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Práctica de Química Sanguínea: Determinaciones de Glucosa, Urea, Creatinina y Ácido Úrico, Guías, Proyectos, Investigaciones de Bioquímica

practica laboratorio: sintesis

Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2020/2021

Subido el 08/09/2022

bereroncha
bereroncha 🇲🇽

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PRÁCTICA NÚMERO 1
QUÍMICA SANGUÍNEA
DETERMINACIONES INCLUÍDAS:
1. GLUCOSA.
2. UREA (NITRÓGENO DE UREA).
3. CREATININA.
4. ÁCIDO ÚRICO.
JUSTIFICACIÓN:
1. GLUCOSA. Es una fuente primaria de energía celular, las concentraciones
de glucosa plasmática en ayuno y la tolerancia a una dosis de glucosa se
utilizan para establecer el diagnóstico de la diabetes mellitus. Las
determinaciones de la glucosa se utilizan para supervisar el tratamiento en
las personas diabéticas, en pacientes con deshidratación, hipoglucemia,
insulinoma y cetoacidosis metabólica.
2. UREA (NITRÓGENO DE UREA). Los niveles elevados del nitrógeno ureico en
sangre se asocian con glomerulonefritis, shock, obstrucción de las vías
urinarias, pielonefritis y otras causas de insuficiencia renal aguda y crónica.
La insuficiencia cardíaca congestiva grave, la hiperalimentación, la
cetoacidosis diabética, la deshidratación y las hemorragias del tubo
digestivo elevan el nitrógeno ureico. Los niveles bajos de nitrógeno ureico se
asocian normalmente con el embarazo, un descenso en la ingestión de
proteínas, insuficiencia hepática aguda y en la administración intravenosa
de líquidos.
3. CREATININA. La excreción de creatinina sérica es una función de la masa
corporal magra en personas normales que muestra poca o ninguna
respuesta a los cambios en la dieta. La concentración de creatinina sérica
es más elevada en los hombres que en las mujeres. La creatinina sérica
aparece aumentada en la insuficiencia renal aguda y crónica, la
obstrucción de las vías urinarias, los casos de reducción del flujo sanguíneo
renal, el shock y la deshidratación. Entre las causas de una concentración
baja de creatinina sérica se incluye el debilitamiento y la disminución de la
masa muscular. El ejercicio puede provocar un aumento del aclaramiento
de creatinina.
4. ÁCIDO ÚRICO. Es el producto final del metabolismo de las purinas. Se
producen elevaciones del ácido úrico en situaciones como insuficiencia
renal, azoemia prerrenal, gota, intoxicación por plomo, destrucción celular
excesiva (por ejemplo, después de quimioterapia), anemia hemolítica,
insuficiencia cardíaca congestiva y después de un infarto de miocardio. El
ácido úrico también aparece aumentado en algunos trastornos endocrinos,
la acidosis, la toxemia del embarazo, la gota hereditaria y la enfermedad
por acumulación de glucógeno tipo I. Después del tratamiento con algunos
medicamentos (p. ej., aspirina a dosis bajas), y con un consumo bajo de
purinas en la dieta, pueden encontrarse concentraciones bajas de ácido
úrico en presencia de defectos de los túbulos renales y en la xantinuria.
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PRÁCTICA NÚMERO 1

QUÍMICA SANGUÍNEA

DETERMINACIONES INCLUÍDAS:

1. GLUCOSA.

2. UREA (NITRÓGENO DE UREA).

3. CREATININA.

4. ÁCIDO ÚRICO.

JUSTIFICACIÓN:

  1. GLUCOSA. Es una fuente primaria de energía celular, las concentraciones de glucosa plasmática en ayuno y la tolerancia a una dosis de glucosa se utilizan para establecer el diagnóstico de la diabetes mellitus. Las determinaciones de la glucosa se utilizan para supervisar el tratamiento en las personas diabéticas, en pacientes con deshidratación, hipoglucemia, insulinoma y cetoacidosis metabólica.
  2. UREA (NITRÓGENO DE UREA). Los niveles elevados del nitrógeno ureico en sangre se asocian con glomerulonefritis, shock, obstrucción de las vías urinarias, pielonefritis y otras causas de insuficiencia renal aguda y crónica. La insuficiencia cardíaca congestiva grave, la hiperalimentación, la cetoacidosis diabética, la deshidratación y las hemorragias del tubo digestivo elevan el nitrógeno ureico. Los niveles bajos de nitrógeno ureico se asocian normalmente con el embarazo, un descenso en la ingestión de proteínas, insuficiencia hepática aguda y en la administración intravenosa de líquidos.
  3. CREATININA. La excreción de creatinina sérica es una función de la masa corporal magra en personas normales que muestra poca o ninguna respuesta a los cambios en la dieta. La concentración de creatinina sérica es más elevada en los hombres que en las mujeres. La creatinina sérica aparece aumentada en la insuficiencia renal aguda y crónica, la obstrucción de las vías urinarias, los casos de reducción del flujo sanguíneo renal, el shock y la deshidratación. Entre las causas de una concentración baja de creatinina sérica se incluye el debilitamiento y la disminución de la masa muscular. El ejercicio puede provocar un aumento del aclaramiento de creatinina.
  4. ÁCIDO ÚRICO. Es el producto final del metabolismo de las purinas. Se producen elevaciones del ácido úrico en situaciones como insuficiencia renal, azoemia prerrenal, gota, intoxicación por plomo, destrucción celular excesiva (por ejemplo, después de quimioterapia), anemia hemolítica, insuficiencia cardíaca congestiva y después de un infarto de miocardio. El ácido úrico también aparece aumentado en algunos trastornos endocrinos, la acidosis, la toxemia del embarazo, la gota hereditaria y la enfermedad por acumulación de glucógeno tipo I. Después del tratamiento con algunos medicamentos (p. ej., aspirina a dosis bajas), y con un consumo bajo de purinas en la dieta, pueden encontrarse concentraciones bajas de ácido úrico en presencia de defectos de los túbulos renales y en la xantinuria.

GLUCOSA

INTRODUCCIÓN:

En el metabolismo humano hay dos vías de obtención de glucosa procedentes de los polisacáridos: 1) la digestión de los polisacáridos de la dieta y 2) la movilización de las reservas del glucógeno hepático. El intestino delgado constituye el principal órgano de digestión y absorción de los polisacáridos digeribles; los productos de su digestión se absorben en el yeyuno y pasan posteriormente a la sangre por el sistema porta en forma de monosacáridos (glucosa, fructosa y galactosa). Son dos mecanismos los responsables de la absorción de los monosacáridos: el transporte activo, que necesita de gasto de energía y va en contra de un gradiente de concentración, así como un sistema de cotransporte sodio-glucosa; y la difusión simple, a favor de un gradiente de concentración, esto es, se realiza mediante el movimiento aleatorio de las moléculas a través de las membranas. La función principal de los carbohidratos en el metabolismo es la de actuar como un combustible, el cual se oxida para suministrar energía a otros procesos metabólicos. El metabolismo de los carbohidratos en el organismo se divide como sigue:

  1. Glucólisis. Oxidación de la glucosa o del glucógeno en piruvato o lactato por la vía de Embden-Meyerhof.
  2. Glucogénesis. La síntesis del glucógeno a partir de la glucosa.
  3. Glucogenólisis. La degradación del glucógeno, la glucosa es el principal producto final de la glucogenólisis en el hígado, y el piruvato y lactato son los principales productos en el músculo.
  4. Gluconeogénesis. La formación de glucosa o de glucógeno a partir de fuentes que no son carbohidratos. Las vías comprometidas en la gluconeogénesis son principalmente las del ácido cítrico y el opuesto de la glucólisis.
  5. Derivación de la hexosamonofosfato (vía de la pentosafosfato). Una vía alternativa de la vía de Embden-Meyerhof.
  6. Oxidación del piruvato hasta acetil-CoA. Es un paso necesario previo a la entrada del producto de la glucólisis en el ciclo de Krebs, que es la vía final para la oxidación de carbohidratos, lípidos y proteínas. El ciclo de Krebs, es un ciclo a través del cual la acetil-CoA es transformada hasta CO 2 , H 2 O y energía. REGULACIÓN DEL METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS (GLUCOSA SANGUÍNEA) El mantenimiento de los niveles estables de glucosa en la sangre es, de todos los mecanismos homeostáticos, uno de los más finamente regulados y en el cual toman parte el hígado, los tejidos extrahepáticos y varias hormonas. Las células

CLASIFICACIÓN DE LA DIABETES:

  1. Tipo 1 (Diabetes Mellitus insulinodependiente), por lo general se manifiesta repentinamente en la niñez.
  2. Tipo 2 (Diabetes Mellitus no insulinodependiente) o diabetes mellitus de aparición en la madurez, que en general se desarrolla de manera gradual luego de los cuarenta años.
  3. Diabetes gestacional (transitoria, se manifiesta como tipo I). MANIFESTACIONES CLÍNICAS.
  4. Polidipsia (aumento de sed).
  5. Polifagia (aumento del apetito).
  6. Poliuria (aumento de la secreción urinaria).
  7. Pérdida de peso.
  8. Astenia (fatiga intensa). COMPLICACIONES AGUDAS.
  9. Cetoacidosis metabólica, se presenta en diabéticos descompensados, debido a la oxidación de las reservas lipídicas con aparición de cuerpos cetónicos en la sangre, rompiendo el equilibrio ácido-básico con la consiguiente disminución del pH.
  10. Hipoglucemia, descenso de la glucemia por debajo de su nivel normal, esta puede ser leve, moderada o grave. COMPLICACIONES CRÓNICAS.
  11. Microangiopatía. Afectan a pequeños vasos, por ejemplo, retinopatía diabética bastante frecuente, puede llegar a provocar ceguera, y la nefropatía diabética, responsable de la insuficiencia renal.
  12. Macroangiopatía. Afecta a grandes vasos sobre todo de extremidades inferiores. Esta puede ser la causa de la gangrena del diabético, menos frecuente cuando hay control de la diabetes y cuidado de los pies.
  13. Neuropatía. Alteraciones en el sistema nervioso con repercusión en la sensibilidad, en nervios motores, sensitivos o en el sistema vegetativo. CRITERIOS DIAGNÓSTICOS: En los adultos se consideran como criterios:
  14. Presencia de manifestaciones clínicas de diabetes.
  15. Glucosa plasmática en ayuno > 100 mg/dL (5.5 mmol/L). CUANTIFICACIÓN DE LOS NIVELES DE GLUCOSA.
  16. Se realiza por medio de técnicas químicas y enzimáticas.
  17. Por medio de cintas reactivas en sangre y orina: en el mercado existe una variedad de tiras visuales para medición de la glucosa en sangre (Smart strip- Lifescan, One Touch II y el Haemo-Glucotest 20-800) y tiras reactivas que determinan glucosa en orina (Keto Diabur-Test 5000). Estas tiras son utilizadas fundamentalmente para el control personal en forma periódica de los niveles de glucosa del paciente diabético.

DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA GLUCOSILADA (HbA1C).

  1. La hemoglobina glucosilada se forma por la modificación no enzimática de la hemoglobina por la glucosa. Cuando la glucosa sanguínea entra a los eritrocitos la hemoglobina es glucosilada de manera no enzimática. La fracción de hemoblobina glucosilada (HbA1C), normalmente es alrededor del 4 – 6 %, es proporcional a la concentración de glucosa en la sangre.
  2. Dado que la vida media de un eritrocito es de 120 días, la concentración de hemoglobina glucosilada refleja la concentración sanguínea promedio de glucosa en un periodo de 6 a 8 semanas precedentes; así una hemoglobina glucosilada elevada, indica al médico un control deficiente de la glucosa sanguínea y con ello guiar al médico a la selección del tratamiento adecuado; como por ejemplo:  Control riguroso de la alimentación.  Valorar la actividad física.  Selección del hipoglucemiante o ajuste de la dosis (p. ej., metformina, fenformina, glibenclamida, clorpropamida).  Ajuste de la dosis de insulina. Los individuos con Diabetes Mellitus controlada tienen niveles de hemoglobina glucosilada menores a 7 % (American Diabetes Association, 2008) o por debajo de 6.5 (Joint British Societies, JBS2, 2005) del total de la HbA. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA OBJETIVOS:
  3. Determinar la concentración de glucosa plasmática en ayuno.
  4. Explicar su importancia en la prevención y diagnóstico de diabetes. PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO: En el slide se deposita una gota de muestra del paciente, que se distribuye uniformemente desde la capa difusora a las capas reactivas. La glucosa se difunde a la capa reactiva y la oxidación de la glucosa contenida en la muestra es catalizada por la glucosa oxidasa para formar peróxido de hidrógeno y gluconato. Esta reacción va seguida de un acoplamiento oxidativo del peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno en presencia de peroxidasa, oxida al cromógeno en un compuesto rojo. La concentración de peróxido de hidrógeno es proporcional a la concentración de glucosa. glucosa oxidasa Glucosa gluconato + H 2 O 2 peroxidasa H 2 O 2 + cromógeno H 2 O + cromógeno oxidado (coloreado) MATERIAL: Tubo Vacutainer (tapón oro con activador de coagulación).

