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Procariontes y eucariontes, Ejercicios de Biología

Trabajo de laboratorio, practica de laboratorio, donde se conoce por el microscipio los diferentes microorganismo que se encuentra en nuestras vidas diarias. skskskskskskskskkkkkssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssss

Tipo: Ejercicios

2021/2022

Subido el 21/04/2022

isabella-toscano-diaz
isabella-toscano-diaz 🇨🇴

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Guía de Laboratorio
Laboratorio de Biología II
Biología celular
Temas: Diversidad celular: Procariotas y
Tinción de Gram
Objetivo general
Conocer la composición de las células
procariotas
Objetivos específicos
Conocer algunos representantes de los
procariotas.
Identificar las bacterias Gram positivas y
Gram negativas.
Aplicar alguna técnica de coloración para
la observación de microorganismos a
través del microscopio.
Introducción
En la antigüedad los científicos dividieron
en dos reinos al mundo animal: Plantas y
animales. La introducción del microscopio
trajo consigo resultados que evidenciaron
que existen microorganismos que no
pueden ser considerados en ninguno de
los dos reinos ya mencionados.
Con el desarrollo del microscopio se
hizo evidente que algunos organismos
no podían ser considerados como
tales. Ernest Haeckel, estableció la
presencia de un tercer reino: El
Protista. En 1937 Edouard Chatton
sugirió el termino procariótico
(significa antes del núcleo), para
describir bacterias y el término
euariótique (significa núcleo
verdadero) para describir las demás
células. Con el desarrollo de la
microscopía electrónica y las técnicas
bioquímicas, se revelaron diferencias
celulares básicas que inspiraron
muchas propuestas de nuevas
clasificaciones. En 1969 R.H.
Whitaker propuso la clasificación de
cinco reinos que ha sido aceptada por
la mayoría de los biólogos, sugiriendo
la clasificación de los hongos en un
reino aparte del reino Fungí, y no
como parte del reino vegetal debido a
que los hongos no son fotosintéticos y
deben absorber nutrimentos
producidos por otros organismos.
De otro lado entre las células procariotas
se distinguen las bacterias y
cianobacterias, estas se distinguen
porque: no poseen organelos
membranosos internos que asistan las
estructuras intracelulares.; el DNA
tampoco está unido a proteínas y tienen
su propio sistema de duplicación adosado
a la membrana plasmática; presentan una
pared celular de composición química
específica, distinto de la composición de
las células vegetales y los hongos. Las
bacterias cobran gran importancia debido
a las funciones que cumplen en diversas
áreas como la industria, la medicina y la
agricultura. La mayoría de las células
bacterianas son unicelulares, pero son
propensas a la agregación.
Las bacterias se pueden clasificar de
acuerdo a su morfología o su tinción de
Gram.
En cuanto a la morfología las formas más
características son BACILOS, cuando
poseen forma de bastón, COCOS cuando
su forma es redonda, ESPIRILOS,
cuando tiene forma espiral, VIBRIÓN
cuando posee forma de coma, si existen
agregaciones con una disposición lineal
entre los cocos se denominan
ESTREPTOCOCO, y si la agregación se
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¡Descarga Procariontes y eucariontes y más Ejercicios en PDF de Biología solo en Docsity!

Guía de Laboratorio Laboratorio de Biología II Biología celular Temas: Diversidad celular: Procariotas y Tinción de Gram Objetivo general Conocer la composición de las células procariotas Objetivos específicos Conocer algunos representantes de los procariotas. Identificar las bacterias Gram positivas y Gram negativas. Aplicar alguna técnica de coloración para la observación de microorganismos a través del microscopio. Introducción En la antigüedad los científicos dividieron en dos reinos al mundo animal: Plantas y animales. La introducción del microscopio trajo consigo resultados que evidenciaron que existen microorganismos que no pueden ser considerados en ninguno de los dos reinos ya mencionados.

Con el desarrollo del microscopio se

hizo evidente que algunos organismos

no podían ser considerados como

tales. Ernest Haeckel, estableció la

presencia de un tercer reino: El

Protista. En 1937 Edouard Chatton

sugirió el termino procariótico

(significa antes del núcleo), para

describir bacterias y el término

euariótique (significa núcleo

verdadero) para describir las demás

células. Con el desarrollo de la

microscopía electrónica y las técnicas

bioquímicas, se revelaron diferencias

celulares básicas que inspiraron

muchas propuestas de nuevas

clasificaciones. En 1969 R.H.

Whitaker propuso la clasificación de

cinco reinos que ha sido aceptada por

la mayoría de los biólogos, sugiriendo

la clasificación de los hongos en un

reino aparte del reino Fungí, y no

como parte del reino vegetal debido a

que los hongos no son fotosintéticos y

deben absorber nutrimentos

producidos por otros organismos.

De otro lado entre las células procariotas se distinguen las bacterias y cianobacterias, estas se distinguen porque: no poseen organelos membranosos internos que asistan las estructuras intracelulares.; el DNA tampoco está unido a proteínas y tienen su propio sistema de duplicación adosado a la membrana plasmática; presentan una pared celular de composición química específica, distinto de la composición de las células vegetales y los hongos. Las bacterias cobran gran importancia debido a las funciones que cumplen en diversas áreas como la industria, la medicina y la agricultura. La mayoría de las células bacterianas son unicelulares, pero son propensas a la agregación. Las bacterias se pueden clasificar de acuerdo a su morfología o su tinción de Gram. En cuanto a la morfología las formas más características son BACILOS , cuando poseen forma de bastón, COCOS cuando su forma es redonda, ESPIRILOS , cuando tiene forma espiral, VIBRIÓN cuando posee forma de coma, si existen agregaciones con una disposición lineal entre los cocos se denominan ESTREPTOCOCO, y si la agregación se

