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SANGRE. ORGANOS HEMATOPOYETICOS Y LINFOIDES.
MATERIAL :
Frotis de sangre humana : estudio de las características de las células sanguíneas teñidas con la tincón de Giemsa : eritrocitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos, linfocitos y plaquetas. Realización de recuento leucocitario.
Cortes de médula ósea de gato : parafina teñidos con hematoxilina-eosina y semifinos teñidos con azul de toluidina: observación de precursores de células sanguíneas.
Cortes de bazo de gato : parafina teñidos con Van Gieson y semifinos teñidos con azul de toluidina: estudio de la organización del bazo : cápsula, trabéculas, pulpa blanca (tejido linfoide) y pulpa roja.
LA SANGRE
Tipos celulares sanguíneos Las elementos de la sangre son de tres clases funcionales principales: células rojas (eritrocitos), células blancas (leucocitos) y plaquetas (trombocitos). Todos se sintetizan en la médula ósea, mediante un proceso que se denomina hematopoyesis.
Métodos de estudio de la médula ósea y la sangre El método estándar de examen de la sangre es hacer una extensión sobre un cristal. Tras la fijación con alcohol metílico, se usa una técnica de tinción de tipo Romanowsky como el Giemsa (Azur-Eosina-Azul de metileno) para el posterior estudio mediante microscopio óptica. Hay cuatro características de tinción diferentes según la afinidad de las diferentes organelas celulares hacia los distintos colorantes empleados en estas técnicas:
· Basofilia (azul oscuro): afinidad por el colorante básico azul de metileno; esto es característico del DNA nuclear y del RNA citoplasmático, por ejemplo, ribosomas. · Azurofilia (morado): afinidad por los colorantes azures; esto es típico de los lisosomas, uno de los tipos de gránulos presentes en los leucocitos. · Eosinofilia (rosa): afinidad por el colorante ácido eosina (por lo cual se le denomina acidofilia); ésta es una característica especial de la hemoglobina que rellena el citoplasma de los eritrocitos y gránulos específicos de ciertos leucocitos ( eosinófilos ). · Neutrofilia (rosa asalmonado/ lila) : es la característica específica de los leucocitos neutrófilos.
GLOBULOS ROJOS O ERITROCITOS
Los eritrocitos en una extensión de sangre periférica teñida con el colorante de Giemsa se tiñen de rosa (eosinofilia/acidofilia) por su gran contenido en hemoglobina, una proteína básica, y son anucleados en mamíferos ; en vertebrados no mamíferos si presentan núcleo. La tinción pálida del centro se debe a su particular forma de disco bicóncavo.
GLOBULOS BLANCOS O LEUCOCITOS
Se encuentran normalmente cinco tipos de leucocitos en la circulación. Se dividen tradicionalmente en dos grandes grupos según la forma del núcleo y los gránulos del citoplasma:
Granulocitos Neutrófilos Eosinófilos Basófilos
Agranulocitos Linfocitos Monocitos
A los granulocitos se les denomina así por sus prominentes gránulos de secreción citoplásmicos. Cada uno de los tres tipos de granulocitos tienen un tipo específico de gránulo de cuyas características tintoriales derivan los nombres de neutrófilo , eosinófilo y basófilo. Los granulocitos tienen un núcleo único multilobulado que puede presentar muchas formas que explican el uso del término leucocito polimorfonuclear o polimorfo para aludir a los granulocitos. Los agranulocitos incluyen a los linfocitos y monocitos , quetienen un núcleo relativamente no lobulado.
NEUTROFILOS
Los neutrófilo s son la clase de leucocitos más corrientes en la sangre y representan del 40-75% de los leucocitos circulantes. La característica más importante del neutrófilo es su núcleo multilobulado. En la célula madura suele haber hasta cinco lóbulos que se interconectan mediante finas bandas de material nuclear. En los neutrófilos menos maduros hay menos lóbulos. En los neutrófilos de las mujeres se observa el cromosoma X quiescente condensado o corpúsculo de Barr, a modo de pequeño apéndice con forma de palillo de tambor en uno de los lóbulos nucleares. A esto se denomina cromosoma en palillo de tambor y se ve en un 3% de los neutrófilos de sangre de las mujeres. El citoplasma del neutrófilo muestra múltiples gránulos morados denominados gránulos azurófilos.
EOSINOFILOS
Los eosinófilos representan entre el 1-6% de los leucocitos circulantes. El eosinófilo (12-17 μ de diámetro) es mayor que el neutrófilo y se reconoce con facilidad por sus grandes granos específicos que se tiñen en rojo brillante con la eosina y en color rojo ladrillo con los métodos de Romanowsky. La mayoría de las células tienen un núcleo bilobulado.
