MICROSCOPIO
A TENER EN CUENTA
Colocar la muestra en la platina y mover hasta que se vea bien
Empezar a observar siempre con el objetivo más pequeño
Enfocar con las ruedas micrométricas y micrométricas
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Microscopía: Guía Completa de Técnicas y Procesamiento de Muestras, Apuntes de Biología Celular
Prácticas Biología Celular Imágenes
Tipo: Apuntes
2019/2020
1 / 23
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MICROSCOPIO
A TENER EN CUENTA
Colocar la muestra en la platina y mover hasta que se vea bien Empezar a observar siempre con el objetivo más pequeño Enfocar con las ruedas micrométricas y micrométricas
SANGRE
COMPONENTES DE LA SANGRE
Plasma: % Células: %
Glóbulos rojos, Eritrocitos: %45, Sin núcleo, De color rosa claro con el centro blanco
Plaquetas, Trombocitos: Pequeños puntos morados
Glóbulos blancos, Leucocitos Granulocitos Neutrófilos: Casi sin color, Con varios núcleos
Eosinófilos: Tinte rosa ácido de eosina, Con varios núcleos
Basófilos: Tinte azul básico de hematoxilina, Con un núcleo grande
Agranulocitos Monocitos: Gran núcleo con forma de riñón
Linfocitos: Gran núcleo que ocupa casi toda la célula
- Corte: Necesitamos dos aparatos: El baño de agua o de flotación y el microtomo En el microtomo se colocan el bloque en el portabloques y la cuchilla en el portacuchillas Después se realizan los cortes, de unas 3-5 micras
El baño de la muestra se realiza con agua templada a 37C para desparafinar e hidratar
Por último se meten los tejidos en portas en una estufa a 60C
- Tinción: Antes de nada hay que eliminar la parafina con alcoholes en cubetas de alcohol decrecientes para rehidratar
Los tintes más usados son la hematoxilina-eosina y el tricrómico de masson Al meter la muestra en la cubeta de hematoxilina durante 5 minutos los núcleos de las células se tiñen de azul Al meter la muestra en la cubeta de eosina durante 10 segunds los citoplasmas de las células se tiñen de rojo
Después se lava la muestra con agua Después de deshidratar se pone otro cristal encima de la porta y la muestra con pegamento no miscible en agua
PROCESAMIENTO QUÍMICO DE MICROSCÓPIO ELECTRÓNICO
- Fijación Se realiza la fijación con el glutaraldehído y la postfijación con el tetróxido de osmio Después se pasa a la deshidratación con alcoholes de graduación creciente hasta el propileno
- Inclusión La inclusión se realiza en cápsulas de epon
- Corte Los cortes se realizan con el ultramicrotomo Para el microscopio óptico se realizan cortes semifinos de una micra, y finos entre 20 y 50 micras para electrónico Después hay que secar la muestra
- Tinción y Contraste La tinción se realiza con azul de toluidina, y no se hidrata al ser hidrofóbico; se lava con alcohol y se seca y monta El contraste se realiza con acetato de uranio o citrato de plomo; después se lava y se seca
PROCESAMIENTO FÍSICO DE MICROSCÓPIO ÓPTICO
- Fijación Los 2 o 3 días se pueden acortar 10 minutos con el procesamiento físico basado en la congelación Se empieza congelando el tejido a -20C para conseguir una fijación física y que se endurezca Hay que utilizar substancias de crioprotección para que el tejido no se rompa debido a la congelación Las substancias usadas en la fijación son el isopentano y el nitrógeno líquido No se realiza la deshidratación
- Inclusión Se podría decir que no se realiza ninguna inclusión, sino una congelación Se usa el criostato, un microtomo que está dentro de una cámara a -20C para conservar el tejido congelado
La congelación se hace con una base y una substancia crioprotectora llamada OCT Se aplica un poco de isopentano a -50C que le dará dureza homogenea
Hay que dejarlo congelar durante 1 minuto
- Corte Se realizan cortes entre 5 y 10 micras con bloque de hielo y cuchilla
- Tinción La flumetadulina hará que la tinción se realice más rápido que con la hematoxilina-eosina Después de poner la muestra en la porta ya está lista para la observación
LA CÉLULA VEGETAL
CARACTERÍSTICAS DE LA CÉLULA VEGETAL
TERMINOLOGÍA