dispone es forma de racimos de denomina ESTAFILOCOCOS. Para la observación de las bacterias, las tinciones se preparan en soluciones acuosas y orgánicas de colorantes o grupos de colorantes que confieren una gran variedad de colores a los microrganismos. Los colorantes no solo funcionan para realizar la tinción directa, sino que también suelen ser útiles para mostrar las funciones fisiológicas de los microorganismos con el empleo de tinciones supravitales. Tinción de Gram La tinción de Gram fue desarrollada por Christian Gram en 1884. A pesar de los años transcurridos desde entonces, la técnica apenas se ha modificado, y es de los primeros eslabones que se tienen en cuenta para la identificación bacteriana. Esta técnica tiene la capacidad de diferenciar dos grandes grupos de eubacterias: Gram Positivas (+), Gram negativas (-). La tinción de Gram requiere de cuatro soluciones

1. Primer colorante : Es un colorante básico que, en contacto con las células cargadas negativamente, reacciona con ellas coloreándolas. El más utilizado es el cristal violeta. 2. Solución mordiente : Fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el colorante y las células. Los mordientes empleados suelen ser sales metálicas, ácidos o bases, como, p.ej., el Lugol. 3. Agente decolorante : es un disolvente orgánico, p.ej. alcohol-acetona (1:1). 4. Colorante de contraste: Es un colorante básico de distinto color que el primer colorante, como, p.ej., la safranina o la fucsina. Los dos grupos bacterianos que distingue esta técnica difieren en el color con el que finalmente aparecen. Las bacterias Gram+ se teñirán de azul por el cristal violeta y no perderán esta coloración durante los pasos sucesivos. Las bacterias Gram- perderán la coloración inicial del cristal violeta en los siguientes pasos y se teñirán de rosa debido a la safranina. La diferencia está determinada por la composición de su envoltura celular. Las Gram+ poseen una malla de peptidoglicano en su parte más externa, mientras que las Gram-, recubriendo una fina capa de peptidoglicano, presentan una membrana externa que envuelve toda la célula. Una de las precauciones al realizar esta tinción es la de trabajar con cultivos en fase exponencial. De lo contrario se pueden obtener resultados falsos. P.ej. las bacterias Gram+ en fase estacionaria pueden aparecer como Gram-.

MATERIALES Y EQUIPOS

 Microscopio

 Mechero

 Portaobjetos y cubreobjetos

 Palillo

 Guantes

 Kumis o yogurt

 Toallas de papel

 Asa de inoculación punta

redonda

 Beaker

 Pipeta

 Agua destilada

 Goteros

 Papel filtro

REACTIVOS

 Azul de metileno

 Solución colorante de cristal

violeta

 Colorante de Gram(bacterias)

 Violeta de Genciana

 Aceite de inmersión

Figura 3. Secado de la muestra por calentamiento. Tomado de Google Parte 2 Técnicas para la coloración de las bacterias. Cada una comprende varios pasos como se explica a continuación: Coloración simple:  Preparar un frotis según la técnica antes descrita.  Colocar el portaobjetos sobre un soporte para tinciones.  Cubrir la preparación con 2 o 3 gotas de solución de azul de metileno y dejar enfriar 1 min (o cristal violeta y dejar 30s).  Lavar con agua.  Secar con papel filtro o encima del mechero. Figura 4. Adiciones de colorantes durante procedimiento. tomado de Google  Observar al microscopio y determinar forma, disposición y relación de tamaños de las distintas bacterias.







Coloración de Gram (técnica de Hucker)  Preparar un frotis según la técnica antes descrita.  Colocar el portaobjetos sobre un soporte para tinciones.  Cubrir con solución de cristal violeta y dejar actuar 1 min.  Lavar suavemente con agua del grifo.  Cubrir con lugol y dejar actuar 1 min.  Lavar de la misma manera.  Cubrir con etanol 95%( decolorante de Gram) y dejar 30 seg moviendo suavemente la lámina. Seguir lavando hasta que éste no arrastre más colorante.  Lavar con agua.  Cubrir con solución de safranina o Fucsina de Gram y dejar 1 min.  Lavar y secar.  Observar con los objetivos y determinar forma, disposición y relación de tamaños de las distintas bacterias. Describa sus observaciones.













Las bacterias Gram + se observarán de color azul- violeta y las Gram- rosadas. Determinar forma, disposición y tamaño relativo y reacción al Gram de las diferentes bacterias presentes. Podrá detectar dos tipos de

bacterias: Streptococus thermophilus , el cual forma largas cadenas de células esféricas alineadas, este es el responsable de la acidificación de la leche y Lactobacilus bulgaricus compuesto por las células bacilares largas y finas, el cual genera la trasformación de la leche a yogurt. Figura 5. Resumen de tinción de Gram. Tomado de Google. Relación de células procariotas y eucariotas.  Tomar un palillo de dientes y realizar un frotis sobre el epitelio interno de la mejilla y colocarlo sobre un portaobjetos haciendo zigzag sobre el y teñir con azul de metileno.  Salir del laboratorio y consumir un poco de yogurt.  Esperar dos minutos y realizar un frotis de la mejilla interna.  Esparcir la muestra sobre un portaobjetos; dejar secar y teñir con azul de metileno  Secar y observar las células procariotas adosadas sobre las células del epitelio escamoso de la mejilla. Describir sus observaciones











PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS ¿Porque se debe utilizar coloraciones para observar los microorganismos?










¿Para qué se emplea la coloración de azul de metileno?










**¿Según Gram como se dividen las bacterias?





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