Docsity
Docsity

Prepara tus exámenes
Prepara tus exámenes

Prepara tus exámenes y mejora tus resultados gracias a la gran cantidad de recursos disponibles en Docsity


Consigue puntos base para descargar
Consigue puntos base para descargar

Gana puntos ayudando a otros estudiantes o consíguelos activando un Plan Premium


Orientación Universidad
Orientación Universidad


practiques bioqumica, Ejercicios de Bioquímica

Asignatura: Bioquímica, Profesor: , Carrera: Farmàcia, Universidad: UB

Tipo: Ejercicios

2017/2018

Subido el 02/01/2018

arola12
arola12 🇪🇸

4.1

(11)

19 documentos

1 / 6

Toggle sidebar

Esta página no es visible en la vista previa

¡No te pierdas las partes importantes!

bg1
PRÀCTIQUES DE BIOQUÍMICA. Curs 2014-15
Cognoms i nom: ……………………………………………………………………….
Grup de Pràctiques: ............................
Grup de Teoria: ...................................
GEL FILTRACIÓ
1. La gel filtració separa les molècules en funció de:
A. La càrrega elèctrica
B. El pes molecular
C. L’afinitat d’unió a la columna.
2. Quin ha estat l’objectiu de la separació cromatogràfica?
3. Quins són els components de la solució problema que volem separar i quins són
els seus pesos moleculars?
4. Justificar per què és adequat per l’objectiu de la pràctica, utilitzar el Sephadex G25.
5. Quins són els components de la barreja de calibratge i quins són els seus pesos
moleculars?
6. Quina informació proporciona el calibratge de la columna?
7. La fracció de la proteïna que heu purificat correspon a la fracció d’elució del:
A. dicromat potàssic
B. blau dextrà
8. Si volem separar dues proteïnes per gel filtració, una de 800 Da i l’altra de 8.000
Da, podem utilitzar una columna amb un límit superior de fraccionament (o límit
d’exclusió) de 5.000 Da: V F
9. Si volem separar entre tres proteïnes de mida, 1.000 Da, 30.000 Da., 50.000
Da., podem utilitzar una columna amb un rang de fraccionament entre 5.000 i
20.000 Da.: V F
10. De les tres proteïnes anteriors, quines poden penetrar les microesferes del gel:
A. 1.000 Da.
B. 30.000 Da.
C. 50.000 Da.
pf3
pf4
pf5

Vista previa parcial del texto

¡Descarga practiques bioqumica y más Ejercicios en PDF de Bioquímica solo en Docsity!

PRÀCTIQUES DE BIOQUÍMICA. Curs 2014-

Cognoms i nom: ……………………………………………………………………….

Grup de Pràctiques: ............................

Grup de Teoria: ...................................

GEL FILTRACIÓ

  1. La gel filtració separa les molècules en funció de: A. La càrrega elèctrica B. El pes molecular C. L’afinitat d’unió a la columna.
  2. Quin ha estat l’objectiu de la separació cromatogràfica?
  3. Quins són els components de la solució problema que volem separar i quins són els seus pesos moleculars?
  4. Justificar per què és adequat per l’objectiu de la pràctica, utilitzar el Sephadex G25.
  5. Quins són els components de la barreja de calibratge i quins són els seus pesos moleculars?
  6. Quina informació proporciona el calibratge de la columna?
  7. La fracció de la proteïna que heu purificat correspon a la fracció d’elució del: A. dicromat potàssic B. blau dextrà
  8. Si volem separar dues proteïnes per gel filtració, una de 800 Da i l’altra de 8. Da, podem utilitzar una columna amb un límit superior de fraccionament (o límit d’exclusió) de 5.000 Da: V F
  9. Si volem separar entre sí tres proteïnes de mida, 1.000 Da, 30.000 Da., 50. Da., podem utilitzar una columna amb un rang de fraccionament entre 5.000 i 20.000 Da.: V F
  10. De les tres proteïnes anteriors, quines poden penetrar les microesferes del gel: A. 1.000 Da. B. 30.000 Da. C. 50.000 Da.

QUANTIFICACIÓ DE PROTEÏNES PEL MÈTODE DE BIURET

  1. Per què el reactiu de Biuret permet detectar la presència de proteïnes en una solució?

  2. Per a quantificar proteïna pel mètode de Biuret és necessari construir una recta de referència o recta patró. Quina informació ens proporciona aquesta recta?

  3. Què has addicionat al tub blanc o de referència, i quina és la seva finalitat?

  4. L’absorbància o densitat òptica (D.O.) obtinguda a 550 nm d’una solució de proteïna, després de reaccionar amb el reactiu de Biuret, és de 0.2. Si el volum total d’aquesta solució és de 5 ml, la quantitat total de proteïna de la solució és de:

  5. Observa el gràfic anterior. Si abans de fer la reacció del Biuret, la solució de la proteïna es dilueix a la meitat (dilució 1:2), la concentració de proteïna de la solució seria de 2 mg/ml V F

mg/ml BSA

D.O.

A. 1 mg/ml B. 20 mg C. 4 mg/ml

CINÈTICA ENZIMÀTICA

  1. Quines són les condicions d’assaig utilitzades per a mesurar l’activitat de l’ α- amilasa: A. pH = B. Tº = C. Temps =
  2. Quin és el component present en la barreja de reacció que proporciona un pH constant i òptim a l’activitat α-amilasa?
  3. Quins són els productes de la reacció de l’ α-amilasa?
  4. Per què les concentracions finals de midó en els tubs de reacció, no són les concentracions inicials que has preparat en els tubs petits?
  5. La funció del reactiu dinitrosalicílic (DNS) que afegim a la barreja de reacció és:

A. Produir un canvi brusc de pH que atura la reacció. B. Produir un canvi de color en la barreja de la reacció quan es redueix el DNS.

  1. En la reacció de la α-amilasa, el dinitrosalicílic (DNS) és reduït pel substrat i no pels productes finals de la reacció: V F
  2. En realitat, en aquesta pràctica has desenvolupat dues reaccions: la reacció de l’α- amilasa amb el midó, i la reacció acoblada de reducció del DNS: V F
  3. Per què expresses l’activitat enzimàtica en μmols de maltosa/min: A. Perquè la maltosa és el substrat de l’enzim B. Perquè la maltosa es redueix donant color C. Perquè la maltosa és un dels productes de la reacció
  4. Si vols determinar el nivell d’un determinat enzim, en una mostra de sang d’un pacient, utilitzaràs concentracions relatives del substrat específic elevades, és a dir saturants, o més aviat, baixes? Justifica-ho.

10.Quina de les dues definicions de KM és la correcta: A. La KM és la meitat de la velocitat màxima. B. La KM és la concentració de substrat a la qual la velocitat de la reacció és la meitat de la velocitat màxima.

INFORME DEL TREBALL.

GEL FILTRACIÓ i QUANTIFICACIÓ DE PROTEÏNA

  1. Volum de la solució de proteïna problema aplicada a la columna:
  2. Volums aproximats de les 4 fraccions eluïdes de la columna:
  3. Després de representar gràficament la recta patró, determinar la concentració de proteïna de cadascuna de les fraccions obtingudes a la columna i la quantitat total de proteïna, en mil·ligrams, de la fracció més concentrada:
  4. La concentració teòrica de la solució de proteïna aplicada a la columna és de 30 mg/ml. Considerant el volum d’aquesta solució que has aplicat a la columna, calcula els mil·ligrams teòrics de proteïna que has aplicat:
  5. Considerant els mg de proteïna aplicats a la columna i els mg de proteïna obtinguts en la fracció més concentrada de la columna (apartats anteriors 3 i 4), calcula el percentatge de rendiment de la purificació, en aquesta fracció:

ELECTROFORESI DE PROTEÏNES

  1. Determinar, en μg, la quantitat de proteïna de les mostres que heu aplicat en l’electroforesi:
  2. Nombre de bandes de proteïna observades desprès de tenyir i destenyir el gel:
  3. Mida aproximada de la proteïna purificada: Aquesta mida observada, correspon a la albúmina bovina?