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**Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II PRÁCTICA NO. 1 UNIDAD 1 INTRODUCCION AL ESTUDIO DE LA VIROLOGÍA HUMANA NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD
- CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:** Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los que allí se desempeñan frentre a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterios. En ese entendido la OMS se dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en : Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es necesario para minimizar riesgos : ➢ El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano. ➢ Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado. ➢ Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas. ➢ No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio. Protección personal: ➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio. ➢ Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados los guantes, se retiraran de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos. ➢ El personal y los estudiantes se lavaran las manos después de manipular muestras y antes de salir del laboratorio. ➢ Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial. ➢ Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio. ➢ Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias. ➢ Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio. ➢ No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio. Procedimientos: ➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. ➢ No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas. ➢ Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de aerosoles. ➢ Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e incidentes. ➢ Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames. ➢ Los líquidos contaminados deberán descontaminarse ( por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Zonas de trabajo del laboratorio: ➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo. ➢ Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo. ➢ Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar. ➢ Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos. Clasificación de los residuos: ➢ Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos. ➢ Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales, cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes corporales. ➢ Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes desechables. ➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos
2. COMPETENCIA (S) ✓ Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología en relcion con su contexto ✓ Investiga la metodologías correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio y la solucion de problemas.
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II PRÁCTICA NO. 2 UNIDAD 1 INTRODUCCION AL ESTUDIO DE LA VIROLOGÍA HUMANA OBTENCION DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas. Una parte importante de esa actividad consiste en el aislamiento, la identificación y la determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos de los microorganismos causales de estas enfermedades. Otra parte importante de la actividad de un laboratorio de microbiología consiste en la detección de anticuerpos, antígenos y ácidos nucleícos en diversas muestras (sangre, líquidos estériles, orina, etc.), técnicas que resultan muy útiles en el diagnóstico precoz de determinadas enfermedades infecciosas. La gran diversidad de muestras clínicas y de métodos diagnósticos aplicables, son dos aspectos que diferencian el laboratorio de microbiología de otros laboratorios clínicos. Por tanto es necesario tener un protocolo que permita la adecuada manipulación de muestras que serán enviadas a otro laboratorio y los resultados obtenidos estarán, estrechamente relacionados con el éxito del informe final. INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS. Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por escrito). La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso. Recolección de la muestra debe realizarse en frasci esteril. Etiquetar correctamente las muestras. Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible. Toda muestra deberá manejarse como si fuera potencialmente patógena. Algunas pruebas virológicas pueden realizarse en laboratorios de hospitales grandes, pero la mayor parte se llevan a cabo en centros de referencia especializados. Las muestras requeridas pueden ser: - Sangre coagulada para serologia - LCR - Heces - Fluidos de vesiculas - Debe recogerse sangre para la seologia durante la fase aguda de la enfermendad despues de un intervalo de 10 dias.
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2. COMPETENCIA (S) ✓ Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico virologico ✓ Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico, relacionado con el campo de trabajo del profesional.
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- Elabore una orden de laboratorio para extracción de una muestra para un examen microbiológico
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II PRÁCTICA NO. 3 UNIDAD 1 INTRODUCCION AL ESTUDIO DE LA VIROLOGÍA HUMANA METODOS DE DIAGNOSTICO VIRAL
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse en DIRECTOS e INDIRECTOS , según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus constituyentes (antígeno o genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del huésped en el curso de la infección. Gran parte de las técnicas utilizadas en el diagnóstico clínico se basan en pruebas serológicas que identifican anticuerpos específicos frente a diversas proteínas antigénicas. Sin embargo, existen circunstancias en las cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente la infección viral (tratamientos específicos, medidas profilácticas, etc.). En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al desarrollo de la seroconversión, siendo esta prueba la única evidencia de la exposición al virus cuando no existe aumento de los niveles de anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos). Igualmente la detección del genoma viral puede favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su confirmación. En la última década se han desarrollado una serie de técnicas para el diagnóstico viral basadas en la detección de ácidos nucleicos. De ellas la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada. En el momento actual, la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más sensibles tecnologías de detección de antígenos y de investigación de ácidos nucleicos con el propósito de lograr un diagnóstico viral más rápido. El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta tendencia que hace de la identificación rápida, sensible y específica de los virus, una necesidad. I. METODOS DE DIAGNOSTICO VIRAL:
