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son documentos de trabajos, Guías, Proyectos, Investigaciones de Fisiología

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Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2019/2020

Subido el 18/10/2022

cristhell-vasquez-ayala
cristhell-vasquez-ayala 🇵🇪

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PRACTICA No 7
METABOLISMO DE LIPIDOS: HIGADO GRASO EXPERIMENTAL
RELACION DE EXPERIMENTOS
1. Producción de un hígado graso en rata
2. Determinación de ácidos grasos en el hígado de una:
- Rata control
- Rata a la cual se ha administrado Etionina
- Rata a la cual se ha administrado Etionina + Metionina
INTRODUCCION
El rol que cumple el hígado en el metabolismo lipídico es sumamente importante. En
este sentido podemos decir que los siguientes procesos se realizan en la:
- Oxidación de los ácidos grasos
- Síntesis de ácidos grasos y colesterol
- Síntesis de lipoproteinas plasmáticas: Lipoproteinas de muy baja densidad
(VLDL); lipoproteinas de alta densidad (HDL)
- Síntesis de ácidos biliares
- Se encarga casi exclusivamente de la síntesis de cuerpos cetónicos
En ocasiones puede ocurrir alteraciones de estos procesos en el hígado, lo que determina
un anormal aumento en su contenido graso, esta situación se denomina hígado graso o
esteatosis hepática. Esta entidad merece una especial atención del médico ya que resulta
ser con frecuencia la antesala de la cirrosis hepática.
Desde un punto de vista general podemos considerar hasta cuatro situaciones
importantes que pueden ocasionar hígado graso.
- Aumento en la cantidad de ácidos grasos que llegan al hígado; sea procedentes
de la alimentación o de otros tejidos
- Menor oxidación de los ácidos grasos en el hígado
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PRACTICA No^7 METABOLISMO DE LIPIDOS: HIGADO GRASO EXPERIMENTAL RELACION DE EXPERIMENTOS

  1. Producción de un hígado graso en rata
  2. Determinación de ácidos grasos en el hígado de una:
    • Rata control
    • Rata a la cual se ha administrado Etionina
    • Rata a la cual se ha administrado Etionina + Metionina INTRODUCCION El rol que cumple el hígado en el metabolismo lipídico es sumamente importante. En este sentido podemos decir que los siguientes procesos se realizan en la:
  • Oxidación de los ácidos grasos
  • Síntesis de ácidos grasos y colesterol
  • Síntesis de lipoproteinas plasmáticas: Lipoproteinas de muy baja densidad (VLDL); lipoproteinas de alta densidad (HDL)
  • Síntesis de ácidos biliares
  • Se encarga casi exclusivamente de la síntesis de cuerpos cetónicos En ocasiones puede ocurrir alteraciones de estos procesos en el hígado, lo que determina un anormal aumento en su contenido graso, esta situación se denomina hígado graso o esteatosis hepática. Esta entidad merece una especial atención del médico ya que resulta ser con frecuencia la antesala de la cirrosis hepática. Desde un punto de vista general podemos considerar hasta cuatro situaciones importantes que pueden ocasionar hígado graso.
  • Aumento en la cantidad de ácidos grasos que llegan al hígado; sea procedentes de la alimentación o de otros tejidos
  • Menor oxidación de los ácidos grasos en el hígado
  • Mayor síntesis de ácidos grasos en el hígado
  • Disminución en la salida lipídica del hígado generalmente debido a un defecto en la síntesis de lipoproteinas plasmáticas. METIONINA ATP Metionina Adenosil Transferasa PPi + Pi ATP

METIONIL - AMP

ATP PPi Metionil-tRNA Sinteasa S-Adenosilmetionina^ Met-tRNA Síntesis Proteica S-adenosilhomocisteina LIPOPROTEINAS Fosfatidil colina Fosfatidil etanolamina tRNA AMP Estrógeno ETIONINA ATP Metionina Adenosil Transferasa PPi + Pi ATP

ETIONIL - AMP

ATP PPi Metionil-tRNA Sinteasa S-Adenosiletionina Síntesis Proteica S-adenosilhomocisteina LIPOPROTEINAS Fosfatidil etilcolina Fosfatidil etanolamina tRNA Estrógeno Arriba: Mecanismo por el cual la metionina participa en la síntesis de lipoproteinas. Abajo: Como la etionina afecta la síntesis de lipoproteinas. FIGURA Nº 8.1. Rol de la Metionina y efecto de Etionina sobre el metabolismo lipídico

2.- Rata tratada con Etionina: Se inyectará intraperitonealmente 3 ml de una solución de DL-Etionina (16,7 mg/ml). Inyectar la misma cantidad alas 2,5 horas; 5 horas y 7 horas después de la primera inyección. 3.- Rata tratada con Etionina + Metionina: Recibe el mismo tratamiento que la rata con etionina, pero además se le inyecta 3 ml de L-metionina ( 20 mg/ml ) una hora antes de la primera inyección de etionina y una hora después de cada inyección de etionina. En este experimento se usarán ratas hembras, debido a que el incremento de grasa hepática es mucho más pronunciada en hembras que en machos. DETERMINACION DE LOS ACIDOS GRASOS

  • Transcurridas 24 horas de iniciado el tratamiento de los animales se les sacrifica y se les retira rápidamente del hígado un trozo de 2,5 g, el que se fragmenta con la ayuda de tijeras y se deposita en un Erlenmeyer de 250 ml.
  • Se le añade luego 10 ml de hidróxido de potasio al 33% y 40 ml de etanol al 96% con alcohol isoamílico al 0,4%.
  • Se calienta la preparación en baño maría hirviente durante 20 minutos, teniendo cuidado que no se proyecte el contenido.
  • Añadir 17 ml de HCl al 25%, mezclar y dejar en reposo algunos minutos
  • Añadir luego con pipeta volumétrica 25 ml de éter de petróleo.
  • Tapar cuidadosamente el recipiente y agitar fuertemente durante un minuto. Dejar en reposo por 10 minutos para conseguir una adecuada separación de las fases éter de petróleo y etanol-ácido. Para esta última etapa se puede utilizar una probeta en lugar del Erlenmeyer, con la ventaja de mirar mejor la separación de las dos fases.
  • Retirar 5 ml de la capa etérea (superior), y colocarlos en un Erlenmeyer y añadir 1 ml de solución de etanol-alcohol isoamílico y dos gotas de azul de timol.
  • Finalmente titular con NaOH 0.1 N hasta obtener un color azul verdoso que debe permanecer estable por lo menos 3 minutos. Para efecto de los cálculos asuma que el PM promedio de los ácidos grasos que se están titulando es de 284. Complete la siguiente tabla:

Características del hígado Peso total Color Consistencia Rata control 6.8 gr Rata con etionina 7.3 gr Rata con Etionina + Metionina 7.2 gr Anote el contenido de ácidos grasos en miliequivalentes en el volumen de titulación y en miligramos por gramo de tejido hepático húmedo. Contenido de ácidos grasos NaOH 0,1 N ml gastados mEq / 5 ml mEq / 25 ml mg de A.G. por gramo de hígado Rata Control 1. Rata con etionina (E)

Rata con E + Metionina

INTERROGANTES

1.- Haga una interpretación adecuada de los esquemas mostrados 2.- ¿Por qué la administración de adenina revierte en cierta forma los efectos de la etionina? 3.- Cite por lo menos cinco alteraciones bioquímicas que se producen en los animales tratados con etionina 4.- ¿Por qué la deficiencia de ácido pantoténico puede determinar hígado graso? 5.- ¿Qué conocimiento tiene sobre el hígado graso inducido por etanol?