Laboratorio Semana 1
1.- ¿Cul es el fundamento y procedimiento para realizar la tincin de gram? ¿Qu rol cumple cada reactivo
en sta?
El fundamento de la tinción de gram se basa en la estructura de la pared celular bacteriana, ya que;
- La pared celular de las bacterias gram + poseen una gruesa
capa de peptidoglican, por lo que, son capaces de retener el
colorante violeta de genciana y no son decoloradas por el alcohol
acetona quedando de un color morado.
- La pared celular de las bacterias gram – poseen una delgada
capa de peptidoglican unida a una segunda membrana plasmática
externa por medio de lipoproteínas, por lo que, no retienen el
violeta de genciana y son decoloradas por el alcohol acetona. Se le
añade safranina como colorante de contraste adquiriendo el color
rosa.
Procedimiento y rol de cada reactivo:
1.- Se utiliza el colorante básico o primario el violeta de genciana. (1 min)
2.- Se añade el lugol que actúa como mordente en esta tinción por el iodo, fijando el cristal de violeta y formando
complejos de cristal violeta-iodo en ambos tipos bacterianos. (1 min)
3.- Decoloración con alcohol acetona (paso más importante de la tinción), donde las bacterias que son gram
positivas al poseer gran cantidad de peptidoglican en su pared, van a retener estos complejos de cristal violeta
producto de la deshidratación de la pared que causa el alcohol (los complejos no pueden salir), y las bacterias que
son gram negativas van a perder estos complejos de cristal violeta lugol. (5 segundos)
4.- Se añade la safranina como colorante de contraste, por lo que, las bacterias gram negativas que estaban
decoloradas, captan la safranina y las gram positivas como ya están teñidas con estos complejos de cristal violeta
lugol, se van a mantener de color violeta. (30 segundos)
2.- ¿Qu aspectos se deben consignar para realizar la caracterizacin macroscpica de una cepa bacteriana?
Se deben considerar aspectos como:
- Tamaño (pequeñas, medianas o grandes).
- Forma.
- Color.
- Bordes (regulares e irregulares).
- Aspecto (Cremoso, húmedo, brillantes,etc).
- Hemólisis (Alfa, Beta o Gamma hemólisis).
3.- Realiza un cuadro descriptivo con los aspectos descritos en la pregunta anterior y compltalo para
enterobacterias, Staphylococcus spp. Streptococcus spp., Enterococcus spp., y Pseudomonas spp.
Microorganismo Características macroscópicas Imagen
Staphylococcus
aureus
Cocáceas gram(+)
en racimo
Colonias pequeñas a medianas, color
dorado o blanquecino-grisáceas, de forma
circular y bordes redondeados. Presentan
aspecto cremoso y beta hemólisis.
*(No siempre presentan color dorado
otorgado por pigmento staphylosantina)
