Presentación de muestras, Apuntes de Biología

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Lic. Iliana Alicia Delgado Mg. Sc.

• Garantizar la calidad de la obtención, conservación y transporte de la muestra
• Integridad de las muestras de diagnóstico y mantener propiedades biológicas que la componen
• Normativas de obtención, transporte y estabilidad de las muestras
• La trazabilidad y seguridad del proceso.

• Confirmar la identidad del paciente.
• Comprobar que la solicitud de las pruebas analíticas contiene todos los datos correcta

y claramente cumplimentados.

• Verificar que el paciente ha seguido las instrucciones recomendadas antes de la recogida

o la toma de las muestras.

• Comprobar que se dispone de los recipientes y contenedores adecuados para las

pruebas solicitadas.

• Cumplir con el protocolo de higiene de lavado de manos.
• Recoger las muestras con las máximas condiciones de asepsia y siguiendo los protocolos

de actuación preestablecidos para la obtención de cada tipo de muestra. Todas

las muestras biológicas deben considerarse potencialmente contaminadas, de

ahí que para su obtención y manipulación deban cumplirse los criterios DE BIOSEGURIDAD

• Comprobar el cierre hermético de los recipientes contenedores una vez obtenidas

las muestras.

• Verificar la trazabilidad de la identificación de la solicitud con la identificación de

las muestras.

CRITERIOS

Variables de conservación

• Trazabilidad: debe describirse la forma en la cual se mantenga la identificación y la asociación inequívoca de las muestras y sus correspondientes peticiones, durante la obtención y el transporte.
• Tiempo: las muestras deben ser transportadas al laboratorio lo antes posible. aunque no hay pruebas concluyentes de que largos períodos de transporte pueden contribuir a la inexactitud de los resultados, el suero o plasma tienen que separarse tan pronto como sea posible del contacto con las células. en general, se recomienda un tiempo máximo de 2 horas, a partir de la obtención de la muestra.
• Temperatura: el transporte tiene que asegurar la temperatura de conservación de las muestras según su naturaleza, así como la de los constituyentes que se van a analizar. la temperatura afecta a la estabilidad de las muestras de diagnóstico, que requieren distintas temperaturas para mantener su estabilidad. tres son las condiciones de temperatura que permiten la conservación de la estabilidad de las muestras: Temperatura ambiente. en general, se considera temperatura ambiente la comprendida entre 18- 25 - c, Temperatura de refrigeración. es la comprendida entre 4-8ºC. la sangre en condiciones de temperatura de refrigeración inhibe el metabolismo de las células y estabiliza algunos constituyentes termolábiles. la sangre no tiene que refrigerarse si no se recomienda explícitamente. Temperatura de congelación. es la que está por debajo de los – 18ºC. CRITERIOS DE CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS

• Se debe poner en la etiqueta con que conservante se envía sea hielo seco o dióxido de carbono para que tomen las precauciones necesarias para los gases de carbono
• Si se utiliza nitrógeno se debe observar que el recipiente primario soporte tales temperaturas
• En el caso de material infeccioso de clase 6.2 (m.o. patógenos o toxinas que originen enfermedades en humanos o animales)
• También se debe tener en cuenta la orientación del recipiente primario
• Agitación de la muestra
• Exposición a la luz
• Registro de incidencias para el transporte

MATERIAL DE LABORATORIO PARA OBTENCIÓN, CONSERVACIÓN YTRANSPORTE DE LAS MUESTRAS

• TUBOS Y CONTENEDORES DE MUESTRAS SANGUÍNEAS
• Tubos sin aditivos
• Tubos con anticoagulantes EDTA K3 (sal tripotásica del ácido etileno-diamino- tetraacético).
• Tubos con conservantes de estabilidad de muestra inhibidores del metabolismo, antiglucolíticos, etc.,

CONTENEDORES PARA MUESTRA DE ORINA

El contenedor para muestras de orina debe cumplir

ciertos requisitos mínimos de calidad, como que

• sea limpio, que evite los derramamientos y que el

material empleado

• sea desechable e inerte y esté libre de sustancias

que puedan interferir con la muestra, como los

detergentes.

Existen contenedores con dispositivos de

transferencia

a tubos mediante un sistema de vacío que evita el

riesgo de contaminación, derramamiento y

exposición accidental del personal sanitario a los

contagios.

• Para muestras de orina de 24 horas, los

contenedores, además de reunir todas estas

especificaciones previas, deben cumplir la

condición especial de ser opacos, para proteger de

la luz ciertos metabolitos fotosensibles, como las

porfirinas.

MATERIAL PARA MUESTRAS BIOLÓGICAS Los principales materiales que se utilizan para la toma de muestras de microbiología son:

• Torundas con diferentes medios de transporte, adecuan el medio de transporte para su posterior cultivo de bacterias o de virus.
• Agujas y jeringas para aspiración de muestras para su posterior cultivo.
• Contenedores y recipientes estériles y herméticos para muestras de heces, líquidos o tejidos.
• Frascos para hemocultivos.
• Viales para transporte de anaerobios: contienen una atmósfera de CO2 y un indicador que cambia de color en condiciones aerobias.
• Tubos para cultivo de orina con conservante ácido (ácido bórico). Permiten el cultivo de la orina, así como las pruebas de sensibilidad a las bacterias, manteniendo la viabilidad de los posibles microorganismos, a la vez que evitan su sobrecrecimiento.

Anticoagulantes Son aditivos que se eligen para asegurar que el componente que se va a analizar cambia lo menos posible antes del proceso analítico, que tienen propiedades para inhibir la coagulación sanguínea. Existen múltiples factores involucrados en el proceso de coagulación de la sangre. Los anticoagulantes son sustancias que previenen la formación de coágulos. Los hay de diferentes tipos, tanto sólidos como líquidos. Debe seleccionarse siempre el anticoagulante apropiado para el estudio que se va a realizar. Los anticoagulantes más usados para toma de muestras son:

- EDTA: este tipo de anticoagulante se utiliza principalmente para estudios de células sanguíneas (hemograma y citometría de flujo) y estudios de biología molecular (extracción de ADN y ARN y FISH). - Heparina: se utiliza en estudios de rutina y también en estudios específicos. Su presentación incluye heparina con concentraciones de sodio o de litio. En general, la heparina con litio se emplea para estudios de química de urgencias y la heparina sódica para estudios de linfocitos. - Citrato trisódico: se utiliza en los estudios de coagulación. En este caso la exacta proporción de sangre y anticoagulante es esencial para obtener resultados fiables. También es útil en la determinación de la velocidad de sedimentación globular, aunque recientemente se han comercializado sistemas que admiten tubos con EDTA para su determinación. - Oxalatos: son anticoagulantes menos comunes, que se utilizan ocasionalmente en las determinaciones de glucosa. - Fluoruro de sodio: se trata de un anticoagulante que inhibe la glucólisis.

CONSERVANTES QUÍMICOS

En ocasiones en necesario añadir conservantes a la orina de 24 horas

antes de comenzar el proceso de recogida, con el fin de evitar el

deterioro de algunos analítos (el más utilizado es el ácido acético );

también se emplean otros conservantes, como ácido bórico o ácido

clorhídrico. Se recomienda que sea el laboratorio el suministrador de

estos productos. Es necesario que el técnico especialista de laboratorio

encargado in forme debidamente al paciente sobre las precauciones que

ha de tomar, en particular del riesgo que implica manipular los

recipientes que contienen conservantes químicos.

Si existen varias opciones de conservación de una muestra, se optará

siempre por la menos peligrosa para el paciente.

• Utilizar el tiempo y la fuerza centrífuga relativa adecuados al tipo de muestra o procedimiento: la velocidad de una centrífuga se expresa en revoluciones por minuto (rpm) y la fuerza centrífuga relativa (FCR), en gravedades.
• Usar los elementos de protección personal indicados para el trabajo con este dispositivo (guantes, bata, etc.).
• Cargar o descargar el rotor dentro de una cabina de seguridad biológica si se trabaja con microorganismos clasificados como biorriesgo de nivel 11 o superior.
• Usar tubos que toleren bajas temperaturas en el caso de las centrífugas refrigeradas, para evitar que éstos se rompan o se fracturen.
• Centrifugar con los tubos bien tapados.
• Verificar el llenado de los tubos y usar tubos pareados para balancear la carga del rotor y evitar las vibraciones y los accidentes derivados de ella.
• No volver a centrifugar después de la centrifugación inicial.
• Evitar el uso del freno de la centrífuga, ya que ocasiona que las células se vuelvan a mezclar con el suero o plasma. Limpieza de la centrifuga en caso de rompimiento de los tubos

REQUISITOS MÍNIMOS PARA EL PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS Asegurar que sean aptas para proporcionar resultados fiables Las causas más frecuentes de rechazo de especímenes que se producen en el laboratorio son las siguientes:

• No cumplir las condiciones preanalíticas necesarias del paciente para los parámetros solicitados (ayuno, hora de la obtención de la muestra, si toma algún fármaco, etc.).
• Solicitud analítica sin identificar o mal identificada.
• Muestras con identificación incorrecta
• Utilización de un contenedor inadecuado.
• Volumen de muestra incorrecto: este criterio de rechazo de las muestras es especialmente crítico en la determinación de pruebas de coagulación o velocidad de sedimentación globular, ya que se ha de mantener la proporción exacta entre el volumen de la muestra y el de anticoagulante.
• Hemólisis: el grado de interferencia de la hemólisis depende de su intensidad, de la concentración real de analíto y de la metodología analítica que se emplea.
• Lipidemia: hay determinaciones cuyos resultados se alteran cuando existe un exceso de grasa en la muestra.
• Coagulación: la muestra se presenta coagulada, parcial o totalmente, aunque se extrajo con anticoagulante en el tubo. Puede deberse a una extracción lenta, a una mezcla incorrecta del anticoagulante con la muestra o a un defecto del propio reactivo anticoagulante, que alterará los resultados.

• Muestra insuficiente: muestra con la que no se pueden realizar la totalidad de las determinaciones que se han solicitado, porque se ha agotado el espécimen.
• Muestra mal identificada: se consideran mal identificadas aquellas muestras en las que no coinciden los datos de petición y las muestras obtenidas; no coincide el código de barras de la petición y el de las muestras; el código de barras está mal colocado; las muestras están sin identificar; el código de barras se ha despegado o se aprecia la manipulación de éste.
• Temperatura de transporte inadecuada: hay determinaciones que sólo se pueden realizar bajo estrictas condiciones preanalítica. Por ejemplo, el ácido láctico, los gases, el amonio o la homocisteina exigen el transporte en hielo del espécimen, pero las crioglobulinas requieren que su transporte sea en caliente. En la mayoría de analítos la temperatura es una variable continua y no afecta de forma brusca, sino que disminuye gradualmente la calidad de la muestra cuanto más se aleje de la temperatura óptima de transporte o de conservación.
• Transporte de muestras inadecuado: este parámetro es especialmente crítico en las muestras que llegan desde los centros secundarios o periféricos de extracción. Cuando el tiempo de transporte máximo estipulado se excede, se debe hacer constar y tomar las medidas de aviso o bien de rechazo de la muestra antes de efectuar las pruebas. De no cumplirse los parámetros mínimos de calidad preanalítica y trazabilidad entre petición, paciente y muestra, se ha rechazar el encargo