BASOFILOS
Los hasófilos son los leucocitos menos abundantes constituyendo menos del 1% del total deglóbulos blancos. Los basófilos (14-16 μ de diámetro) son células de tamaño intermedio entre los neutrófilos y los eosinófilos. Al igual que el eosinófilo, tiene un núcleo bilobulado que es ocultado por la existencia de numerosos gránulos específicos de gran tamaño, basófilos (azul oscuro) que son mayores que los de los eosinófilos aunque están presentes en menor cantidad.
MONOCITOS
Los monocitos son las células blancas de mayor tamaño (hasta 20 μ de diámetro) y constituyen entre el 2- 10% de los leucocitos en sangre periférica. Los monocitos se caracterizan por un núcleo grande excéntrico que se tiñe con menor intensidad que el de otros leucocitos. La forma del núcleo es variable pero presenta a menudo una indentación profunda de la parte del núcleo adyacente al centro de la célula, que es más llamativa en las células maduras hasta dar al núcleo una forma de herradura o incluso de bilobulación. El amplio citoplasma se tiñe de azul grisáceo.
LINFOCITOS
Los linfocitos son las células más pequeñas de la serie blanca, que son sólo un poco mayores que los eritrocitos. Son el segundo tipo de leucocito circulante en frecuencia constituyendo entre el 20 -50% del total. Los linfocitos se caracterizan por su núcleo redondeado, intensamente teñido y su escaso citoplasma no granular, basófilo claro. La cantidad de citoplasma depende del estado de actividad del linfocito. En la sangre periférica predominan los linfocitos pequeños inactivos (6-9 μ de diámetro). Los linfocito.s grandes (9-15 μ de diámetro) constltuyen el 3 % de los linfocitos en sangre periférica.
PLAQUETAS Las plaquetas (trombocitos) son pequeños fragmentos citoplásmicos anucleados que se originan en la médula ósea a partir de precursores gigantes denominados megacariocitos.. Las plaquetas son discos biconvexos, redondos u ovales cuyo tamaño oscila entre 1,5 y 3,5 μ de diámetro. En las extensiones de sangre periférica su forma no se aprecia con facilidad al estar agrupadas. El citoplasma está teñido en púrpura y muestra un aspecto granular por las abundantes organelas que tienden a concentrarse en el centro de la plaqueta. El citoplasma periférico está teñido débilmente, por lo que apenas se distingue.
J K L Microfotografías de células de sangre humana en frotis teñido con Giemsa. A,D : neutrófilos B,E : eosinófilos C : basófilo G,H : linfocitos pequeños I : linfocito mediano J,K,L : monocitos
Ilustración de las etapas de la diferenciación de eritrocitos y leucocitos granulosos en la médula ósea.
MEDULA OSEA (gato)
- Se observan diversos tipos de células hematopoyéticas
CORTES DE PARAFINA (Hematoxilina-Eosina)
CORTES SEMIFINOS
e: serie eritrocitica
e: serie eritrocitica G: serie granulocitica MC: megacariocitos
MC:Megacariocitos (forman plaquetas) Precursores de céls. sanguíneas
Megacariocitos→
BAZO (gato)
Corte de parafina (Van Gieson)
C: cápsula; NL: nódulos linfoides; PB: pulpa blanca; PR: pulpa roja; Tr: trabéculas
NL: Nódulo linfoide
AC: arteria central; C: cápsula; NL: nódulo linfoide; PR: pulpa roja; Tr: trabéculas
AT: arteria trabecular VT: vena trabecular Tr: trabéculas
Los ganglios linfáticos son pequeños órganos (de unos pocos mm a 2 cm) con morfología ovoide o reniforme. Se sitúan en el curso de ciertos vasos linfáticos y se encuentran rodeados por una cápsula de tejido conjuntivo de la cual parten trabéculas hacia el interior del ganglio. Los vasos linfáticos aferentes penetran a través de la cápsula y se continúan con un seno subcapsular. De ahí, la linfa continúa a través unos vasos linfáticos especializados denominados senos linfáticos hasta los vasos linfáticos eferentes. A pocos aumentos, se pueden distinguir en el ganglio dos regiones: una externa, más teñida, denominada corteza y una interna denominada médula. La mayor concentración de linfocitos se da en la corteza. La linfa del seno subcapsular discurre primero por los senos corticales para después pasar a los medulares y de ahí al hilus del ganglio, donde la linfa es recogida por los vasos linfáticos eferentes. Los senos linfáticos pueden ser atravesados por todos los componentes de la linfa, por lo que los linfocitos pueden abandonar o ingresar en el tejido linfoide o entrar en contacto con los antígenos o células presentadoras de antígeno que se encuentren en la linfa.
