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informe de sanidad acuicolaaaa
Tipo: Exámenes selectividad
Subido el 24/03/2022
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La camaronicultura existe en 18 países de América Latina, sin embargo, con la expansión territorial de esta actividad y el desarrollo de técnicas de diagnóstico de enfermedades, han sido identificados nuevos agentes patógenos entre ellos el síndrome de Taura (TS) en Litopenaeus vannamei ocasionando mortalidades del 90 % en los cultivo.
Se trata de un conjunto de enfermedades sistémicas que aparecen tanto en piscicultura continental como marina, producidas por bacterias del género Vibrio. Los vibrios más importantes por su implicación económica o por su frecuencia en nuestro país son V. anguillarum, V. alginolyticus, V. vulnificus. Son bacterias ubicuas en el agua, principalmente en ambientes marinos, de las más patógenas descritas para peces, afectando a peces de vida libre, cultivados y en moluscos y crustáceos. Algunos incluso están implicados en infecciones de carácter zoonótico (V. alginolyticus, V. vulnificus). IV. METODOLOGÍA 4.1. METODOS DE DIAGNOSTICO El aislamiento e identificación de V. anguillarum a partir de muestras de órganos lleva al diagnóstico de la enfermedad, obteniéndose buenos crecimientos empleando medios elaborados con agua de mar. A veces resulta difícil diferenciar V. anguillarum de V. splendidus y V. pelagicus, que afectan por ejemplo, al rodaballo. También se han desarrollado métodos inmunológicos: ELISA, IF, aglutinación; y métodos moleculares (PCR, sondas de hibridación). 4.2. SIGNOS CLÍNICOS Los animales afectados por estos microorganismos presentan una sintomatología común, caracterizada por la aparición de diversos cuadros clínicos:
oscurecimiento de la piel. Internamente a veces las hemorragias en cavidad abdominal pueden producir adherencias entre las vísceras. 4.3. TRATAMIENTO El tratamiento antibiótico es a base de oxitetraciclina, nitrofurantoina, sulfasoxazol. No obstante, muchos peces presentan anorexia, por lo que no ingieren los antibióticos. Además, hay que señalar que muchas cepas son resistentes a la amplicilina, que fue el primer antibiótico que se empleó frente a estas bacterias. Existen diez serotipos de V. anguillarum, de los cuales sólo tres están implicados como patógenos: O1, O2 y en menor medida O3. Esto es importante a la hora de elaborar vacunas eficaces. Existen vacunas comerciales frente a los serotipos O1 y O2, así como vacunas mixtas de V. anguillarum junto con A. salmonicida. Estudios recientes han descrito la presencia en el mucus de la dorada de unos péptidos de capacidad antimicrobiana, que se pueden aplicar para la prevención de esta vibriosis. RESULTADOS Y DISCUSIONES Existen centros donde se está estudiando la selección de peces transgénicos resistentes a la enfermedad. Vibriosis por V. alginolyticus Es una bacteria ampliamente distribuida, y afecta a muchas especies: dorada, lubina, rodaballo, mero. También a humanos, por lo que puede estar implicada en zoonosis. La bacteria es saprofita en el intestino de muchas especies, por lo que se comporta como un patógeno oportunista, produciéndose los brotes por situaciones muy estresantes.
Método de diagnóstico Observaciones en fresco y macerados Se ha probado la tinción con una solución de yodo, de macerados de partes del tracto digestivo fuertemente infectadas por rickettsias y de heces fecales de animales en avanzado estado de enfermedad, para observaciones en fresco bajo el microscopio. En ocasiones son distinguibles cuerpos esféricos con características granulosas y del tamaño característico de las rickettsias observadas a nivel histológico. Actualmente se está comparando la precisión de esta sencilla técnica con identificación mediante ácidos nucleicos y ampliación por PCR (ver más adelante). Otra técnica de diagnóstico consiste en obtener pequeños macerados (alrededor de 2 mm2 ) del tracto digestivo colocados en un portaobjetos, la muestra se seca y posteriormente se hidrata en una solución de Hoechst 33258 en agua destilada e incubada en la oscuridad. La muestra se observa bajo microscopio de epifluorescencia y filtros en busca de las colonias de bacterias. Histología y microscopía electrónica A nivel histológico se manifiesta una desorganización de las fibras musculares del pie. En los epitelios columnares del esófago y en especial en la porción del post-esófago se observan células infectadas. Estas se ven hipertrofiadas y en su citoplasma hay colonias de bacterias intracelulares fuertemente teñidas (Fig. 1) que desplazan al núcleo de la célula infectada. En infecciones severas, se observa metaplasia de los epitelios y desprendimiento celular y de colonias libres hacia el lumen del tracto digestivo.
