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Práctica número 2: Urocultivo. Chico Flores Samantha Iraís. Asignatura: Tecnología Farmacéutica. Licenciatura QFBT. Periodo 2022 - C 3. Fecha de entrega: 20 de marzo de 20 22. Docente: Q.F.B. Edlin Mariel Ramos González. RESUMEN. Un urocultivo es una prueba diagnóstica inofensiva que detecta la presencia de microorganismos (bacterias u otros) mediante el examen de una muestra de orina en un laboratorio de microbiología. Se utilizó una variedad de pruebas, incluida la prueba general de orina (GOU), cinco cultivos de agar (CLED, Mac Conkey, EMB, agar s110) y pruebas bioquímicas (citrato de Simmons, LIA, MIO, SIM, urea y Kligler) Antibacteriano terminó el espectro de sensibilizadores de doxiciclina, eritromicina y cefaclor. Para interpretar los resultados se utilizó la tabla de identificación de Enterobacteriaceae para identificar Enterobacter aerogenes. Palabras clave: urocultivo, enterobacterias, orina, vías urinarias, análisis clínico, EGO. INTRODUCCIÓN. Las infecciones del tracto urinario son frecuentes en la población, principalmente entre las mujeres debido a la corta distancia ano-vagina y la corta longitud de la uretra. Estas infecciones son causadas generalmente por agentes bacterianos, los cuales pueden ser encontrados en la orina. El Urocultivo es el método que se utiliza para la identificación de estos agentes etiológicos y para evaluar su sensibilidad/resistencia frente a antibióticos. Es un examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de orina. Puede ser utilizado para buscar una infección urinaria en adultos y niños. Forma en que se realiza el examen La mayoría de las veces, la muestra se recogerá como una muestra de orina limpia en el consultorio su proveedor de atención médica o en la casa. Usted usará un equipo especial para recolectar la orina. Una muestra de orina también puede tomarse introduciendo una sonda (tubo) de caucho delgada (catéter) a través de la uretra hasta la vejiga. Esto lo hace alguien en el consultorio de su proveedor o en el hospital. La orina se vacía en un recipiente estéril y luego se retira la sonda. En raras ocasiones, su proveedor puede recolectar una muestra de orina introduciendo una aguja a través de la piel de la parte baja del abdomen hasta la vejiga. La orina se lleva luego a un laboratorio para determinar si hay bacterias u hongos en la orina. Los resultados tardan de 24 a 48 horas. Preparación para el examen Si es posible, recoja la muestra cuando la orina haya estado en la vejiga durante dos a tres horas. Lo que se siente durante el examen
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Cuando se introduce la sonda, se puede sentir presión. Se usa un gel especial para insensibilizar la uretra. Razones por las que se realiza el examen Su proveedor puede ordenar este examen si usted tiene síntomas de una infección urinaria o vesical, tales como dolor o ardor al orinar. A usted también le pueden hacer un urocultivo después de que le hayan tratado una infección con el fin de constatar que todas las bacterias hayan desaparecido. Resultados normales La "proliferación normal" es un resultado normal, lo cual significa que no hay ninguna infección. Los rangos normales de valores pueden variar un poco entre distintos laboratorios. Algunos laboratorios utilizan medidas diferentes o analizan muestras diferentes. Hable con su proveedor acerca de los resultados específicos de su examen. Significado de los resultados anormales Un examen "positivo" o anormal es cuando se encuentran bacterias o cándidas en el cultivo. Esto probablemente significa que usted tiene una infección urinaria o vesical. Otros exámenes pueden ayudarle a su proveedor a saber qué bacterias o cándidas están causando la infección y cuales antibióticos pueden ser mejores para tratarla. Algunas veces, en el cultivo se puede encontrar más de un tipo de bacterias o sólo una pequeña cantidad. Riesgos Existe un riesgo muy poco frecuente de un agujero (perforación) en la uretra o la vejiga si su proveedor utiliza una sonda. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. La población microbiana comensal de la uretra está formada por diversos microorganismos; los más numerosos de los cuales son los lactobacilos, los estreptococos y los estafi lococos coagulasa- negativos. Estos microorganismos son relativamente avirulentos y rara vez se asocian a enfermedad en el ser humano. Por el contario, la uretra puede verse colonizada de forma transitoria por microorganismos fecales, como Enterococcus, miembros de la familia Enterobacteriaceae y Candida, todos los cuales son capaces de invadir el aparato genitourinario, multiplicarse en la orina y ocasionar enfermedades significativas. JUSTIFICACIÓN. El urocultivo se utiliza, junto con el urianálisis, para el diagnóstico de las infecciones del tracto urinario (ITU) e identificar la bacteria o levadura causante de la infección. Si el cultivo es positivo, se puede realizar un antibiograma para determinar qué antibióticos detienen el crecimiento del microorganismo. Los resultados de estas pruebas servirán al médico para decidir el tratamiento más indicado para eliminar la infección. OBJETIVOS. General:
- Conocer los agares de preferencia para el urocultivo.