LOS GANGLIOS LINFÁTICOS
Ganglio linfático de rata
C: Cápsula
CM: Cordón medular
CX: Corteza
M: Médula
N: Nódulo linfático
SS: seno subcapsular
VLA: Vasos linfáticos aferentes
Estructura de un ganglio linfático
Cápsula
Arteria Vena Vaso linfático
Centro germinal Cordones medulares Dirección del flujo de la linfa
Seno medular
Los componentes celulares que podemos encontrar en un ganglio linfático son: Linfocitos-B y -T, macrófagos y células reticulares. Las células reticulares , y las fibras reticulares producidas por ellas, forman una red tridimensional entre la cápsula y las trabéculas. Entre esta trama se localizan los linfocitos y los macrófagos. Las células reticulares se distinguen del resto por la presencia de un núcleo grande que, al igual que su citoplasma, sólo se tiñe débilmente. Los procesos de estas células pueden penetrar dentro de los senos. Los linfocitos localizados en la región más externa de la corteza son mayoritariamente de tipo B. Se encuentran organizados formando acumulaciones esféricas que reciben el nombre de nódulos o folículos linfáticos. Las zonas centrales de los nódulos están normalmente ocupadas por linfocitos B que han entrado en contacto con un antígeno y proliferan activamente. Estos linfocitos se tiñen más débilmente y constituyen lo que se denominan centros germinales. En los cordones medulares , extensiones del tejido linfoide cortical hacia la médula, se localizan los linfocitos-B activados o células plasmáticas. La zona más profunda de la corteza, la paracorteza , es una zona rica en linfocitos-T. Los macrófagos se pueden encontrar dispersos por toda la extensión del tejido linfoide. Los vasos sanguíneos penetran al ganglio linfático por el hilus y atraviesan el parénquima ganglionar por las trabéculas de tejido conjuntivo. Continúan a través de los cordones medulares hasta que llegan a la corteza y se ramifican en capilares. Las vénulas post-capilares de la corteza son fácilmente reconocibles pues presentan un endotelio cúbico.
Ganglio linfático de rata
CB: Célula cebada
CM: Cordón medular
CR: Célula reticular
MF: Macrófago
Mit: Mitosis
V: vaso
Ganglio linfático de rata
C: Cápsula
CM: Cordón medular
CX: Corteza
M: Médula
N: Nódulo linfático
SS: seno subcapsular
VLA: Vasos linfáticos aferentes
M
M
M
M
CX
CX
T
Timo de rata
CX: Corteza
M: Médula
T: Trabécula
Las células reticulares son bastante abundantes. Presentan citoplasmas eosinófilos y núcleos grandes, ovoides y poco teñidos, que normalmente tiene uno o dos nucleolos. Estas células están ramificadas y forman una trama celular tridimensional que se denomina retículo celular, puesto que existen muy pocas fibras reticulares en el timo. El retículo celular sirve de soporte al resto de tipos celulares del timo. Las células reticulares recubren la superficie de los capilares, formando una capa epitelioide que separa el tejido cortical del tejido conjuntivo. Estas células secretan hormonas y otras moléculas importantes para la función del timo. Este aislamiento de la corteza tímica produce un microambiente necesario para el desarrollo de los linfocitos-T. Las funciones de las células reticulares del timo son, por tanto, más amplias que en otros órganos y por ello se distinguen con el nombre de epiteliocitos tímicos. Los macrófagos del timo se pueden hallar tanto en la corteza como en la médula, pero son difíciles de distinguir de los epiteliocitos en tinciones convencionales. Los linfocitos también están presentes en la médula y la corteza del timo, pero su densidad es mayor en la zona cortical. Sus tamaños son variables (5-15μm) en la corteza, pero son generalmente pequeños en la médula. La mayoría de ellos son linfocitos-T inmaduros, los cuales también se denominan linfocitos tímicos o timocitos.
M
CX
T
A
C
C
C
E
L
Mf
A
Timo de rata. Médula.
A: Figura de muerte celular por apoptosis
C: Capilar
E: Epiteliocito
Mf: Macrófago
L: Linfocito
Timo de rata. Corteza.
Cp: Cápsula
E: Epiteliocito
Mit: Mitosis
L: Linfocito
Cp
E
L Mit