Fig. 1. Tejido epitelial columnar del post-esófago del abulón rojo Haliotis rufescens, afectado por el Síndrome de Deshidratación. Los puntos obscuros de diverso tamaño muestran las colonias de rickettsias en el interior de las células infectadas. Nótese la metaplasia del epitelio y el desprendimiento de células infectadas y mucus. Tinción hematoxilina eosina (40X) Las bacterias son fácilmente observables con tinción rutinaria de Hematoxilina–Eosina o utilizando tinciones especiales para rickettsias como la tinción de Pikerton. Mediante microscopía electrónica las bacterias se ven de forma redondeada con paredes celulares trilaminares (Fig.2). Fig. 2. Fotografía de microscopía electrónica que muestra una Colonia de la rickettsia “Candidatus Xenohaliotis californiensis” en el interior del citoplasma de una célula columnar del post-esófago del abulón rojo Haliotis rufescens, afectado por el Síndrome de Deshidratación. Nótese la pared trilaminar de las bacterias
SÍNDROME DE TAURA EN Litopenaeus vannamei I. INTRODUCCIÒN La camaronicultura tiene sus inicios en la década del ‘60 incrementándose rápidamente en la del ‘70, surgiendo como una de las fuentes de mayores ingresos de divisas por sus elevadas producciones. En la actualidad y según estudios de la FAO, aún existen 18 países de América Latina que se dedican a la actividad específicamente con especies del género Penaeus (también llamado Litopenaeus ). Sin embargo, con la expansión territorial de esta actividad y el desarrollo de técnicas de diagnóstico de enfermedades, han sido identificados nuevos agentes patógenos (OIE, 2019). El síndrome del Taura (TS) afecta a la principal especie de cultivo comercial Litopenaeus vannamei ocasionando mortalidades del 90 % en los cultivos, de lo cual se reflejan en la caída de la producción elevando considerablemente los costos de producción (Broke, 1995), el virus del síndrome de Taura ataca en diferentes estadios en post-larvas (PI), juveniles y adultos. Es un virus con una sola cadena de ARN, perteneciente a la familia Dicistroviridae, género Cripavirus invade y se replica en el citoplasma de las células epiteliales de la epidermis del exoesqueleto y epidermis cuticular de branquias, intestino anterior (esófago y estómago) y del intestino posterior. Llega a infectar a la glándula de la antena, órgano hematopoyético, hepatopáncreas, epitelio intestinal, especialmente de las cecas anterior y posterior. Las partículas virales del TSV pueden sobrevivir fuera de la célula hospedera conservando su patogenicidad a temperaturas entre 0° a 120°C y en el agua contaminada puede permanecer activo hasta 14 días. El principal mecanismo de infección es horizontal al comer el camarón sano restos de animales infectados o alimento contaminado. Estas partículas infectivas también pueden proceder de las heces de aves e insectos alimentados con animales infectados o liberadas de células de animales infectados muertos.El mecanismo de infección vertical aún no está comprobado, aunque existen evidencias que hacen sospechar su existencia (Aguado García et al., 2008).
El síndrome de Taura es muy conocido como una enfermedad que se presenta durante la fase de crianza de P. vannamei, lo cual ocurre de los 14 a los 40 días después de la siembra de las postlarvas en los estanques. Por lo tanto, los camarones afectados tienden a ser típicamente juveniles de aproximadamente 0.05 g a menos de 5 g. Los camarones más grandes también pueden ser afectados, especialmente si nunca han sido expuestos al virus (Morales & Cuellar, 2008). La enfermedad exhibe una fase aguda y otra de recuperación (crónica), las cuales pueden distinguirse a simple vista. Fase Peraguda/aguda: en los camarones moribundos, durante la fase peraguda de la enfermedad, los signos observables a simple vista incluyen expansión de los cromatóforos rojos, lo cual le imparte al camarón una coloración general que va de rosada a rojiza y a los urópodos una coloración roja (Fig. 3). Los animales en la fase peraguda tienden a morir durante la ecdisis (proceso de muda). Los camarones que muestran estos signos peragudos, generalmente también tienen la cutícula suave, el intestino vacío y se encuentran en el estadío “D” del ciclo de muda (ecdisis). Los camarones en esta fase de la enfermedad pueden o no presentar su cutícula blanda y expansión de los cromatóforos rojos. Es posible observar a tales camarones comportándose y alimentándose normalmente. Fase crónica/recuperación: en los estanques, cantidades bajas o moderadas de camarón tienden a presentar lesiones multifocales melanizadas del tipo de la enfermedad de la concha (Fig. 4.) III. OBJETIVOS ● Identificar los métodos de diagnóstico en el virus síndrome de Taura en P. vannamei. ● Analizar la prueba o técnica con mayor eficacia en el diagnóstico de virus síndrome de Taura.