- Conocer los microorganismos que se pueden encontrar en una muestra de orina.
- Conocer la metodología de siembra para una muestra de orina. HIPÓTESIS. Si el paciente de la muestra analizada está pasando por una infección urinaria se espera identificar el agente patógeno (bacteria), alteraciones en diversos parámetros en el análisis químico así como la presencia de leucocitos en el análisis microscópico. METODOLOGÍA. MATERIALES:
- Asa bacteriológica de argolla calibrada 1:
- Asa bacteriológica recta
- Porta objetos
- Cubreobjetos
- Tiras reactivas
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Picar con un asa recta en el medio. Después de incubar se agregan 5 gotas de reactivo. d) SIM Picar con un asa recta en el medio. Después de incubar se agregan 5 gotas de reactivo. e) Urea Picar con un asa recta en el medio. f) Kigler Picar el agar y sembrar con un asa de siembra en la superficie inclinada del medio. Incubar todos los tubos a 35°C de 18-24 horas con la tapa aflojada, examinar reacciones después de 2, 4, 6 y 24 horas, y luego diariamente hasta por 6 días. Prueba de oxidasa a) Se coloca un disco de papel secante en un portaobjetos. b) Se coloca una colonia en el disco y posteriormente se impregna del reactivo de oxidasa. c) Observar si hubo cambio de color (positivo: observación de color azul-purpura, y negativo: disco permanece sin cambio de color.) Antibiograma a) Colocar 1-2 mL de agua destilada en un tubo de ensayo. b) Tomar la colonia del medio de cultivo con ayuda de un hisopo. c) Mezclar la colonia en el agua destilada hasta que se vuelva turbia la solución (solución Mc Farland.). d) Con el mismo hisopo, inocular la placa de Mueller-Hinton completamente, sin dejar ninguna zona libre. Esto se consigue deslizando el hisopo por la superficie del agar tres veces, rotando la placa unos 60º cada vez y pasándola por último por la periferia del agar para conseguir una siembra uniforme. Dejar secar de 3 a 5 minutos antes de depositar los discos. e) Colocar los discos con los dispensadores o manualmente con pinzas estériles. Debe asegurase que contacten perfectamente con la superficie del agar, por lo que deben presionarse ligeramente sobre la superficie del agar. No deben situarse a menos de 15 mm del borde de la placa, y han de estar distribuidos de forma que no se produzca superposición de los halos de inhibición. f) Incubar de 16-18 horas a 35°C. Diagrama de flujo.
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RESULTADOS Y ANÁLISIS DE
RESULTADOS.
Examen general de orina (EGO) Examen físico La orina se observa de un color amarillo pálido, es clara y esta no presenta turbidez.
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Nota: En los demás medios de cultivo (EMB, agar s110) no se observó el crecimiento de ninguna bacteria. Pruebas Bioquímicas Kligler Superficie ácida/profundidad ácida (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa y lactosa. Hay presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo lo que indica que el microorganismo produce gas.
MIO
Movilidad: Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea de siembra. Ornitina decarboxilasa: Resultado negativo: color amarillo al fondo. Prueba del indol: Agregar al medio de cultivo 3- 5 gotas de Indol reactivo. Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro- amarillento. Producción de SH 2 : Resultado negativo: el medio permanece sin cambio de color. Prueba del indol: Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro- amarillento. Ureasa
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El resultado se considera positivo cuando la bacteria que posee la enzima ureasa logra degradar la urea, dando origen al amoníaco y bicarbonato, y esa reacción es observada por medio de la alteración del color del medio, que pasa de amarillo a rosa/rojo. Debido a que no hubo cambio de color se considera ureasa negativa. SIM Movilidad: Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea de siembra Superficie ácida/profundidad ácida (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa y lactosa. Hay presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo lo que indica que el microorganismo produce gas. Citrato de Simmons Esta prueba sirve para determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando una alcalinización del medio. En la superficie del bisel se observa crecimiento por lo que es citrato positiva. LIA Por decarboxilación de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y el indicador vira al color púrpura. La decarboxilación de la lisina, ocurre en medio ácido, por lo que es necesaria que la glucosa sea previamente fermentada. (Glucosa y lisina positivas.) Tinción de Gram Se observan bacilos color rosa, es decir, gram negativos.
