratorio sobre cuales son estas presiones. 3. Nunca debemos introducir recipientes herméticamente cerrados en el autoclave. 4. No debemos abrir el autoclave antes de que su presión haya igualado a la atmosférica y su temperatura sea inferior a los 90ºC 5. Para vaciar la autoclave, debemos usar guantes de seguridad que protejan de quemaduras. Debemos comprobar la esterilidad. Para ello, existen diversos tipos de indicadores (físicos, químicos y biológicos) que nos permiten verificar la efectividad del sistema.
papel que se colocan en los paquetes que contienen el material que se va a esterilizar. El color del papel cambiará si llega a la temperatura que corresponda, aunque no hay garantía de que esa temperatura se haya mantenido durante el tiempo necesario. c) Indicadores biológicos. Son preparados comerciales que contienen esporas de Bacillus stearothermophilus. Pueden utilizarse para verificar que un procedimiento de esterilización que hemos usado (autoclave, estufa de esterilización, óxido de etileno, etc) ha funcionado correctamente y ha logrado destruir todos los microorganismos, incluidas las esporas. Siempre siguiendo las instrucciones del fabricante, se introducen los envases con las esporas junto al material que se va a esterilizar. Terminado el proceso de esterilización, se deben incubar. Si no crece nada, se debe considerar que la esterilización los ha destruido, es decir, que el procedimiento ha tenido un resultado correcto.
- La contaminación es la introducción en un medio de sustancias que lo hacen inseguro o no apto para ser usado. El medio puede ser un ecosistema, un medio físico o un ser vivo, y el contaminante puede ser una sustancia química o energía. El procedimiento por el cual se eliminan estas sustancias se denomina descontaminación.
- Mantenimiento. Los equipos deben funcionar con total corrección. Para conseguirlo es necesario aplicar procedimientos de limpieza, efectuar las sustituciones de piezas y componentes y verificar que su uso es correcto mediante procedimientos de calibrado y verificación.
- Mantenimiento del material fungible.
- El material desechable es de un solo uso, pero eso no evita que se deban aplicar algunas medidad relativas a su mantenimiento. Sobre todo tendremos en cuenta que los instrumentos se deben almacenar en sus envoltorios de protección. Esto es especialmente importante en el caso de los productos estériles, ya que si lo sacamos del envase perderán esa condición. La mayoría de ellos son de plástico, y se deben depositar en contenedores destinados a esta recogida, siempre que no puedan ocasionar daños a las personas ni al medio ambiente. Pero en ocasiones el instrumento puede conllevar riesgos específicos, debido a: a) Su forma que puede comportar un riesgo físico (bisturíes, agujas y otros instrumentos que puedan cortar o pinchar); en este caso se deben depositar en contenedores rígidos específicos para este tipo de residuos. b) Su contenido o el de los productos con que ha estado en contacto. Según el producto de que se trate, podremos encontrar: c) Riesgo químico. En este caso se debe retirar el producto atendiendo a sus características químico. Posteriormente, y según el producto, se puede depositar el instrumento directamente en el recipiente para plásticos o bien lavarlo antes. d) Riesgo biológico. Según cual sea el agente biológico, se debe eliminar el instrumento como producto que presenta contaminación biológica, o bien desinfectarlo en el laboratorio y eliminarlo después como plástico. Tras su uso, el material reutilizable se debe preparar para un nuevo servicio. Si la suciedad o los microorganismos que pueda tener no se eliminan adecuadamente, al reutilizarlo podemos: a) Obtener resultados erróneos en el trabajo que hagamos, porque los productos que incorporemos reaccionarán con restos presentes en el material. b) Obtener lecturas inexactas en el material volumétrico, ya que si el material está sucio el volumen que ocupe la suciedad nos dará un error en las lecturas que hagamos. c) Contaminamos con gérmenes que hayan proliferado en él. Todos los instrumentos se someten a un proceso de limpieza tras su uso. La limpieza se debe realizar en cuanto sea posible para evitar que se acumulen objetos sucios y que la suciedad se reseque sobre ellos. Según el tipos de suciedad y el uso a que se destina el instrumento tratado se debe guardar, debidamente protegido, hats su siguiente uso. El material que ha sido esterilizado solamente puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada. Sea cual sea el método de esterilización aplicado, el material esterilizado debe quedar empaquetado y etiquetado con la información del proceso a que se ha sometido y con la fecha de esterilización. La duración de la esterilidad de un material no está preestablecida, sino que depende de como se conserve.
El resto del material, una vez limpio, se debe almacenar en el lugar que tenga reservado. De forma, general, deben quedar protegido del polvo en un armario con puertas. También se debe ordenar de forma que se eviten caídas accidentales, especialmente en el caso del material de vidrio.
