PREPARACIÓN DEL
INÓCULO
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Preparación de Inóculos Microbianos para Fermentación Industrial, Diapositivas de Biotecnología
El proceso de preparación de inóculos microbianos, desde la reactivación de cepas conservadas hasta la inoculación en tanques germinadores a escala de producción. Se detallan los procedimientos para despertar la actividad biológica de una cepa, el crecimiento en medios líquidos y sólidos, y el escalado del cultivo para obtener un volumen suficiente de inóculo. Se enfatiza el control de parámetros críticos como el ph, la temperatura y el oxígeno disuelto, así como el monitoreo del crecimiento mediante diversas técnicas. El documento proporciona una guía completa para la preparación de inóculos en fermentaciones industriales, abordando aspectos clave como la elección del medio de cultivo, la esterilización y las condiciones de operación durante el crecimiento. Se mencionan referencias bibliográficas relevantes para profundizar en el tema. Útil para estudiantes y profesionales en microbiología industrial y biotecnología.
Tipo: Diapositivas
2024/2025
1 / 12
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PREPARACIÓN DEL
INÓCULO
REACTIVACIÓN DE LA
CEPA
About Us
Despertar la actividad
biológica de una cepa
conservada (generalmente
en criopreservación con
glicerol al 15-20% a -80 °C o
liofilizada).
Requiere comprobación de pureza mediante siembras en medios selectivos. El tipo de medio de recuperación debe ser no selectivo y favorecer el metabolismo basal del microorganismo.
CRECIMIENTO EN MEDIO LÍQUIDO O SÓLIDO (ETAPA INTERMEDIA) About Us Aumentar el número de células viables para preparar una biomasa densa y activa. 🔸 Elección del medio: Medio sólido (agar) si se busca selección o aislamiento. Medio líquido (caldo) si se busca crecimiento exponencial y preparación para escalado. Parámetros fisiológicos pH ajustado a 6.5–7.0 (dependiendo del microorganismo). Agitación constante (en líquido) para favorecer oxigenación (80–250 rpm). Control de DO600 (densidad óptica a 600 nm) para monitoreo del crecimiento. Este cultivo no es aún el inóculo final, sino un cultivo intermedio que adapta al microorganismo al entorno de producción.
About Us
INOCULACION EN TANQUES GERMINADORES Preparación del medio de cultivo Se formula un medio líquido que favorezca el crecimiento rápido del microorganismo deseado. Por ejemplo, en fermentaciones con levadura se usa melaza diluida suplementada con: Nitrógeno asimilable (fosfato diamónico, urea) Fósforo, magnesio y zinc Antiespumantes si se prevé excesiva formación de espuma El medio es esterilizado previamente.
CONDICIONES DE OPERACIÓN DURANTE EL CRECIMIENTO Agitación continua: para evitar sedimentación y asegurar distribución uniforme de nutrientes y oxígeno. Aireación forzada: el oxígeno es crucial para el crecimiento respiratorio, especialmente en levaduras. pH y temperatura controlados: p. ej. 30 °C y pH 4.5–5.5 para Saccharomyces cerevisiae. Se evita la acumulación de subproductos tóxicos o acidificación extrema.
MONITOREO Y CONTROL Se realizan mediciones regulares de: Densidad óptica (600 nm) o biomasa seca pH y temperatura Concentración de azúcar residual Consumo de oxígeno o producción de CO₂ Se busca mantener al cultivo en fase logarítmica de crecimiento, evitando la fase estacionaria o de agotamiento de nutrientes.