Almidón: Glúcido de reserva de las células vegetales Colénquima: Tejido permanente sencillo de único tipo celular que actúa como sostén Cutícula: Capa cerosa protectora de las células vegetales Envés: Cara inferior de la lámina de una hoja Epidermis: Tejido permanente complejo de más de un tipo celular que actúa como protector Esclerénquima: Tejido permanente complejo de más de un tipo celular que actúa como sostén Estomas: Poros de la epidermis que permiten la comunicación con el ambiente gaseoso al abrirse y cerrarse Floema: Tejido permanente complejo de más de un tipo celular que actúa como conductor al coger sustancias Haz: Cara inferior de la lámina de una hoja Parénquima: Tejido permanente complejo de más de un tipo celular que actúa como protector Plasmodesmos: Uniones que permiten el contacto entre células vegetales Plastos / Plastidios: Orgánulos propios de células vegetales que producen y almacenan compuestos químicos Tinción Fast green safarina: Tinte típico verde azulado con fracciones rojas para colorear células vegetales Tonoplasto: Membrana de la enorme vacuola de las células vegetales Xilema: Tejido permanente complejo de más de un tipo celular que actúa como conductor al llevar sustancias
CÉLULAS VEGETALES Y CÉLULAS ANIMALES
En común: Membrana celular, Citoplasma, Núcleo Mitocóndrias, Aparato de Golgi, Bacuolas Retículo endoplasmático, Ribosomas, Lisosomas, Peroxisomas Solo en células vegetales: Plastos (Plastidios): Los más importantes Cloroplastos Pared celular: Les da forma, En consecuencia citocinesis diferente Aparato de Golgi más grande: Para sintetizar los componentes de la pared celular Bacuola enorme: Distintas funciones, Guarda almidón, Su membrana se llama tonoplasto Plasmodesmos: Estructuras que unen las células vegetales entre ellas Solo en células animales: Centriolos: Necesarias para la división celular, Gracias a ellos algunos tienen cilios y flagelos Bacuolas pequeñas: Guardan glucógeno
TEJIDOS DE PLANTAS
Meristemos: Puntuales, Con capacidad de división Apical Intercalar Lateral Permanentes Tejidos sencillos: Con un solo tipo celular, Con capacidad de división Fundamental: Parénquima Sostén: Colénquima Tejidos complejos: Con más de un tipo celular, Sin capacidad de división Protección: Epidermis, Peridermis Sostén: Esclerénquima Conductores: Floema (Coge), Xilema (Lleva)
EPITELIOS Y CONJUNTIVOS
EPITELIOS
Esquema general Glandulares Tinción: Azul alcial, Tinción de Pass (Rosa) De revestimiento Número de capas de células Simple Estratificado Pseudoestratificado Forma de las células Plano Cúbico Cilíndrico Presencia de otras características/diferenciaciones En epitelio estratificado plano indicar si es o no Queratinizado Papilar Indicar la presencia Chapa estriada/ribete en cepillo (microvellosidades) Cilios Células mucosecretoras (caliciformes) Siempre hay Lamina basal: Parte no epitelial unido al epitelio Endotelio: Capa epitelial de la membrana basal Membrana de Descemet: Bajo el endotelio Membrana de Bowman: Encima del epitelio Tipos especiales de epitelios Epitelio de transición o urinario Epitelio seminífero
Tipos
Simple plano Simple cúbico Simple cilíndrico con y sin cilio
Ps.estr. cilíndrico sin cilios Ps.estr. cilíndrico con cilios Ps.estr. cilíndrico con pseudocilios
Pseudoestratificado de transición
Estratificado cilíndrico
Estratificado plano no queratinizado Estratificado plano queratinizado
CONJUNTIVO
Esquema general Elementos principales Células Matriz extracelular Fibras Fibras de colágeno Fibras elásticas Fibras reticulares Sustancia fundamental Tipos Reticular: Tejidos y fibras reticulares Fibrilar TCF: Predominio de fibras de colágeno Denso: Más fibras que células Ordenado: Haces de fibras paralelos Desordenado: Haces de fibras entrecruzados Laxo: Más células que fibras Elástico: Predominio de fibras elásticas Mucosa: Abundante sustancia fundamental Adiposo: Especializado en almacenamiento de lípidos
Clasificación
Laxo Denso ordenado Denso desordenado
MUESTRAS
Esófago Epitelio: Estratificado, Plano, Papilar, No queratinizado Conjuntivo: Denso desordenado
Enterocitos del Intestino Epitelio: Simple, Cilíndrico, No papilar, No queratinizado, Vellosidades Conjuntivo: Laxo
Cornea Epitelio: Estratificado, Plano, No papilar, No queratinizado Conjuntivo: Denso, Ordenado
UTERO
Clasificación Epitelio: Simple, Columnar, No queratinizado, No papilar Conjuntivo: Laxo Glándulas: Exocrina, Simple, Tubular
Partes y Cambios durante el ciclo menstrual Partes del útero Endometrio: Parte exterior, Cambia de grosor durante el mes Miometrio: Parte central, Cambia de grosor durante el mes Perimetrio: Parte interior, No cambia de grosor Fases del ciclo menstrual Fase proliferativa: El útero crece Fase secretora: El útero es muy grande Fase menstrual: El útero se destruye
