Proteínas: Estructura, Funciones y Determinación, Resúmenes de Química

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Proteínas :

Proteínas

Estructuras

Biomoléculas

Constan Son

Aminoácidos

formadas

Una o mas

cadenas

polipeptídicas

20 tipos

Cadena

polipeptídica

Si tiene al menos

Aminoácidos

es

Proteína

Macromoléculas

de elevado peso

molecular

Formadas

C H^ O^ N^ S

1 Ingrese al siguiente link (^) https://youtu.be/Ah4EGL24MR Separación de proteínas por diálisis del suero.

Proteínas

Solución

Gran Tamaño

debido

Proteínas

No pueden

atravesar

membranas

semipermeables

Moléculas de

menor PM

Aminoácidos Monosacáridos Urea Creatinina Sales Iones Separadas No pasan por los poros de la membranas son Pasan sin problema alguno https://www.youtube.com/watch?v=NoMwLYphFS

Membrana de diálisis (celofán) Solvente (agua destilada) Suero sanguíneo Experimento 1 Separación de Proteínas (Diálisis del Suero) Inicio Equilibrio

Experimento 1 Separación de Proteínas (Diálisis del Suero) c) Al notar algo de precipitado en el interior de la bolsa, vaciar su contenido a un tubo de centrifuga y centrifugar por unos 5 minutos a 2500 rpm. d) Separar el sobrenadante en un tubo de ensayo y añadirle 5 mL de ácido tricloroacético al 10%. Sobrenadante Precipitado Sobrenadante Precipitado

2 Solubilidad de la caseína de diferentes pH https://youtu.be/dvBrqiAUDDc Ingrese al siguiente link

Punto Isoeléctrico

(PI)

pH

es

Son iguales

Donde

Aminoácido o

proteína

Cargas positivas y

cargas negativas

De un

Carga neta

de cero

Obteniéndose

Proteínas

Alto contenido Si el pH del medio es inferior al PI, la proteína presenta carga neta positiva. Si el pH del medio es superior al PI, la proteína presenta neta carga negativa. Histidina Lisina Arginina Aminoácidos ácidos Citocromo C Ejm. PI alto Aminoácidos básicos PI=10.7 tienen Ac. Aspártico Ac. glutámico PI bajo tienen Pepsina PI= Ejm. Si el pH del medio coincide con el PI, la proteína presenta una solubilidad mínima, algunas pueden precipitar.

Experimento 2 Solubilidad de la caseína de diferentes pH

A través de la

turbidez

Procedimiento

Caseína al 0.5% en acetato de sodio 0.1N Añadir 1 mL Mezclar bien y observar turbidez o precipitación, inmediatamente y a los 15 minutos. Medir el pH de cada uno de los tubos.

Experimento 2 Solubilidad de la caseína de diferentes pH

A través de la

turbidez

Resultados

Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Relacion Sal/Acido pH (teórico) pH (práctico) Insolubilidad 15 min 𝑉 (^) 1 𝑥 𝐶 1 = 𝑉 2 𝑥 𝐶 2 Ejemplo Tubo 1 Acido 9 𝑚𝐿 𝑥 0.178 𝑁 = 10 𝑚𝐿 𝑥 𝐶 2 𝐶 2 = 0 .16 𝑁 Sal 𝑉 (^) 1 𝑥 𝐶 1 = 𝑉 2 𝑥 𝐶 2 1 𝑚𝐿 𝑥 0.1 𝑁 = 10 𝑚𝐿 𝑥 𝐶 2 𝐶 2 = 0 .01 𝑁 𝑆𝑎𝑙 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑜 =

Relación Sal/Acido pH Teórico

𝑝𝐻 = 𝑝𝑘𝑎 + log

[ 𝑠𝑎𝑙 ]

[ 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 ]

𝑝𝐻 =4.74 + log

[0.01]

[0.16]

Proteínas

Determinación de

Proteínas Totales

Método más utilizado

Reacción de

Biuret

Suero

sanguíneo

Determinación

en laboratorio

Muy utilizada a

nivel clínico

Complejo Violeta

Reactivo

Biuret

Péptidos con más de dos enlaces peptídicos dan positivo a esta reacción Es una Urea Biuret

180 oC NH 3 Cu+ 2 Medio alcalino Cu+ O H 2 N H 2 N H N H 2 N O H 2 N O O N H (^2) N H N H (^2) O O N H (^2) N H N H (^2) O H 2 N O H 2 N H N O H 2 N O H 2 N H N O

Cu+ C N H C C N H C O O R R C H N C C H N O O C R R

Proteínas

Proteínas

totales en suero

sanguíneo

VN: 6 – 8 g% o g/dL

< 6 g%

Hipoproteinemia Hiperproteinemia

> 8 g%

Albumina

Globulinas

Transporte

Hormonas Bilirrubina Metales Vitaminas Medicamentos

Mantiene presión oncótica

Regula el pH

La presión oncótica es un tipo de presión osmótica que ocurre entre los capilares de los vasos sanguíneos y el líquido intersticial.

Funcionamiento

del hígado

Coagulación

sanguínea

Combaten

infecciones

Lípidos

Experimento 3 Determinación de proteínas totales del suero sanguíneo c) Dejar en reposo 30 minutos y medir la absorbancia en el fotocolorímetro utilizando filtro verde.

Procedimiento

d) Preparar al mismo tiempo un blanco, que llevara 1 mL de agua destilada en lugar de suero diluido. 30 minutos 1.0 mL 4.0 mL 30 minutos e) El estándar se prepara de la misma forma que la muestra, solo que en lugar de suero sanguíneo, se usa una solución de proteínas 7g%.

Experimento 3 Determinación de proteínas totales del suero sanguíneo

Resultados

Absorbancia bruta Absorbancia neta

Tubo Muestra (M) 0.328 0,

Tubo Blanco (B) 0.073 -

Tubo Estándar (St) 0.295 0,

Factor de Calibración: ……[St]…/ ABS St

Concentración de proteína de la muestra de suero usado: …31,5 x 0,255 =g por 100 mL de suero