elimina 5 g de urea en 24 horas; una dieta rica en proteínas puede elevar esta cifra hasta 60 g en 24 horas. El efecto de la insuficiencia renal sobre los líquidos corporales depende de:

  1. La ingestión de agua y alimento.
  2. El grado de deterioro de la función renal. Cuando hay disminución de nefronas funcionales se disminuye la tasa de ultrafiltración glomerular (TFG) y esto ocasiona que los niveles de urea, creatinina y ácido úrico que se excretan por la orina aumenten de forma progresiva en la sangre. En general, urea, creatinina y ácido úrico, son los productos terminales del metabolismo nitrogenado y deben eliminarse del organismo para garantizar el mantenimiento del metabolismo proteico normal de las células. En la insuficiencia renal aguda y crónica, las concentraciones de estas sustancias, sobre todo urea y creatinina, constituyen un medio importante para valorar el grado de insuficiencia renal. DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO DE UREA OBJETIVOS:
  3. Determinar la concentración de nitrógeno de urea en la sangre.
  4. Conocer la importancia clínica de esta determinación. PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO: En el slide se deposita una gota de muestra del paciente, que se distribuye uniformemente desde la capa difusora a las capas reactivas. La urea se difunde a la capa reactiva y en presencia de ureasa, la urea se hidroliza en amoniaco y bióxido de carbono. El slide sólo permite el paso del amoníaco a la capa de pigmentación donde reacciona con el indicador amónico para dar lugar a una coloración. Se determina la densidad de reflexión del colorante que es proporcional a la concentración de urea en la muestra. NH 2 / ureasa O = C NH 3 + CO 2
    NH 2 NH 3 + indicador amónico coloración proporcional a la concentración de urea MATERIAL: Tubo Vacutainer (tapón oro con activador de coagulación). Tubo eppenford 1.5 mL. Pipeta de transferencia.

MATERIAL BIOLÓGICO:

Suero (no hemolizado, no lipémico). REACTIVOS: Kit VITROS BUN/UREA DT. APARATOS: Vitros DT60 II Centrífuga clínica. MÉTODO:

  1. En condiciones antiséticas extraer la muestra de sangre con el tubo vacutainer (tapón oro con activador de coagulación) y homogeneice por inversión de 8 a 10 veces. Posteriormente centrifugar a 2500 r.p.m. durante 10 minutos.
  2. Separar el suero cuidadosamente con una pipeta transferencia al tubo eppendorf.
  3. Analice la muestra en el Analizador VITROS DT60 II. CONVERSIÓN DE NITRÓGENO DE UREA (BUN) EN UREA. Fórmula de la urea: NH 2 / O = C
    NH 2 peso molecular de la urea = 60 peso molecular urea 60 nitrógeno de urea = ——————————— = —— = 2. peso molecular 2 átomos nitrógeno

mg de urea/dL = mg de nitrógeno de urea x 2.14 = mg/dL CREATININA INTRODUCCIÓN: La creatina existe en músculo, cerebro y sangre, en estado libre y como fosfocreatina. La creatinina, el anhídrido de la creatina, es formada en gran parte en el músculo por deshidratación irreversible no enzimática del fosfato de creatina.

PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO:

En el slide se deposita una gota de muestra del paciente, que se distribuye uniformemente desde la capa difusora a las capas reactivas. La creatinina se difunde a la capa reactiva, donde es hidrolizada por la creatinina amidinohidrolasa a creatina. La creatina amidinohidrolasa convierte la creatina en sarcosina y urea. En presencia de sarcosina oxidasa, la sarcosina es oxidada a glicina, formaldehído y peróxido de hidrógeno. El peroxido de hidrógeno en presencia de peroxidasa, oxida al cromógeno en un compuesto rojo. La concentración de peróxido de hidrógeno es proporcional a la concentración de creatinina. creatinina amidinohidrolasa creatinina + H 2 O creatina creatina amidinohidrolasa creatina + H 2 O sarcosina + urea sarcosina oxidasa sarcosina + ½ O 2 + H 2 O glicina + formaldehído + H 2 O 2 peroxidasa H 2 O 2 + cromógeno compuesto de color rojo + H 2 O MATERIAL: Tubo Vacutainer (tapón oro con activador de coagulación). Tubo eppenford 1.5 mL. Pipeta de transferencia. MATERIAL BIOLÓGICO: Suero (no hemolizado, no lipémico). REACTIVOS: Kit VITROS CREATININA SÉRICA DT. APARATOS: Vitros DT60 II Centrífuga clínica. MÉTODO:

  1. En condiciones antiséticas extraer la muestra de sangre con el tubo vacutainer (tapón rojo con activador de coagulación) y homogeneice por inversión de 8 a 10 veces. Posteriormente centrifugar a 2500 r.p.m. durante 10 minutos.
  2. Separar el suero cuidadosamente con una pipeta transferencia al tubo eppendorf.
  3. Analice la muestra en el Analizador VITROS DT60 II.

