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Muestras Biológicas.., Guías, Proyectos, Investigaciones de Biología

Las muestras de tejidos a estudiar al microscopio generalmente se obtienen por medio de: 1. Necropsia: examen de tejidos de un organismo muerto. 2. Biopsia: examen u obtención de tejidos de un organismo vivo (paciente); puede ser de varios tipos: sacabocado, punción.

Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2016/2017

Subido el 05/10/2022

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Práctica No. 2
PREPARACION DE MUESTRAS BIOLOGICAS
Objetivos
Explicar la función en la tinción con hematoxilina y eosina
Tomar una muestra para estudio citológico
Hacer el estudio macroscópico de sangre y semen
Observar las células sanguíneas y espermáticas bajo el microscopio
Introducción
Las muestras de tejidos a estudiar al microscopio generalmente se obtienen por medio de:
1. Necropsia (del griego necros,muerto, y opsis, visión): examen de tejidos de un organismo
muerto.
2. Biopsia (del griego bios, vida, y opsis, visión): examen u obtención de tejidos de un
organismo vivo (paciente); puede ser de varios tipos: sacabocado, punción.
La mayoría de las células y matrices extracelulares de los tejidos y órganos humanos son
incoloras. Las características morfológicas de los tejidos de interés pueden ser examinadas
con el microscopio óptico, cuando son teñidas. En histología los colorantes más empleados
para facilitar la visualización de las distintas estructuras y para demostrar diferencias físicas
y químicas entre los componentes celulares se encuentran la tinción de Hematoxilina-Eosina
(para histología y anatomía patológica), la de May-Grünwald-Giemsa y la de Wright (estas
últimas para la sangre y el tejido hematopoyético).
Las características más relevantes de los colorantes son las siguientes:
a) Absorben luz en el espectro visible (400-700 nm)
b) Poseen al menos un grupo cromóforo. Los cromóforos son los grupos funcionales de la
molécula responsables de la absorción de la radiación electromagnética de longitudes de onda
variables, dependiendo de la energía de las nubes de electrones.
La hematoxilina se utiliza para ilustrar los detalles nucleares en las células. La hematoxilina
se une intensamente a las cargas negativas(aniones), como los ácidos. Es por esto que se une
fuertemente al ADN (ácidodesoxirribonucleico). La tinción con hematoxilina tiñe de color
azul los núcleos. La profundidad de la coloración no solo está relacionada con la cantidad de
ADN en los núcleos, sino también con el tiempo durante el que la muestra se deje en
hematoxilina. La hematoxilina es un colorante razonablemente simple de preparar. El propio
colorante se extrae del árbol Haematoxylon campechianum.
La eosina es la contratinción más comúnmente utilizada que distingue entre el citoplasma y
los núcleos de las células. Suele ser rosa, con diferentes tonos de rosa para diferentes tipos
de fibras de tejido conjuntivo.
En esta sesión de laboratorio se teñirán muestras biológicas como la muestra de sangre y de
semen. Los análisis de laboratorio de muestra sangre pueden revelar información importante
sobre la salud del paciente. El análisis de semen es un examen para evaluar fertilidad.
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Práctica No. 2 PREPARACION DE MUESTRAS BIOLOGICAS Objetivos

