¡Descarga microbiology presentation y más Tesis en PDF de Patología solo en Docsity!
Підготували презентацію студентки 3 курсу, І медичного факультету, 13109 група Бойко Анастасія Сергіївна Кисіль Луїза Василівна
Особливості діагностики. Мікроскопія.
Культивування. Серологія.
Патогенні гриби та актиноміцети — це мікроорганізми, які можуть
викликати важкі інфекції у людини. Вони характеризуються:
- (^) Повільним ростом у порівнянні з бактеріями.
Різноманіттям морфологічних форм (дріжджоподібні, плесневі гриби,
грибоподібні актиноміцети).
- (^) Здатністю викликати системні та локальні інфекції, особливо у
імуносупресованих пацієнтів.
- Діагностика патогенних грибів та актиноміцетів 1.1 Клінічні ознаки - (^) Гриби: ⚬ (^) Мікози шкіри і слизових (кандидоз, дерматофітії) ⚬ (^) Системні мікози (аспергільоз, гістоплазмоз, криптококоз)
- (^) Актиноміцети: ⚬ (^) Хронічні гнійно-некротичні процеси ⚬ (^) Утворення свищів з виділенням зернистого вмісту (“sulfur granules”)
1) Метод KOH 10–20% (класика мікології) Принцип: KOH руйнує білкові компоненти тканин і клітин людини. Хітинова клітинна стінка грибів — не руйнується, тому гриб видно ідеально. Як проводять: 1.На предметне скло кладуть шматочок матеріалу (лусочки, волосся). 2.Додають 1–2 краплі 10–20% KOH. 3.Накривають покривним склом. 4.Злегка підігрівають препарат (не кип’ятити), щоб процес лізису пришвидшити. 5.Чекають 5–15 хв. 6.Дивляться під мікроскопом при ×100, ×400.
Що бачимо:
- (^) міцелій (септи/відсутність
септ),
- (^) псевдоміцелій,
- (^) хламідоспори.
Значення :
Швидко підтверджує
поверхневий мікоз
(дерматофітії, кандидоз)
- Фарбовані препарати Грам
- (^) гриби грампозитивні (фіолетові) → товста клітинна стінка. Лактофуксин (Lactophenol Cotton Blue) Стандарт для пліснявих грибів. Принцип: Фенол убиває гриб, молочна кислота консервує, бавовняний синій фарбує стінку. Використання:
- (^) для мікроскопії культур на Сабуро;
- (^) для оцінки спор та конідієносців. Метиленовий синій Просте контрастування. Індійське чорнило (Іndia ink) Метод для Cryptococcus neoformans. Принцип: Фон чорний, капсула прозора → видно «ореол». PAS-реакція Фарбує полісахариди клітинної стінки в яскраво-червоний. Метенамін-срібло (GMS) «Чорний гриб на зеленому фоні». Дає чітку візуалізацію тонких ниток міцелію.
2. Чапека-Докс (Czapek-Dox agar, середовище Чапека) 👉 Для чого він? Це бідне за складом середовище, на якому добре ростуть Aspergillus та інші плісняві гриби. Чому саме “бідне”?
- (^) Воно містить мінеральні солі та сахарозу.
- (^) Більшість бактерій на ньому не росте.
- (^) Aspergillus любить такі умови → росте швидко й утворює гарні спороносні структури. Навіщо це використовують? Щоб легко і чітко побачити мікроскопічні ознаки Aspergillus. 1. Corn meal agar (кукурудзяно- борошняний агар) 👉 Для чого він? Щоб Candida albicans утворила хламідоспори — це її унікальна ознака. Чому це важливо? Candida albicans і Candida non-albicans (C. glabrata, C. tropicalis, C. krusei) зовні дуже схожі. Але тільки C. albicans утворює хламідоспори. Як це виглядає?
- (^) колонія Candida переносять на Corn meal agar,
- (^) інкубують,
- (^) під мікроскопом бачать круглі товстостінні хламідоспори. 3. Агар Діксона (Dixon agar) 👉 Для чого він? Для культивування Malassezia — грибів, які викликають лупу, pityriasis versicolor (висівкоподібний лишай). Чому їм потрібне спеціальне середовище? Malassezia — унікальні, тому що:
- (^) вони ліпідазалежні,
- (^) НЕ ростуть без жирів у середовищі. Що містить агар Діксона?
- (^) олії,
- (^) ліпіди,
- (^) жовчні солі — все, чим харчується Malassezia. 4. Середовища з циклогексимідом 👉 Для чого вони? Щоб пригнічувати ріст звичайних сапрофітних (побутових) грибів, які можуть «забруднити» зразок. Чому це важливо? Коли беруть зішкріб шкіри/волосся / ґрунт, там завжди є:
- (^) пліснякі гриби з зовнішнього середовища,
- (^) звичайні сапрофіти. Циклогексимід блокує їх ріст → залишається тільки патогенний гриб.
Серологія — це виявлення у крові:
- (^) антитіл (IgM, IgG) до грибів
- (^) компонентів клітинної стінки (манан, β-D- глюкан) Серологія потрібна тоді, коли:
- (^) гриб росте дуже повільно
- (^) культура може бути негативною, але інфекція — є
- (^) уражені глибокі органи (легені, кров) СЕРОЛОГІЧНА ДІАГНОСТИКА ГРИБКОВИХ ІНФЕКЦІЙ
👉
2. Виявлення антигенів грибів (більш точний метод!) Антиген добре виявляється при активному процесі, навіть коли антитіл ще немає. ✔
- Визначення манану (Candida) Манан — компонент клітинної стінки дріжджів. Метод: ELISA на антиген. Навіщо: рання діагностика інвазивного кандидозу. Чутливість: висока у пацієнтів у реанімації, імунодефіцит. ✔
- Галактоманан (Aspergillus) Ключовий тест у гематології. Принцип:
- (^) Aspergillus при рості виділяє галактоманан у кров
- (^) його ловлять антитілами в ELISA Матеріал: кров або бронхоальвеолярний лаваж (БАЛ). Застосування: інвазивний аспергільоз. Перевага: позитивні результати за 5–7 днів до рентгенологічних змін. ✔
- Капсульний антиген Cryptococcus — test Cryptococcal Antigen (CrAg) Найточніший серологічний тест у мікології. Як проводять:
- (^) латекс-аглютинація або ІФА на криптококовий полісахарид
- (^) дуже висока чутливість Застосування:
- (^) криптококовий менінгіт
- (^) у ВІЛ-хворих як скринінг
🔍
- Тест на β-D-глюкан (BDG test) Це компонент клітинної стінки багатьох грибів, окрім:
- (^) Mucor, Rhizopus (мукороміцети)
- (^) Cryptococcus (має капсулу з глюкуроноксиломанану) Метод: колориметричний тест. Перевага: дуже чутливий → підходить для раннього виявлення системного мікозу. Недолік: неспецифічний (показує, що гриб «десь є»). 🔍
- Преципітаційні реакції (Оухтерлоні) У гелі прорізають лунки → в одну лунку антиген, в іншу — антитіла → у місці зустрічі утворюється лінія преципітації. Використовують для:
- (^) Aspergillus (алергічні форми)
- (^) Histoplasma
- (^) Coccidioides Добре підходить для діагностики хронічних форм. 🔍
- Комбіновані тест-системи (Rapid tests) Наприклад:
- (^) CrAg LFA (криптокок)
- (^) GM-LFA (галактоманан швидкий тест) Перевага — результат за 10–20 хв.
Thank you
very
much!
www.reallygreatsite.com