TOTAL PROTEIN
REF 1153005 REF 1153010 REF 1153020
2 x 50 mL 4 x 100 mL 4 x 250 mL
CONTENIDO CONTENIDO CONTENIDO
R1.Rea ctivo 2 x 5 0 mL R1.Reactivo 4 x 100 mL R1.Reactivo 4 x 250 mL
CAL. Patrón 1 x 3 mL CAL. Patrón 1 x 3 mL CAL. Patrón 1 x 3 mL
Sólo para uso diagnóstico in vitro
PROTEINAS
TOTALES
Método colorimétrico
PUNTO FINAL
TECNIC
A
1. Pipetear en tubos rotulados:
TUBOS
Blanco
Muestra
CAL.Patrón
R1.Biuret
Muestra
CAL.Patrón
1,0 mL
−
−
1,0 mL
20 μL
−
1,0 mL
−
20 μL
2.
3.
Mezclar e incubar los tubos 10 minutos a 37ºC.
Leer la absorbancia (A) de la muestra y el patrón a 540 nm
frente al blanco de reactivo.
El color es estable como mínimo 1 hora.
CALCULOS
A Muestra
———— x C Patrón = g/dL proteínas totales
A Patrón
Muestras con concentraciones de proteinas totales superiores a 12
g/dL deben diluirse 1:2 con solución salina y repetir el ensayo.
Multiplicar los resultados por 2.
Para expresar los resultados en unidades SI aplicar: g/dL x 10 = g/L.
VALORES DE REFERENCIA4
Suero, plasma
Adultos
6,6 - 8,7 g/dL (66 - 87 g/L)
Prematuros
3,6 - 6,0 g/dL (36 - 60 g/L)
Recien nacidos
5,3 - 8,9 g/dL (53 - 89 g/L)
Gestantes
Concentración baja de 69 a 61 g/L
Las proteínas totales séricas se hallan disminuídas de 4 a 8 g/L en
pacientes recostados en relación a la tasa de sujetos no
encamados.
Plasma
Las proteínas plasmáticas se hallan aumentadas de 2 a 4 g/L
debido a la presencia de fibrinógeno en la muestra.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de
referencia.
FUNDAMENTO
En la reacción del biuret se forma un quelato entre el ión Cu2+ y los
enlaces peptídicos de las proteínas en medio alcalino con la
formación de un complejo coloreado violeta cuya absorbancia se
mide fotométricamente. La intensidad del color producido es
proporcional a la concentración de proteínas en la muestra.1-2
Cu2+ + Proteína sérica Complejo cobre-proteína
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
R1
Reactivo biuret. Sulfato cúprico 6 mmol/L, tartrato-sódico-
potásico 21 mmol/L, ioduro potásico 6 mmol/L, hidróxido
sódico 0,75 mol/L. C R:34
CAL
Patrón de Proteina
.
Albúmina bovina 7 g/dL (70 g/L).
El valor de concentración es trazable al Material de
Referencia Certificado 927.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8ºC.
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta. Mantener los frascos cerrados,
protegidos de la luz y evitar la contaminación durante su uso.
Descartar si se observan signos de deterioro:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancia del Blanco (A) a 540 nm > 0,150 en cubeta de 1 cm.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Reactivo y el Patrón están listos para su uso.
MUESTRAS
Suero o plasma heparinizado.
Las proteínas totales son estables en suero y plasma 1 semana a
temperatura ambiente, como mínimo 1 mes a 2-8ºC y hasta 2
meses a –20ºC.
INTERFERENCIAS
−
−
−
−
−
Lipemia (intralipid) puede afectar los resultados.
Bilirrubina (20 mg/dL) no interfiere.
Hemoglobina puede afectar los resultados.
Otros medicamentos y sustancias pueden interferir3.
Los dextranos, empleados como expansores plasmáticos en el
tratamiento de la presión sanguínea baja, forman un complejo que
precipita al interaccionar con el cobre y el tartrato del reactivo.
EQUIPO ADICIONAL
−
−
−
Fotómetro o colorímetro para mediciones a 540 ± 20 nm.
Unidad termostatizada ajustable a 37ºC.
Pipetas de volumen variable para reactivos y muestras.
pH >12
25-37ºC
QUALITY SYSTEM CERTIFIED
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