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hombres. Las manifestaciones clínicas de estas infecciones pueden inducir al médico a sospechar su existencia e incluso ser suficientes en ciertos casos para establecer el diagnóstico de infección, pero en otros el diagnóstico de certeza sólo se puede establecer mediante la práctica de un urinocultivo (urocultivo). En él se identifica el microorganismo (bacteria u hongo) que está presente en la orina y, a partir de ahí, mediante estudios adicionales se puede determinar la sensibilidad de esos microorganismos a los diferentes antibióticos y seleccionar el más adecuado para combatirlos. Investigar qué tipo de microorganismos pueden crecer en un urocultivo. En la mayoría de los casos, Escherichia coli es la principal bacteria implicada en las infecciones del tracto urinario, aunque la prevalencia cambia de acuerdo con múltiples variables como la edad, el sexo, la localización de la infección, si la infección es complicada o no, y si está asociada o no al cuidado de la salud, entre otras. Le siguen en orden de importancia otros bacilos gramnegativos como Klebsiella spp., Proteus spp., Enterobacter spp., Morganella spp., y Pseudomonas aeruginosa. Con respecto a los cocos grampositivos, los que predominan como agentes causales de infección del tracto urinario son Enterococcus spp., Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus y Staphylococcus coagulasa negativa, principalmente Staphylococcus saprophyticus. Investigar cómo se realiza el conteo de UFC/ml y cuando se considera una infección o una contaminación o si se debe repetir el urocultivo. Dado que una colonia puede estar formada por un solo organismo o un grupo de microbios, los puntos representan las «unidades formadoras de colonias (UFC)». Cuente el número de colonias, multiplique por la dilución y allí tiene el “recuento de placa” en UFC. Entre los principales motivos por los cuales se debe rechazar y solicitar una nueva muestra de orina para urocultivo, se encuentran que la muestra lleve más de dos horas de recolección y sin refrigeración, la muestra corresponda a orina de 24 horas, la muestra se recolecte con la misma técnica de otra ya cultivada en las anteriores 48 horas, se envíe punta de sonda vesical, la muestra se recolecte de orinales, o bolsas recolectoras en pacientes con sonda vesical, se usen recipientes recolectores de orina no apropiados o se solicite cultivo para anaerobios, ya que en este último caso la muestra se debe recolectar por punción suprapúbica. CONCLUSIÓN Se logró identificar una Enterobacteria ( Enterobacter aerogenes ) tal y como se planteó en la hipótesis por lo que se deduce que el paciente está pasando por una infección en el tracto urinario. El cultivo de una muestra de orina continúa siendo el patrón de referencia para las otras pruebas relacionadas con el diagnóstico de la infección del tracto urinario; por lo tanto, demostrar la presencia de una cantidad significativa de bacterias en la orina (bacteriuria) identifica definitivamente una afección. REFERENCIAS ❖ López Vargas, J., & Campuzano Maya, G. (2013). El urocultivo: Prueba ineludible para el diagnóstico específico de la infección del tracto urinario y el uso racional de los antibióticos. Medigraphic. Recuperado 20 de marzo de 2022, de https://www.medigraphic.com/pdfs/medl ab/myl-2013/myl135-6b.pdf ❖ Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2017). Microbiología médica. Elsevier Health Sciences. ❖ Urocultivo. (s. f.). Invifar. Recuperado 20 de marzo de 2022, de https://invifar.ucol.mx/content/micrositio s/294/file/urocultivo.pdf ❖ Urinocultivo. (s. f.). Saludemia. Recuperado 20 de marzo de 2022, de https://www.saludemia.com/-/prueba- urinocultivo ❖ Pigrau, C. (2011). Infección del tracto urinario. Seimc. Recuperado 20 de marzo de 2022, de https://www.seimc.org/contenidos/docum entoscientificos/otrosdeinteres/seimc-
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dc2013- LibroInfecciondeltractoUrinario.pdf ❖ ¿Qué significa la unidad ufc ml? (2021). Aleph. Recuperado 20 de marzo de 2022, de https://aleph.org.mx/que-significa-la- unidad-ufc-ml ❖ Ruz, N. N. (2018). Haemophilus influenzae by noelia nicay ruz. a. https://es.slideshare.net/noelianicayruz/ha emophilus-influenzae-by-noelia-nicay- ruz ❖ Urocultivo - muestra por sondaje. (2019). a. https://medlineplus.gov/spanish/ency/arti cle/003752.htm#:%7E:text=La%20muest ra%20se%20toma%20colocando,una% 0soluci%C3%B3n%20desinfectante%20( antis%C3%A9ptica). ❖ Muestra de orina limpia. (2017). a. https://medlineplus.gov/spanish/ency/arti cle/007487.htm ❖ Urocultivo. (2016). a. https://medlineplus.gov/spanish/ency/arti cle/003751.htm#:%7E:text=Su%20prove edor%20puede%20ordenar%20este,todas %20las%20bacterias%20hayan%20desap arecido. ❖ Recomendaciones para el diagnóstico microbiológico de la infección urinaria. (2018). a. https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script =sci_arttext&pid=S0716- 10182001000100008 ❖ Valenzuela, G. G. (2018). Urocultivo. a. https://es.slideshare.net/TavoooBlackPro yect/urocultivo- 28607727
