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practica no 2 aminoácidos resultados de pruebas colorimétricas para identificar presencia de aminoácidos
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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Calvillo Garcia Melissa^1 , Núñez Pacheco Fernanda Aislinn^2 4QV1 Sección. #
● Aplicar pruebas colorimétricas específicas para identificar la presencia de grupos funcionales característicos en aminoácidos y proteínas, mediante reacciones químicas cualitativas. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ● Identificar la cisteina mediante la formacion de un precipitado negro de sulfuro de plomo. ● Evidenciar aminoácidos libres o extremos N-terminales con la reacción de ninhidrina (color violeta). ● Confirmar la presencia de triptófano mediante la reacción de Hopkins-Cole (anillo violeta/rojo en interfase). ● Poner de manifiesto la tirosina con el reactivo de Millon (color rojo). ● Detectar tirosina y triptófano (y en menor medida fenilalanina) mediante la reacción xantoproteica (color amarillo por nitración). ● Verificar la existencia de proteínas o péptidos de al menos 3 aminoácidos mediante la reacción del biuret (color violáceo por complejo cobre-péptido).
I. Reacción del plomo para cisteína (grupos -SH). Tabla 1. Interpretación de resultados de la reacción de grupos -SH. Imagen 1. Resultados de la reacción de grupos -SH.
Gelatina Negativa (sin cambio, no se observó precipitado) Peptona Negativa (sin cambio, no se observó precipitado) Albúmina Positiva (coloración café) Cisteína Positiva (coloración gris) Agua Negativa (Testigo, sin cambio, no se observó precipitado)
II. Reacción de la Ninhidrina (grupos amino libres). MUESTRAS RESULTADOS Y OBSERVACIONES Gelatina Positivo (Presencia de grupos amino libres) Peptona Positivo (Presencia de grupos amino libres) Albúmina Positivo (Coloración amarilla al inicio de la prueba, requirió de mucha Ninhidrina para lograr un cambio en su coloración) Tirosina Positivo (Presencia de grupos amino libres) Triptófano Positivo (Presencia de grupos amino libres) Fenilalanina Positivo (Presencia de grupos amino libres) Agua Negativo (Testigo, no se observó un cambio en su coloración) Tabla 2. Interpretación de resultados de la reacción de Ninhidrina para aminoácidos. Imagen 2. Reducción de la Ninhidrina frente a grupos amino libres (Púrpura de Ruhemann). III. Reacción de Hopkins-Cole (anillo indol del triptófano). Tabla 3. Interpretación de resultados de la reacción de Hopkins-Cole. Imagen 3. Resultados de la reacción de Hopkins-Cole.
Gelatina Negativo (Ausencia de Triptófano) Peptona Positivo (Presencia de triptófano, anillo de color rojizo) Albúmina Positivo (Presencia de triptófano, anillo de color violeta) Triptófano Positivo (Presencia deanillo indol, anillo de color rojizo/ violeta) Fenilalanina Negativo (Ausencia de anillo indol) Agua Negativo ( Testigo, ausencia de Triptófano)
VI. Reacción de Biuret (Presencia de enlace peptídico) MUESTRAS RESULTADOS Y OBSERVACIONES Gelatina Positivo (Presencia de 2 o más enlaces peptídicos) Peptona Positivo (Presencia de 2 o más enlaces peptídicos) Albúmina Positivo (Presencia de 2 o más enlaces peptídicos) Tirosina Negativo (Carece de enlaces peptídicos) Aspartame Negativo (Presencia de un único enlace peptídico) Fenilalanina Negativo (Carece de enlaces peptídicos) Triptófano Negativo (Carece de enlaces peptídicos) Agua Negativo (Testigo, sin cambio en coloración por carencia de enlaces peptídicos) Tabla 6. Interpretación de resultados de la reacción de Biuret en aminoácidos Imagen 6. Formación de un complejo de coordinación púrpura por la unión de iones cúpricos a los enlaces peptídicos ANÁLISIS DE RESULTADOS CONCLUSIONES BIBLIOGRAFIAS