- Confirmar el diagnostico clinico
- Seleccionar un tratamiento adecuado
- Monitorizar la evaluacion de la enfermedad
- Hacer un seguimiento epidemiologico de la enfermedad Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse
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2. COMPETENCIA (S) ✓ Identifica los metodos de diagnostico virologico ✓ Interpreta los resultados de las pruebas para confirmar un diagnostico. 3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS EQUIPOS y MATERIALES Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones 1 Data display 1 Pieza Para un grupo de practica 25 estudiantes 4. TECNICA O PROCEDIMIENTO Trabajo en grupos 5 5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos 6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS No se aplica 7. CUESTIONARIO
- Mencione la utilizadad de la prueba de ELISA para el diagnostico virologico
- Investigue otros metodos empleados en el diagnostico de las infecciones virales UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II PRÁCTICA NO. 4 UNIDAD 1 INTRODUCCION AL ESTUDIO DE LA VIROLOGÍA HUMANA SEMINARIO: ANTIVIRALES
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO Dado que los virus comparten muchos de los procesos metabólicos de la célula huésped es difícil encontrar fármacos que sean selectivos para el patógeno. Sin embargo existen algunas enzimas que son especificas de los virus que son los posibles objetivos para el tratamiento medico. Los fármacos antivíricos actualmente disponibles sólo son eficaces mientras el virus se esta replicando. Inhibición de la penetración en la célula huésped ❖ Amantadina : actúa sobre el virus influenza A. Inhibe la formación de la cubierta ,su efecto principal es inhibir la decapsidacion viral o el desensamblaje del virion durante la endocitosis. ❖ Rimantadina : derivado 4-10 veces mas activa que la amantadina. ❖ Oseltamivir : inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. ❖ Zanamivir :inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza. ❖ Docosanol : interfiere en la fusion del VHS-1 y VHS-2 a las membranas de las celulas del huesped. Es de uso topico. ❖ La gammaglobulina : Neutraliza los virus Inhibidores de la DNA polimerasa : ❖ Aciclovir un derivado de la guanosina, inhibe selectivamente la ADN polimerasa vírica; eficaz contra herpesvirus; mínimos efectos indeseados. ❖ Ganciclovir, también un derivado de la guanosina, se fosforila y posteriormente se incorpora en el ADN vírico impidiendo su replicación; utilizado en la infección por citomegalovirus (CMV), especialmente en pacientes con SIDA y retinitis por CMV; puede tener efectos indeseados graves. ❖ Vidarabina, un derivado de la adenosina, es un inhibidor relativamente selectivo de la ADN polimerasa vírica; eficaz contra herpes simple y varicela zoster; puede tener efectos indeseados graves. ❖ Tribavirin es similar a la guanosina y se cree que interfiere con la síntesis del ARNm vírico; puede inhibir a muchos virus ADN y ARN. ❖ Foscarnet i nhibe la ADN polimerasa vírica fijándose al lugar de unión del pirofosfato; es bastante eficaz en la infección por CMV. Inhibidores de la transcriptasa inversa ITI: ❖ Zidovudina (AZT) , un análogo de timina, es relativamente eficaz en VIH/ SIDA.
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- Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH?
- Investigue cual es el tratamiento para un paciente con SIDA?
- Elabore un cuadro con tratamiento de las enfermedades virales UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE SERVICIOS DE LABORATORIO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. PRÁCTICA NO. 5 UNIDAD 2 VIRUS CON GENOMA DNA ADENOVIRUS Y PAPILOMAVIRUS
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO: ADENOVIRUS. Virus ADN icosaédrico con envoltura, presencia de espículas de la Familia Adenoviridae. En porcentaje es uno de los últimos virus causante de las Infecciones Respiratorias Agudas (IRAs), pero sus características clínicas son tan particulares, que aunque parece de baja frecuencia, más de una vez hemos debido haber visto casos. Su nombre se debe a que fue aislado en 1953 de una muestra quirúrgica de las adenoides, órganos linfoides que se encuentran detrás de la lengua, de ahí el nombre. Diagnostico. Su frecuencia es durante todo el año, su diagnóstico es clínico, es decir la observación de los síntomas, que duran de uno a tres días generalmente, que son síntomas de un Resfriado Común,a saber: - Malestar general - Sin fiebre o leve, - Sin estornudos - Odinofagia moderad o gave - Faringitis - Tos moderada - Rinorrea leve Además de estos síntomas respiratorios, se presentan otros como: - Conjuntivitis o queratoconjuntivitis - Gastroenteritis y diarrea - Y a veces cistitis hemorrágica aguda Además, el diagnostico serológico es con ELISA, Inmunoflurescencia. Solo confines epidemiológicos se podrá realizar mediante sondas genéticas por la detección de genoma por la reacción de polimerasa en cadena en tiempo real (rt-PCR). Tratamiento. Dependiendo del tipo de Adenovirus, se debe realizar el tratamiento, que generalmente es sintomático:
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. Además, el diagnostico serológico es con ELISA, Inmunoflurescencia. Solo confines epidemiológicos se podrá realizar mediante sondas genéticas por la detección de genoma por la reacción de polimerasa en cadena en tiempo real (rt-PCR). Tratamiento. La verrugas cutáneas tieien tratamiento con sustancias químicas, de la siguiente manera:
- Utilización de nitrato de plata, aplicación directa a la lesión
- Utilización de ácido acético, aplicación directa a la lesión
- Utilización de nitrógeno líquido, aplicación directa a la lesión De esta manera, se elimina la verruga, teniendo el cuidado de que no se infecte y de que no queden restos de la misma. Capitulo 4 1 - 42 Murray, Patrick. Rosenthal, Ken. Pfaller, Michael. Microbiología Médica. Ed Elsevier. 8º Ed 2017 2. COMPETENCIA (S) ✓ Identifica los virus causantes de infecciones por Adenovirus ✓ Identifica los virus causantes de infecciones por Papilomavirus ✓ Aplicara el tratamiento apropiado para cada patologia. 3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS EQUIPOS y MATERIALES Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones 1 Data display 1 Pieza Para un grupo de practica 25 estudiantes 4. TECNICA O PROCEDIMIENTO Dependiendo de la decisión del facilitador, se pueden emplear uno de los siguientes métodos pedagógicos: Control de lectura con artículos científicos. Análisis de casos clínicos. Exposicion grupal de 5 estudiantes. 5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA Dos periodos de 50 minutos..
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5.
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS No se aplica. 7. CUESTIONARIO 1. Realizar un cuadro de las tres diversas afecciones principales de los Adenovirus (resfriado común, conjuntivitis y gastroenteritis) con sus diferentes serotipos. 2. Realizar un cuadro de las afecciones principales del papilomavirus con sus caractersiticas y diferentes serotipos.
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- Herpes Virus Tipo 8 asociado al Sarcoma de Kaposi. En cualquier parte del cuerpo: Mácula, pápulas muy grandes y tumoraciones. Además, el diagnostico serológico es con ELISA, Inmunoflurescencia. Solo confines epidemiológicos se podrá realizar mediante sondas genéticas por la detección de genoma por la reacción de polimerasa en cadena en tiempo real (rt-PCR). Tratamiento. Dependiendo del tipo de Herpesvirus, se debe realizar el tratamiento, que generalmente es sintomático, para aliviar los síntomas y dependiendo del médico tratante será Aciclovir:
- Medicamentos sitomáticos, como Paracetamol o Ibuprofeno como antiinflamatorio y analgésico, más un anhistamínico que inhibe el prurito.
- Aciclovir: Antiviral específico para infección Herpes, que acorta el tiempo de incubación, pero no cura del tipo de Heerpes. De esta manera, se alivian los síntomas, los cuales no durán mas de una semana, al ser una infección aguda viral, excepto el Citomegalovirus y el Sarcoma de Kaposi. PARVOVIRUS. Virus ADN icosaédrico sin envoltura, sin presencia de espículas, de la Familia Parvoviridae. Se aisló por primera vez en 1975, en Londres, del suero de un paciente con Hepatiris B que era el paciente 19; de tal manera fue bautizado como Parvovirus B19, que es el representante de éste grupo. Su nombre se debe a que en latín, el término parvo significa “pequeño”, por el tamaño de los mismos (de 20 a 25nm), de ahí el nombre. Diagnostico. Eritema infecciosio es llamada la “Quinta Enfermedad”, la característica del Parvoviris B19 en niños:
- Malestar general
- Exantema en las mejillas (mejillas abofeteadas)
- Despues exanetema generalizado
- Febrícula Generalmente son benignas.
Código de registro: RE- 10 - LAB- 035 Version 5. Eritema infecciosio es llamada la “Quinta Enfermedad”, la característica del Parvoviris B19 en adultos:
- Malestar general
- Exantema bastante raro
- Más frecuentes artritis en manos y rodillas
- Febrícula Generalmente son beningnas. Y como es congénita, el producto puede padecer una de las siguinetes patologías:
- Crisis Aplásica Transitoria
- Aplasia Eritrocítica Pura
- Hidropesía Fetal Generalmente son malignas. Además, el diagnostico serológico es con ELISA, Inmunoflurescencia. Solo confines epidemiológicos se podrá realizar mediante sondas genéticas por la detección de genoma por la reacción de polimerasa en cadena en tiempo real (rt-PCR). Tratamiento. Dependiendo del tipo de patología, si es Eritema Infecciosos, se debe realizar el tratamiento, que generalmente es sintomático, para aliviar los síntomas:
- Medicamentos sitomáticos, como Paracetamol o Ibuprofeno como antiinflamatorio y analgésico, más un anhistamínico que inhibe el prurito. En el caso de las afecciones congénitas, el tratamiento debe ser de acuerdo a la sintomatología precisa, y a la evolución del paciente. Capitulo 4 3 - 45 Murray, Patrick. Rosenthal, Ken. Pfaller, Michael. Microbiología Médica. Ed Elsevier. 8º Ed 2017 2. COMPETENCIA (S) ✓ Identifica los virus causantes de infecciones por Herpesvirus ✓ Identifica al virus causante de infecciones por Parvovirus ✓ Aplicara el tratamiento apropiado para cada patologia. 3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