ÁCIDO ÚRICO

INTRODUCCIÓN:

El producto final del catabolismo de las purinas (adenina y guanina) es el ácido úrico. La adenosina y guanosina, son convertidas en ácido úrico por la vía de la xantina, reacciones catalizadas por la xantina oxidasa. La xantina oxidasa es muy activa en el hígado, intestino delgado y riñón. La excreción del ácido úrico se hace por vía renal. Las purinas en exceso provenientes de hiperproducción, recuperación inadecuada, excreción ineficaz, destrucción celular masiva o ingestión elevada de purinas, puede conducir a un aumento de ácido úrico en la sangre (hiperuricemia). Si la concentración de ácido úrico en el plasma excede a su solubilidad, el plasma se sobresatura y pueden precipitarse cristales de urato de sodio. Existen dos fuentes de ácido úrico: la endógena por destrucción de tejidos del propio organismo y la exógena proveniente de la alimentación. Los cristales de urato de sodio se pueden reunir y depositar en los tejidos blandos, particularmente en las articulaciones o alrededor de ellas. Estos depósitos de urato de sodio son denominados tofos. La acumulación de cristales de urato de sodio en los tejidos, incluyendo la fagocitosis de los cristales por los leucocitos polimorfonucleares en los espacios articulares, puede conducir a una reacción inflamatoria aguda llamada artritis gotosa aguda. Los cambios inflamatorios inducidos por el depósito de tofos pueden generar artritis gotosa crónica, dando por resultado la destrucción de las articulaciones. Los alimentos ricos en purinas pueden provocar ataques agudos de gota en individuos susceptibles. Las purinas se encuentran en la mayoría de los tejidos animales principalmente en hígado, riñones, vísceras y mariscos (sardina, salmón, atún, anchoas, ostión, camarón, calamar), en leguminosas secas (garbanzos, lentejas, frijoles y habas), verduras (chícharos, espárragos, champiñones y coliflor). La dieta del gotoso debe intentar conseguir el peso adecuado, reducir o suprimir bebidas alcohólicas y restringir las purinas del alimento. Una dieta adecuada pobre en purinas ayuda a que descienda el valor de urato de sodio en el plasma. Debe ingerirse en su caso: leche y sus derivados, cereales, pastas, papas, verduras y hortalizas (salvo las señaladas). Dentro de los productos carnícos: ingerir carne blanca (75-100 gramos) y no sobrepasar la cantidad recomendada. Es también importante reducir la obesidad, si existe, y el consumo de bebidas alcohólicas, el cual puede provocar una crisis aguda. También se ha observado que los bebedores presentan cifras de urato de sodio superiores a las de los no bebedores. DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO OBJETIVOS:

  1. Determinar los niveles de ácido úrico en sangre.
  2. Conocer la utilidad clínica de esta determinación.

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE MEDICINA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

QUÍMICA SANGUÍNEA

FECHA: NÚMERO DE MATRÍCULA:

ELEMENTO: RESULTADO VALORES DE REFERENCIA

GLUCOSA, mg/dL 70 – 100 NITRÓGENO DE UREA, mg/dL 9 - 20 (hombre) 7 – 17 (mujer) UREA, mg/dL 19 – 43 (hombre) 15 – 36 (mujer) CREATININA, mg/dL 0.8 – 1.5 (hombre) 0.7 – 1.2 (mujer) ÁCIDO ÚRICO, mg/dL 3.5 – 8.5 (hombre) 2.5 – 6.2 (mujer) ANÁLISIS DE RESULTADOS: RESPONSABLE:

CUESTIONARIO:

  1. ¿Cuáles son los factores de riesgo que conducen a una diabetes?
  2. ¿Cuáles son los signos y síntomas generales de la uremia?
  3. Definir aclaramiento renal de creatinina.
  4. Mencionar manifestaciones clínicas de la gota.