PRÁCTICA: TINCIÓN DE GRAM
Duración:
Fecha: 2014
1 FUNDAMENTO TEÓRICO
Tinción para identificar bacterias. Se usan 4 soluciones:
Un primer colorante que colorea como el cristal violeta; el lugol que fija las tinciones; un decolorante como alcohol-acetona y un
colorante de contraste (de distinto color) como la safranina.
2 OBJETIVOS
Son dos: Diferenciar bacterias GRAM + de bacterias GRAM - y aprender a usar las tinciones y observaciones al microscopio.
3 MUESTRAS, REACTIVOS Y MATERIAL USADO
Reactivos
Colorantes: cristal violeta 1% y safranina 0,5%.
Mordiente: Iodo diluido (Lugol).
Decolorante: Alcohol (95%)-acetona. (1:1)
Agua destilada, agua corriente y aceite de inmersión.
Material
-Guantes – Asas de siembra – Cristalizadores y varillas de soporte – Portaobjetos – Rotulador – Papel de filtro – Frasco
cuentagotas – Frasco lavador
Equipos
Mechero Bunsen y microscopio.
4 PROCEDIMIENTO
1) Fijación de frotis de las bacterias.
2) Teñir con cristal violeta 1’.
3) Lavar con agua.
4) Echar Lugol 1’.
5) Lavar con agua.
6) Decolorar con alcohol-acetona unos 30”.
7) Lavar con agua.
8) Teñir con safranina 1’.
9) Lavar con agua.
10) Secar al aire.
11) Ver al microscopio.
6 RESULTADOS Y OBSERVACIONES