● Analisis histopatologico Se aplica el líquido de Davidson en el cefalotórax y abdomen, mantenerlos en el fijador por 24 horas y luego se los coloca en alcohol etílico al 70%, los individuos son divididos en dos secciones longitudinales y éstas en tres secciones transversales: cefalotórax, luego los tres primeros segmentos abdominales y los dos últimos segmentos abdominales. Las secciones son deshidratadas en series continuas ascendentes de etanol por una hora en cada concentración para la clarificación se empleó xilol y la impregnación en parafina en el Paraplast. Los cortes son de 6 μm de espesor y teñidos con hematoxilina-eosina. Corte histológico a través del estómago de un juvenil P. vannamei en la etapa peraguda de infección por TSV. Se muestran áreas necróticas prominentes (la flecha gruesa señala un ejemplo) en el epitelio cuticular, el cual normalmente secreta la parte acelular de la cutícula. Adyacente a las lesiones necróticas focales es posible observar células epiteliales aparentemente normales (la flecha delgada señala algunos ejemplos). Tinción: H&E de Mayer-Bennett. Magnificación 300X. Preparación en húmedo que muestra la porción de un urópodo de una postlarva de P. vannamei en la etapa peraguda de la infección por TSV. Este espécimen se encontraba en el estadío D del ciclo de muda (según la separación que se puede observar entre la cutícula “vieja” y la “nueva”). La flecha de la izquierda señala un área necrótica en el epitelio cuticular (área desorganizada y con una abundancia de pequeñas esferas refráctiles, las cuales son en realidad núcleos picnóticos y cariorrécticos) mientras que la flecha en la esquina superior derecha señala una porción de epitelio cuticular aparentemente normal. Se pueden observar también algunos cromatóforos rojos en el tejido conectivo sub-cuticular del urópodo. Tinción: Preparación en húmedo sin teñir. Magnificación 300X.
Los camarones afectados con signos conspicuos, presentaban una coloración roja intensa (Fig.1) en telson, urópodos y pleópodos, en las márgenes del caparazón y el cuerpo algo blando semejantes a animales en etapa de post muda temprana, caracterizada porque la cutícula es resbaladiza y de consistencia membranosa muy suave. Áreas necrotizadas en el exoesqueleto del abdomen. Alteraciones de comportamiento camarones moribundos, las que constituyen el primer indicio observable de la presencia de un brote importante de la enfermedad. Fig. 1. Ejemplares con TSV, cutícula Fig. 2. Juveniles moribundos con blanda y uròpodos rojizos. en fase aguda. Fig. 3. Uropodos rojizos e irregularidad Fig.4. Juvenil de P. vannamei se en los bordes del epitelio cuticular. se encuentra en etapa crònica de TSV.
La falta de medidas de bioseguridad contribuyen a la propagación del TSV en el cultivo afectando directamente a la producción de la camaronicultura. Los Tècnicas moleculas e histopatologìa usados para la detecciòn e identificaciòn de TSV tienen una mayor porcentaje de fidelidad. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÀFICAS Aguado García, N., Boada, M., & De Donato, M. (2008). Detección del síndrome del virus del Taura (TSV) en Litopenaeus vannamei (BOONE) del occidente de Venezuela. Revista Científica, 18(2), 134-141. Brock, J.A.; Gose, R.; Lightner, D.V.; HASSON, K. An Overview on Taura Syndrome, an Important Disease of Farmed Penaeus vannamei. In: Swimming Through Troubled Water. Proceedings Special Session Shrimp Farming, Aquaculture C.L. Browdy & J.S. Hopkins (Eds). World Aquaculture Society, Baton Rouge, February 15-19, Louisiana, USA: 84-94 pp. 1995. Boy, C. Revisando el desequilibrio iónico en el cultivo de camarón a baja salinidad. Global Acuaculture Alliance, en Linea: https://www.aquaculturealliance.org/advocate/revisando-el-desequilibrio-i onico-en-el-cultivo-de-camaron-a-baja-salinidad/. Abril 2018. Organizaciòn internacional de epizootias (OIE). Manual de Tecnicas de Diagnostico en Animales Acuàticos. En Linea: https://www.oie.int/es/que-hacemos/normas/codigos-y-manuales/acceso-en -linea-al-manual-acuatico/?id=169&L=1&htmfile=chapitre_taura_syndro me.htm. 2019. Organizaciòn internacional de epizootias (OIE), Manual de Tecnicas de Diagnostico en Animales Acuàticos. Manual de Enfermedades de Animales Acuáticos de la Organización Internacional de Epizootias (OIE), Francia. On Line: http://www.oie.int/eng/normes/fmanual/ Asummry.htm. Septiembre 2006.