PIEL DE PIE
Clasificación Epitelio: Estratificado, Plano, Papilar, Queratinizado Conjuntivo: Denso, Desordenado Glándulas: Simples, Tubulares, Contorneados, Sudoríparos, Secreción merocrina
Estratos Estrato Córneo: Sus células sin núcleo mueren formando queratina y queratinizándolo Estrato Granular: Con células llenas de queratohialina Estrato Espinoso: Con muchas desmosomas entre células Estrato Basal: Zona germinativa con actividad mitótica + Queratinocitos que producen queratina
GLÁNDULAS Y CONDUCTOS
GLÁNDULAS
Esquema general Partes esenciales Lóbulos Lobulillos Conductos Intralobulillares: Dentro de los lobulillos Intercalares: Con células cúbicas Estriado: Con células cilíndricas con inbaginaciones hacia la luz Interlobulillares: Entre lobulillos Interlobulares: Entre lóbulos Principales: Vierten el contenido de los conductos interlobulillares hacia la luz Tipos Serosas: Oscuros, Forma acinar, Núcleos centrales, Secretan enzimas Mucosas: Claros, Forma tubular, Núcleos basales, Secretan lisinas Seromucosas: Mixtas Clasificación Unicelular Multicelular Porción ductal excretora Simple: No ramificada Compuesta: Ramificada Porción secretora Forma Tubular Alveolar Tubuloalveolar Sacular Tipo Simple Ramificada Enrollada
GLÁNDULAS Y CARTÍLAGO
GLÁNDULA PARÓTIDA
Glándulas: Compuestas, Acinares, Serosas Otros tejidos: Abundante tejido adiposo, Algunos nervios
TRÁQUEA
Capas de fuera hacia adentro: Epitelio ciliado + Conjuntivo elástico o Pericondrio + Cartílago + Glándulas Glándulas: Compuestas, Tubuloacinares, Seromucosas Epitelio: Pseudoestratificado, Cilíndrico, Ciliado, Con células caliciformes Conjuntivo: Con fibras elásticas, Ni denso ni laxo Cartílago: Grupos isogénicos condroblastos y condrocitos, Matriz territorial más basófila que intraterritorial Pericondio: Conjuntivo elástico detrás del cartílago
MÚSCULO
TIPOS DE TEJIDO MUSCULAR
Liso En vísceras o aparatos internos con luz, Por ejemplo en el aparato digestivo Movimiento involuntario, Contracciones débiles Inervación difusa Células: Cortas, Fusiformes, Con extremos afilados, Sin estrías, Unidas entre sí por ramificaciones Núcleos: Uno por celula, Central, Alargado, Eucromatina Esquelético En el esqueleto Movimiento voluntario Inervación individual, Unidad motora: Conjuntivo entre fibra muscular + Neurona Células: Fibras, Largas, Sarcolema + Sarcoplasma, Estrías debidas a la actina y la miosina Núcleos: Estriadas, En posición basal pegados al sarcolema, Fibras multinucleadas, A misma distancia Cardíaca En el corazón Movimiento involuntario Inervación difusa Células: Fibras, Largas, Cilíndricas, Mono o dinucleadas, Tabiques o discos intercalares: Uniones, Estrías Núcleos: Redondos, Centrales
TEJIDO ARLEDEDOR DEL MÚSCULO
Mucho cartílago Conjuntivo Endomisio: Entre fibras Perimisio: Entre haces de fibras Epimisio: Rodea todo el músculo Músculo Rosa + Conjuntivo Azul
MUESTRAS
Liso Esquelético Cardíaco
MUESTRAS
Hueso esponjoso laminar
Hueso compacto osteonal
Osificación endocondral
Otros Osificación intramembranosa Hueso esponjoso no laminar Hueso compacto
TEJIDO NERVIOSO
ASPECTOS TEÓRICOS
Células Neuronas Soma: Basofílica, Golgi perinuclear, Gránulos de Nissl con ribosomas, Eucromatina Prolongaciones Axón: Uno, Largo, Fino, Poco ramificado Dendritas: Muchas, Cortas, Gruesos, Más ramificadas
Glía SN central: Astrocitos + Oligodendrocitos + Microglía + Células del epéndimo SN periférico: Células de Schwann + Células satélite
Sistema nervioso Central: Encéfalo + Médula espinal Sustancia gris: Con neuronas Sustancia blanca: Con prolongaciones nerviosas Periférico: Nervios + Ganglios + Receptores Nervios: Haces de fibras nerviosas periféricas Conjuntivo Endoneuro: Rodea un haz Perineuro: Rodea un fascículo Epineuro: Rodea un nervio Ganglios: Conjuntos de cuerpos neuronales localizados fuera
Fibras nerviosas Tipos: Axón + Envoltura Mielínicas: Un axón rodeado de una vaina mielínica formada por una célula de Schwann Amielínicas: Conjunto de axones rodeado por una célula de Schwann sin formar mielina Zonas en fibras mielínicas Cisuras de Schmidt-Lantermann: Zonas de empaquetamiento incompleto de mielina Nódulos de Ranvier: Lugares de interrupción de la mielina Mesoaxones: Zonas de unión entre el axón de la mielina, Interiores y exteriores
Tinciones Sales de plata Azul de toluidina Azul alcial Hematoxilina eosina