- Control de calidad del lavado del material de vidrio. El material de vidrio se utiliza ampliamente en cualquier laboratorio, para efectuar mediciones de volúmenes, mezclas, valoraciones ácido-base, etc. Así como para guardar productos. Como es lógico, la presencia de cualquier contaminante en uno de estos instrumentos invalidaría las operaciones que se hayan hecho con él. Por esta razón se presta especial atención a la limpieza de este grupo de materiales y se establece un sistema de control de calidad del lavado, ya que debido a sus características tiene cierta tendencia a retener suciedad en su superficie; además, dada la variedad de productos que puede contener, en ocasiones el lavado estándar no los elimina totalmente y es necesario usar algún disolvente específico, o dejar previamente el material en remojo. Un control básico es la observación del material lavado: si se ven marcas de agua, zonas con reflejos tornasolados o cualquier otro resto, como partículas o pelusas del secado, el lavado habrá sido incorrecto. Este control se suele realizar cada día, y si se observan irregularidades, se repite el lavado y secado de todos los materiales lavados ese día, y se hace constar la incidencia en la hoja de control de calidad. Generalmente se realiza además un control semanal sobre unos cuantos recipientes escogidos al azar. Para cada recipiente: a) Se revisa nuevamente para ver si hay marcas de agua, lo cual indica que el enjuague ha sido insuficiente o que se ha hecho con agua no desionizada. b) Se llena de agua y se observan las paredes: si está limpio, el agua forma una capa uniforme; al vaciarlo, el agua debe discurrir perfectamente y no deben quedar gotitas retenidas. c) Un control adicional que se puede hacer en preparar una solución de bromusulftaleína sódica y enjuagar algunos recipientes con ella. La aparición de coloración rosa es indicativa de la presencia de restos de detergente.
- Mantenimiento del material inventariable. El material inventariable tiene una duración larga, siempre que se cuide convenientemente. Esto supone que: Se deben usar los equipos correctamente, siguiendo las instrucciones del fabricante y exclusivamente para los usos indicados. Se deben efectuar las operaciones de mantenimiento que corresponden a cada equipo. Generalmente algunas de ellas las lleva a cabo el propio personal, pero, periódicamente, debe hacerlo al servicio técnico. Se deban limpiar adecuadamente. Después, los equipos deben protegerse del polvo con una funda o cubierta adecuada.
- El uso correcto. Cada equipo tiene unas especificaciones que se deben tener en cuenta: una temperatura máxima, una capacidad límite, una velocidad mínima o máxima, etc. Vale la pena recordar que el funcinamiento correcto solo queda garantizado si se tienen en cuenta las especificaciones que corresponden al equipo. Para evitar errores, en el laboratorio deben estar los manuales de todos los equipos y, si es el caso, las instrucciones y el protocolo concreto de uso que debe seguir el personal (protocolos normalizados de trabajo). Cualquier persona que use un equipo debe conocer su funcionamiento.
- Las operaciones de mantenimiento. El mantenimiento es especialmente importante en el caso de los equipos de edición, ya que puede haber equipos que aparentemente funcionan bien pero dan mediciones erróneas. Para evitarlo se deben efectuar verificaciones y calibrados periódicos de estos equipos. a) Las verificaciones se hacen efectuando una medida con un producto patrón, cuyo valor para el parámetro medido es conocido (una pesa de peso conocido, el pH de una solución de pH conocido, etc). De esta forma podremos ver si el equipo nos da una lectura correcta. Las lleva a cabo el personal del laboratorio. La ficha de casa equipo especifica la peridiocidad con que deben hacerse (cada vez que se cumple un plazo específico, tras un número de usos, antes de ciertas operaciones, antes de cada uso, etc.)
- Extraemos el plato con cuidado y lo limpiamos con un paño suave humedecido con una solución detergente. Lo aclaramos con otro paño y finalmente lo secamos bien.
- Llevamos a cabo el mismo proceso con las superficies extremas de la balanza.
- Situamos el plato en la balanza y la cubrimos para protegerla del polvo hasta su próximo uso. Baños de agua. Para proceder a la limpieza de los baños seguiremos estos pasos:
- Apagamos y desenchufamos el aparato. Esperamos a que se enfríe el agua si estaba caliente.
- Quitamos la rejilla y la vaciamos de agua.
- Limpiamos la rejilla con agua jabonosa, eliminamos bien todos los restos de suciedad. Aclaramos y secamos cuidadosamente.
- Para eliminar todo el polvo, pasamos por el resto del equipo un paño suave humedecido con una solución detergente y lo secamos bien con un paño seco.
- Volvemos a colocar la rejilla. Si el baño se va a utilizar en breves, lo llenamos de agua; si no, lo dejamos vacío y lo tapamos para protegerlo del polvo. Estufas. Para evitar que se produzcan contaminaciones cruzadas, las estufas se deben limpiar con frecuencia.
- Apagamos y desenchufamos la estufa.
- Retiramos las bandejas y las lavamos una por una.
- Para eliminar todo el polvo, pasamos por el resto del equipo un paño suave humedecido con una solución detergente y lo secamos bien con un paño seco.
- Volvemos a colocar las bandejas en su lugar. ¡Tenlo en cuenta! En la limpieza de todos los equipos deben tener presente: a. No limpiarlos con agua ni con paños humedecidos si están conectados a la red eléctrica. Podrías electrocutarte. b. Consultar en el manual del fabricante que piezas o componentes se pueden retirar y como debe hacerse. No forzar ningún elemento. c. Para los elementos más sensibles (sensores, electrodos, etc), consultar como se deben limpiar y no usar ningún producto químico sobre ellos si no se sabe con certeza que no los va a alterar.