  • Explicar la función en la tinción con hematoxilina y eosina
  • Tomar una muestra para estudio citológico
  • Hacer el estudio macroscópico de sangre y semen
  • Observar las células sanguíneas y espermáticas bajo el microscopio Introducción Las muestras de tejidos a estudiar al microscopio generalmente se obtienen por medio de: 1. Necropsia (del griego necros ,muerto, y opsis , visión): examen de tejidos de un organismo muerto. 2. Biopsia (del griego bios, vida, y opsis, visión): examen u obtención de tejidos de un organismo vivo (paciente); puede ser de varios tipos: sacabocado, punción. La mayoría de las células y matrices extracelulares de los tejidos y órganos humanos son incoloras. Las características morfológicas de los tejidos de interés pueden ser examinadas con el microscopio óptico, cuando son teñidas. En histología los colorantes más empleados para facilitar la visualización de las distintas estructuras y para demostrar diferencias físicas y químicas entre los componentes celulares se encuentran la tinción de Hematoxilina-Eosina (para histología y anatomía patológica), la de May-Grünwald-Giemsa y la de Wright (estas últimas para la sangre y el tejido hematopoyético). Las características más relevantes de los colorantes son las siguientes: a) Absorben luz en el espectro visible (400-700 nm) b) Poseen al menos un grupo cromóforo. Los cromóforos son los grupos funcionales de la molécula responsables de la absorción de la radiación electromagnética de longitudes de onda variables, dependiendo de la energía de las nubes de electrones. La hematoxilina se utiliza para ilustrar los detalles nucleares en las células. La hematoxilina se une intensamente a las cargas negativas(aniones), como los ácidos. Es por esto que se une fuertemente al ADN (ácidodesoxirribonucleico). La tinción con hematoxilina tiñe de color azul los núcleos. La profundidad de la coloración no solo está relacionada con la cantidad de ADN en los núcleos, sino también con el tiempo durante el que la muestra se deje en hematoxilina. La hematoxilina es un colorante razonablemente simple de preparar. El propio colorante se extrae del árbol Haematoxylon campechianum. La eosina es la contratinción más comúnmente utilizada que distingue entre el citoplasma y los núcleos de las células. Suele ser rosa, con diferentes tonos de rosa para diferentes tipos de fibras de tejido conjuntivo. En esta sesión de laboratorio se teñirán muestras biológicas como la muestra de sangre y de semen. Los análisis de laboratorio de muestra sangre pueden revelar información importante sobre la salud del paciente. El análisis de semen es un examen para evaluar fertilidad.

La sangre es un tejido conectivo que transporta las sustancias solubles hacia y desde todas las células del cuerpo. Las células sanguíneas más abundantes son los eritrocitos (4.5 a 5 × 10^6 /ml de sangre), constituyen 99% de la población celular. Los leucocitos son sólo de 5 000 a 9 000/ml de sangre y se dividen en granulocitos y agranulocitos. Los granulares son los neutrófilos, los eosinófilos y los basófilos; los agranulocitos son los linfocitos y los monocitos. El test de eosina en el análisis de fertilidad se basa en que las células vivas rechazan la eosina, la membrana de espermatozoides muertos puede ser atravesada por el colorante. Con las nuevas técnicas de reproducción asistida (inyección espermática intracitoplasmática), las técnicas de vitalidad son necesarias para seleccionar un espermatozoide vivo, el cual puede ser usado para la fertilización. Figura 2. Esquema de un espermatozoide. Procedimiento: A. EXAMEN DE LA MUESTRA DE SEMEN Examen cualitativo macroscópico : una muestra de semen normal es de color gris opalescente. Si la muestra esta contaminado con orina tiene coloración amarilla. La muestra seminal es normal cuando tiene un volumen superior a 1,5 ml. Una muestra marrón puede indicar la presencia de eritrocitos, hematospermia. Se examina la presencia de hilos por una viscosidad aumentada y se rompen para que no interfieran en el estudio. Un semen muy viscoso puede indicar problemas en la próstata. El semen tiene un pH entre 7 y 8 normalmente. La variación en el pH fuera de este rango se asocia con la presencia de una infección. Realizar las observaciones correspondientes https://www.reproduccionasistida.org/resultados-de-seminograma/ Examen cualitativo microscópico :

  • Tome 0.01 mililitro (10 microlitros) de semen y colóquelo en un portaobjeto, obsérvelo bajo el microscopio con objetivo de 4x, 10x y 40 x.
  • Agregue eosina. Con esto usted verá la viabilidad ya que los que se tiñen están muertos. En el mismo portaobjetos coloque otros 0.01 mililitro de eosina y póngale un cubreobjetos, mire al microscopio con objetivo de 4x, 10x y 40 x.
  • Evalúe si la cantidad es excelente, buena, regular, baja o hay azoospermia. Utilice estos diagramas para guiarse: